染色体22q11微缺失综合征的筛查与诊断及其智能发育状况的研究

论文摘要

染色体22q11微缺失综合征（22q11 Deletion Syndrome,22q11 DS）是常见的遗传性智能发育迟滞疾病之一,发病率高达1/4000,常由22号染色体长臂1.5-3Mb杂合性缺失导致,其临床表型变异广泛,常累及多个系统,影响患儿的身心健康,造成家庭和社会的沉重负担。早期筛查、早期诊断和随访病人,并及时开展特殊教育,能改善患儿的生活质量,对患儿家庭和社会均意义重大。本研究应用SYBR（?） Green I染料的单引物TUPLE1实时荧光定量PCR（Real-Time Polymerase Chain Reaction,RT-PCR）的方法来筛查22q11 DS其DNA拷贝数的改变,并证实这是一种经济、快速和有效的方法。该方法受试者工作特征曲线（Receiver operating characteristic,ROC）下的面积（area under the curve,AUC）高达0.995,与AUC=0.5相比,在统计学上具有显著差异,说明其诊断价值较高;研究中还进一步探讨了筛查的最佳切值问题,结果发现以TUPLE1/G6PDH相对基因拷贝数比值0.79为最佳切值,可达到100%的筛查灵敏度和94.2%的特异度。此外,通过增加22q11微缺失区域的引物数量,进行多引物RT-PCR,还发现了2例不典型缺失病人,同时也收集了缺失位点和缺失片段长度的相关信息,为后续基因型和临床表型的相关性研究提供了基础。本研究于国内首次相对量化了对于22q11 DS有预测诊断意义的临床特征及其组合,较为全面的观察评估了22q11 DS常见报道存在异常的面部、心脏、免疫、内分泌、生长发育、认知和精神行为情况。研究结果显示“综合征性的心脏畸形”（即心脏畸形合并其他两项以上临床表现）这一特征的判别式能力最高,达84.2%,说明其预测诊断22q11 DS的效力最高;进一步Logistic回归分析发现,免疫问题、整体面容异常和先天性心脏病是三项最重要的预测诊断22q11 DS的临床表型变量,并建立了相对应的Logistic回归方程:Y=-8.278+2.240x1+4.317x2+4.164x3,P=exp（y）/[1+exp（y）],以指导临床早期发现病人,提高检出率。迄今,关于我国22q11 DS患儿智能状况的研究尚是空白。本研究应用韦氏儿童智力量表和社会适应量表评价了22q11 DS患儿的智商和社会适应能力。结果发现我国22q11 DS患儿的智力呈轻至中度落后,智能状态较威廉斯综合征患儿好,但其操作智商和言语智商发展不平衡倾向明显,言语智商相对偏差,与美国22q11DS患儿的智商分离趋势相反,考虑受两国不同文化背景,不同的特殊教育系统等环境因素影响。我国22q11 DS患儿的社会适应能力较差,与同智龄小年龄正常儿童相仿,但明显落后与同年龄正常儿童,且各维度发展不均衡。要改善我国22q11DS患儿智力低下的现状,相关的特殊教育的力度尚有待加强,尤其需要强化语言训练;要依据患儿的强项、弱项开展针对性的智力发育干预,同时循序渐进地开展社会适应能力的培训。

论文目录

• 致谢
• 中文摘要
• Abstract
• 缩略语
• 目次
• 1 引言
• 1.1 22q11 DS的命名由来
• 1.2 22q11 DS的流行病学研究
• 1.3 22q11 DS的遗传学相关研究
• 1.3.1 22q11 DS的分子遗传学机制
• 1.3.2 22q11 DS的候选基因研究
• 1.3.3 22q11 DS的检测方法研究
• 1.4 22q11 DS的表型研究
• 1.5 22q11 DS的认知功能和精神行为问题的相关研究
• 1.5.1 22q11 DS的认知功能相关研究
• 1.5.2 22q11 DS的精神行为问题的相关研究
• 1.6 22q11 DS的相关治疗和干预
• 1.7 参考文献
• 2 实时荧光定量PCR在22q11 DS快速筛查中的应用研究
• 2.1 材料与对象
• 2.1.1 主要仪器
• 2.1.2 主要试剂
• 2.1.3 对象
• 2.2 研究方法
• 2.2.1 血基因组DNA抽提
• 2.2.2 RT-PCR检测
• 2.2.3 人外周血淋巴细胞培养及染色体核型分析
• 2.2.4 荧光原位杂交检测
• 2.2.5 统计学分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 RT-PCR质控结果
• 2.3.2 诊断结果
• 2.3.3 ROC曲线评估TUPLE1单引物RT-PCR的诊断价值及最佳切值的选定
• 2.3.4 多引物RT-PCR结果
• 2.4 讨论
• 2.5 小结
• 2.6 参考文献
• 3 22q11 DS的临床特征在其诊断中的作用研究
• 3.1 研究对象和方法
• 3.1.1 研究对象
• 3.1.2 临床资料的采集与评估
• 3.1.3 筛查对象纳入标准
• 3.1.4 确诊22q11 DS的随访
• 3.1.5 统计学分析
• 3.2 结果
• 3.2.1 一般检查情况
• 3.2.2 临床特征变量对22q11 DS诊断的预测
• 3.2.3 22q11 DS组的临床特征分析
• 3.3 讨论
• 3.4 小结
• 3.5 参考文献
• 4 22q11 DS智能发育状况的研究
• 4.1 智商情况的研究
• 4.1.1 研究对象和方法
• 4.1.2 结果
• 4.1.3 讨论
• 4.2 社会适应能力的研究
• 4.2.1 研究对象和方法
• 4.2.2 结果
• 4.2.3 讨论
• 4.3 小结
• 4.4 参考文献
• 全文结论
• 综述
• 简历
• 在读期间科研成果