鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性研究

论文摘要

目的了解长沙地区鲍曼不动杆菌的耐药现状和耐药水平,为临床治疗鲍曼不动杆菌感染、合理应用抗生素提供实验依据和指导;研究鲍曼不动杆菌耐药程度与其主动外排泵蛋白的相关性,初步探讨鲍曼不动杆菌主动外排泵基因过度表达的转录调控机制。方法首先用纸片扩散法检测64株临床鲍曼不动杆菌对8种抗菌药物的敏感性;将其分为A组（对1～2种抗生素耐药）、B组（对3～5种抗生素耐药）和C组（对6～8种抗生素耐药）;检测64株临床鲍曼不动杆菌对罗丹明6G的外排情况,筛选出罗丹明6G外排明显增加的菌株;并用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测主动外排泵基因adeABC的表达水平;应用PCR方法扩增adeRS基因片段并测序,探索adeABC基因表达上调的可能机制。结果64株鲍曼不动杆菌中有4株对1～2种抗生素耐药（A组）,对3～5种抗生素耐药的有33株（B组）,对6～8种抗生素耐药的有27株（C组）;多重耐药组鲍曼不动杆菌对罗丹明6 G外排明显增高,外排程度A组＜B组＜C组;罗丹明6G外排增强的多重耐药不动杆菌其主动外排泵基因adeABC的表达水平显著增高;且存在AdeRVal228→Ile、Ile243→Val变异。结论①长沙地区鲍曼不动杆菌的耐药现象严峻;②鲍曼不动杆菌多重耐药与药物主动外排增强有关;③adeABC基因的过度表达是鲍曼不动杆菌多重耐药的重要原因。④AdeRS中的AdeR Val228→Ile、Ile243→Val变异与adeABC表达上调相关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 英文缩略表
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1 材料
• 1.1 菌株来源
• 1.2 主要试剂以及来源
• 1.3 主要仪器
• 1.4 培养基
• 2 方法
• 2.1 实验技术路线
• 2.2 临床菌株的收集和保存
• 2.3 纸片扩散法药敏实验
• 2.4 罗丹明6G外排情况测定
• 2.5 主动外排泵基因adeABC的表达水平测定
• 2.6 adeRS上调adeABC表达的机制初探
• 第二章 结果
• 1 药敏结果
• 2 罗丹明6G外排情况
• 3 adeABC基因mRNA表达水平测定
• 3.1 鲍曼不动杆菌总RNA的提取
• 3.2 RT-PCR产物分析结果并作统计分析。
• 4 adeRS基因片段的测序以及分析
• 4.1 adeRS基因片段PCR扩增结果
• 4.2 adeRS基因片段测序结果
• 4.3 氨基酸序列比对
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 第五章 进一步实验
• 论文参考文献
• 综述
• 致谢
• 在读期间完成的论文