本文主要研究内容
作者叶梦楠（2019）在《不同Bt抗虫基因对水稻的复合转化和绿色组织特异表达型抗虫水稻的检测与验证》一文中研究指出：水稻是世界上最重要的粮食作物之一,而鳞翅目昆虫如螟虫等是水稻生产中的主要虫害,常规的农药防治螟虫不但增加成本投入,而且还容易诱使昆虫产生抗药性。基于单一抗虫基因容易使昆虫产生抗性以及公众对于转基因水稻食用安全性过度担忧的现状,本文从以下两方面开展了研究:聚合两个不同的抗虫基因以培育持久抗虫水稻新材料;对已有转化体进行鉴定和分析以尽快获得我们期望的胚乳零表达型抗虫水稻新材料,并取得了如下研究结果:一、绿色组织特异表达性抗虫水稻新材料的检测与验证利用PCR技术从12个不同的转化体中获得8个纯合的转基因株系。通过Southern杂交,筛选到5个单拷贝的材料。对5个转化系中的Cry1Ab/1Ac蛋白进行定量分析,结果显示:在分蘖期和灌浆期叶片和茎秆中,5个转化系均能检测到抗虫蛋白,叶片中的表达量显著高于茎秆。五个转化系的Cry1Ab/1Ac蛋白含量在整体水平上比阳性对照浙优3号高,部分转化系叶片中的表达量比对照甚至高出10倍左右。在胚乳中,在各转化系内检测值与阴性对照之间没有显著差异,显著低于浙优3号的0.23μg/g。此外,田间对转基因植株进行抗虫鉴定,结果显示野生型对照在人工接虫二化螟后单株分蘖受危害率高达68.04%,自然感虫稻纵卷叶螟后单株受危害叶片数达到24片;而转基因植株受二化螟危害比例均低于2.88%,受卷叶螟单株受危害叶片不高于0.37片。表明转基因植株对螟虫具有高度的抗性。因此,在绿色组织特异表达型抗虫水稻新材料中,Cry1Ab/1Ac蛋白在叶片和茎秆等绿色组织中大量且稳定地表达,在胚乳中低表达或不表达,实现了预期的效果。二、通过复合遗传转化聚合Cry和ViP两个不同Bt抗虫基因通过农杆菌介导法将Vip3ArLr1基因转化到携带Cry1Ab/1Ac抗虫基因的两系光温敏不育系208S中,共获得40株绿苗。Southern杂交结果显示40株绿苗中只有1株携带Vip3ArLr1基因,这代表了一个转化体,但因发现一些农艺性状有缺陷,相应的表型鉴定需要等到回交改良成功之后再进行。
Abstract
shui dao shi shi jie shang zui chong yao de liang shi zuo wu zhi yi ,er lin chi mu kun chong ru ming chong deng shi shui dao sheng chan zhong de zhu yao chong hai ,chang gui de nong yao fang zhi ming chong bu dan zeng jia cheng ben tou ru ,er ju hai rong yi you shi kun chong chan sheng kang yao xing 。ji yu chan yi kang chong ji yin rong yi shi kun chong chan sheng kang xing yi ji gong zhong dui yu zhuai ji yin shui dao shi yong an quan xing guo du dan you de xian zhuang ,ben wen cong yi xia liang fang mian kai zhan le yan jiu :ju ge liang ge bu tong de kang chong ji yin yi pei yo chi jiu kang chong shui dao xin cai liao ;dui yi you zhuai hua ti jin hang jian ding he fen xi yi jin kuai huo de wo men ji wang de pei ru ling biao da xing kang chong shui dao xin cai liao ,bing qu de le ru xia yan jiu jie guo :yi 、lu se zu zhi te yi biao da xing kang chong shui dao xin cai liao de jian ce yu yan zheng li yong PCRji shu cong 12ge bu tong de zhuai hua ti zhong huo de 8ge chun ge de zhuai ji yin zhu ji 。tong guo Southernza jiao ,shai shua dao 5ge chan kao bei de cai liao 。dui 5ge zhuai hua ji zhong de Cry1Ab/1Acdan bai jin hang ding liang fen xi ,jie guo xian shi :zai fen nie ji he guan jiang ji xie pian he jing gan zhong ,5ge zhuai hua ji jun neng jian ce dao kang chong dan bai ,xie pian zhong de biao da liang xian zhe gao yu jing gan 。wu ge zhuai hua ji de Cry1Ab/1Acdan bai han liang zai zheng ti shui ping shang bi yang xing dui zhao zhe you 3hao gao ,bu fen zhuai hua ji xie pian zhong de biao da liang bi dui zhao shen zhi gao chu 10bei zuo you 。zai pei ru zhong ,zai ge zhuai hua ji nei jian ce zhi yu yin xing dui zhao zhi jian mei you xian zhe cha yi ,xian zhe di yu zhe you 3hao de 0.23μg/g。ci wai ,tian jian dui zhuai ji yin zhi zhu jin hang kang chong jian ding ,jie guo xian shi ye sheng xing dui zhao zai ren gong jie chong er hua ming hou chan zhu fen nie shou wei hai lv gao da 68.04%,zi ran gan chong dao zong juan xie ming hou chan zhu shou wei hai xie pian shu da dao 24pian ;er zhuai ji yin zhi zhu shou er hua ming wei hai bi li jun di yu 2.88%,shou juan xie ming chan zhu shou wei hai xie pian bu gao yu 0.37pian 。biao ming zhuai ji yin zhi zhu dui ming chong ju you gao du de kang xing 。yin ci ,zai lu se zu zhi te yi biao da xing kang chong shui dao xin cai liao zhong ,Cry1Ab/1Acdan bai zai xie pian he jing gan deng lu se zu zhi zhong da liang ju wen ding de biao da ,zai pei ru zhong di biao da huo bu biao da ,shi xian le yu ji de xiao guo 。er 、tong guo fu ge wei chuan zhuai hua ju ge Cryhe ViPliang ge bu tong Btkang chong ji yin tong guo nong gan jun jie dao fa jiang Vip3ArLr1ji yin zhuai hua dao xie dai Cry1Ab/1Ackang chong ji yin de liang ji guang wen min bu yo ji 208Szhong ,gong huo de 40zhu lu miao 。Southernza jiao jie guo xian shi 40zhu lu miao zhong zhi you 1zhu xie dai Vip3ArLr1ji yin ,zhe dai biao le yi ge zhuai hua ti ,dan yin fa xian yi xie nong yi xing zhuang you que xian ,xiang ying de biao xing jian ding xu yao deng dao hui jiao gai liang cheng gong zhi hou zai jin hang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自浙江大学的叶梦楠，发表于刊物浙江大学2019-05-20论文，是一篇关于启动子论文,胚乳零表达论文,水稻论文,浙江大学2019-05-20论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自浙江大学2019-05-20论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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