系统性硬皮病患者外周血B细胞HDACs的表达水平

论文摘要

目的：系统性硬皮病（systemic sclerosis, SSc）是一种以弥漫性皮肤及内脏器官结缔组织纤维化或硬化,最后发展至萎缩为特点的疾病,其病因及发病机制复杂,至今仍不清楚。近年来许多研究发现表观遗传学发病机制在SSc中起重要作用。表观遗传调控是指不涉及DNA序列改变的基因表达调控方式,其涉及的机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰及MicroRNA调控。组蛋白修饰在基因转录调控中占有重要地位,在组蛋白修饰酶HATs、HDACs、HMTs的共同作用下控制着染色质的结构和基因的表达,从而参与特定位点的基因转录调控。至今为止,在SSc患者中进行组蛋白修饰的研究国内外报道甚少。为此,本课题将研究SSc患者B细胞组蛋白去乙酰化酶（HDACs）的表达水平,从而探索组蛋白修饰在SSc发病过程中的作用,为揭示SSc的发病机制开辟新途径。方法：密度梯度离心分离20例SSc患者和16例健康对照者的外周血单个核细胞,磁珠分选B淋巴（CD19）细胞；实时定量聚合酶链反应（real-time RT-PCR）检测HDACs mRNA的表达水平,western blot方法检测HDAC2蛋白表达水平。结果：Real-time RT-PCR结果显示SSc患者B细胞中HDAC2mRNA表达水平较健康对照显著降低。C1、HDAC3、HDAC5、 HDAC6、HDAC8表达水平较正常对照无显著改变；western blot结果显示SSc患者B细胞中HDAC2蛋白表达水平较健康对照显著降低,与相对应mRNA表达水平相一致。结论：系统性硬皮病B淋巴细胞中HDAC2表达水平的下降可能通过影响组蛋白乙酰化水平的方式调节染色质的结构,从而参与特定位点基因转录调控,导致了B淋巴细胞的增殖和活跃、自身免疫的发生。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略词表
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 2.1 研究对象
• 2.2 仪器设备与试剂
• 2.3 实验总流程图
• 2.4 实验方法
• 第三章 结果
• 3.1 SSc外周血B细胞中HDAC1、HDAC2、HDAC3及HDAC6启动子的mRNA水平的表达
• 3.2 Western blot方法检测SSc和健康对照组B细胞中HDAC2的蛋白表达水平
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果