湘西杜仲有效成分提制分析及其指纹图谱研究

湘西杜仲有效成分提制分析及其指纹图谱研究

论文摘要

随着人们对化学药品毒副作用的认识及对健康要求的不断提高,天然药物的用途和需求不断扩大,中草药的优势和特色越来越被世界重视。如何充分提取中草药的有效成分,提高中草药的利用率和临床疗效,是中药现代化面临的主要课题和重要任务。本文以湘西重要中药资源—杜仲为研究对象,以现代新兴样品预处理技术(微波提取技术等)为工具,从杜仲中提取和分离以绿原酸为代表的多酚酸类化合物,研究了各种因素对提取效率的影响。另外,本文还建立了杜仲药材指纹图谱质量控制标准,并对杜仲药材的微量元素及其抗菌活性进行了相关研究,为合理利用杜仲药材提供了相关参照。具体内容如下:1.杜仲药材有效成分绿原酸的提制分析研究研究比较采用不同的提取溶剂、提取方法、提取条件来优化提取工艺,得到绿原酸的最佳提取条件。实验结果表明:微波助提取比常规提取方法大大缩短了提取时间,提高了提取效率;采用正交实验因子设计法对微波提取条件进行了优化(最佳提取工艺为:乙醇浓度60%、固液比1:50、辐射时间2min、微波压力2atm);在最佳液相色谱操作条件下,测定了杜仲叶、未烘烤的杜仲皮、已烘烤的杜仲皮和中成药杜仲平压片中绿原酸的含量。实验可知杜仲叶中绿原酸明显高于杜仲皮,且杜仲叶资源丰富、易得,为开发绿原酸提供了丰富的资源。本文研究得出:微波提取技术具有高效、便捷、快速的优点;杜仲药材有效成分绿原酸的分析方法简便、准确、线性范围宽、重现性好,适合对含有绿原酸的原料和产品进行检测和质量控制。2.杜仲专属性对照物质及其指纹图谱的创建利用高效液相色谱(HPLC)和液-质联用技术(LC-MS)对杜仲药材进行指纹图谱专属性研究。色谱分离过程研究采用梯度洗脱程序,采用“计算机相似度评价”软件来对不同杜仲药材的相似度进行评价。实验结果发现:地理位置越靠近的杜仲药材的相似度越接近,不同地理位置(不同气候条件)的杜仲药材质量稍有差异。同时结合质谱数据,确定了杜仲药材的主要活性成分,适用于杜仲药材的基源鉴定和质量评价。3.杜仲药材中微量元素的测定杜仲被称为神奇之树,它的叶、皮和花中都含有人体不可缺少的微量元素,具有很高的药用价值。本文研究采用火焰原子吸收光谱法对杜仲药材中的多种元素进行了含量测定。实验研究发现:杜仲药材中含有丰富的Mg、Cu、Fe、Zn、Mn等元素,在人体的新陈代谢过程中发挥着重要的作用,且杜仲叶中各元素的含量较杜仲皮要高。杜仲药材中Pb、Cr含量较低,是一种安全无毒副作用的中药,可以放心大胆的用药。杜仲药材中微量元素的研究,为进一步开发利用杜仲药材提供了科学依据。同时本文还对几种植物样品前处理方法进行了对比研究,发现微波消解法具有溶样能力强、速度快、污染少、简单、方便等优点,是目前植物中元素含量测定的最佳样品处理方法。4.杜仲叶提取物的抑菌效果研究以乙醇和水组成的混合溶液作提取剂,从杜仲叶中微波提取主要活性成分绿原酸,并研究了在最佳微波提取条件下提取溶液的抗菌活性。结果表明:杜仲绿原酸具有抗大肠杆菌的生物活性,提取液最低抑菌浓度为100mg/mL。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 绪论
  • 1.1 课题背景及研究意义
  • 1.2 国内外研究状况和进展
  • 1.2.1 中药提取技术
  • 1.2.2 中药分离及浓缩技术
  • 1.2.3 中药检测技术
  • 1.3 微波辅助提取
  • 1.3.1 发展历程
  • 1.3.2 微波提取的条件
  • 1.3.3 微波提取技术的应用
  • 1.3.4 问题与展望
  • 1.4 指纹图谱
  • 1.4.1 发展历程
  • 1.4.2 国内外研究进展
  • 1.4.3 中药指纹图谱的研究方法
  • 1.4.4 中药指纹图谱在中药研究中的应用
  • 1.4.5 问题与展望
  • 1.5 微波消解
  • 1.5.1 研究意义
  • 1.5.2 发展历程
  • 1.5.3 微波消解的应用
  • 1.5.4 微波消解的优缺点
  • 1.5.5 问题与展望
  • 1.6 杜仲的研究进展
  • 1.6.1 杜仲的生物学特征
  • 1.6.2 杜仲的性味
  • 1.6.3 杜仲的化学成分
  • 1.6.4 杜仲绿原酸的研究进展
  • 1.6.5 问题与展望
  • 1.7 本论文的工作设想
  • 第2章 杜仲药材有效成分绿原酸的提制分析
  • 2.1 引言
  • 2.2 实验部分
  • 2.2.1 仪器与试剂
  • 2.2.2 实验方法
  • 2.2.3 色谱条件
  • 2.3 结果与讨论
  • 2.3.1 检测波长的确定
  • 2.3.2 提取溶剂的选择
  • 2.3.3 不同提取方法的比较
  • 2.3.4 提取时间的选择
  • 2.3.5 提取液固比的选择
  • 2.3.6 提取压力的选择
  • 2.3.7 最佳微波提取条件的确定
  • 2.3.8 其他因素的影响
  • 2.3.9 标准曲线和线性关系的考察
  • 2.3.10 方法学考察
  • 2.3.11 样品分析
  • 2.4 小结
  • 第3章 杜仲专属性对照物质及其指纹图谱的创建
  • 3.1 引言
  • 3.2 实验部分
  • 3.2.1 仪器与试剂
  • 3.2.2 实验方法
  • 3.3 结果与讨论
  • 3.3.1 指纹图谱色谱条件确定
  • 3.3.2 指纹图谱色质联用条件确定
  • 3.3.3 供试品溶液制备方法的选择
  • 3.3.4 最佳微波提取条件的选择
  • 3.3.5 杜仲药材专属性对照物质指纹图谱的建立
  • 3.3.6 杜仲药材中主要活性成分的确定
  • 3.3.7 不同产地杜仲药材指纹图谱的比较
  • 3.3.8 各类杜仲药材指纹图谱分析
  • 3.3.9 方法学研究
  • 3.3.10 讨论
  • 3.4 小结
  • 第4章 杜仲药材中微量元素的测定
  • 4.1 引言
  • 4.2 实验部分
  • 4.2.1 仪器与试剂
  • 4.2.2 样品处理
  • 4.2.3 测定方法
  • 4.2.4 标准系列
  • 4.3 结果分析
  • 4.3.1 反应介质选择
  • 4.3.2 不同消解方法的比较
  • 4.3.3 各类杜仲样品中元素含量分析
  • 4.4 小结
  • 第5章 杜仲提取物的抑菌效果研究
  • 5.1 引言
  • 5.2 材料与方法
  • 5.2.1 供试菌
  • 5.2.2 仪器
  • 5.2.3 培养基
  • 5.2.4 中药微波提取物的制备
  • 5.2.5 供试菌种菌悬液的制备
  • 5.2.6 色谱分析条件
  • 5.2.7 抑菌活性实验方法
  • 5.3 结果与讨论
  • 5.3.1 最佳提取工艺的选择
  • 5.3.2 抑菌活性实验结果
  • 5.4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录
  • 相关论文文献

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