PGE1对LPS诱导枯否细胞分泌炎症细胞因子的抑制作用的实验研究

论文摘要

目的:探讨前列腺素E1（PGE1）对内毒素脂多糖（LPS）诱导的大鼠枯否细胞（Kupffer Cell,KC）分泌炎症细胞因子的影响。观察大鼠枯否细胞在LPS刺激及PGE1作用下炎症细胞因子水平及核因子-kB（NF-kB）的变化,进一步探讨PGE1的抗炎作用及其机制,为临床应用提供新的启示。方法:采用胶原酶原位循环灌注和Nycodez密度梯度离心法分离得到高纯度的大鼠枯否细胞,在过夜培养后冲洗两遍,以4-6x105/ml的细胞浓度,接种于24孔培养板。分离并培养枯否细胞48小时后,分别设立不同浓度PGE1组,确立其对细胞无毒性的剂量范围。向枯否细胞中加入LPS及PGE（1分三种不同浓度）,分为对照组、刺激组（LPS 10ng/ml）和PGE1组（LPS+PGE1）,刺激原代培养的枯否细胞3小时。观察不同浓度PGE1对大鼠枯否细胞TNF-α（肿瘤坏死因子-α）及IL-6（白细胞介素-6）释放的影响。并观察LPS及PGE1的刺激作用对枯否细胞中NF-kB活性的影响。应用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测TNF-α、放免法（RIA）测定IL-6水平。采用凝胶电泳迁移率实验（EMSA）检测NF-kB活性和EMSA特异性。结果:离体正常大鼠的枯否细胞经过LPS刺激后,NF-kB活性显著增强,上清液中TNF-α及IL-6分泌水平均明显高于对照组（P<0.01）;不同浓度组PGE1均能显著降低TNF-α、IL-6的释放水平及NF-kB的活性（P<0.05）,且量效关系显著。结论:各种疾病造成急慢性肝损伤时,LPS通过活化NF-kB,进一步启动TNF-α、IL-6等炎症因子大量表达。枯否细胞的过度活化、大量炎症因子的释放、血中高水平的内毒素导致的内毒素血症等,都在发病中起着十分关键的作用。PGE1可以通过下调NF-kB活性,减轻枯否细胞的过度激活,减少TNF-α、IL-6等炎症因子大量表达,降低血中高水平的内毒素等多个环节的调节对机体起到保护作用。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料与方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢