霉菌毒素吸附剂吸附效果的评价

论文摘要

本文选取市场上应用最广的六种国内外霉菌毒素吸附剂（编号1、2、3、4、5、6）以及本实验室研制的三种吸附剂（P1、P2和P3）为研究对象,从简单等温吸附、模拟胃肠道环境等温吸附和动物实际使用三方面评价这些霉菌毒素吸附剂对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的吸附效果,并建立了简单的HPLC检测饲料及原料中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮方法。试验一：霉菌毒素吸附剂吸附效果的体外评价分别在体外简单等温环境和模拟胃肠道环境两方面评价几种霉菌毒素吸附剂对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的吸附效果。简单等温环境下,当黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮浓度为10.0μg·m1-1,吸附剂浓度为1.5 mg·ml-1时,吸附剂1到6以及P1、P2、P39种吸附剂对黄曲霉毒素B1的吸附率分别为83.85%、42.62%、43.51%、75.09%、63.49%、61.32%、64.46%、70.77%和92.93%,对玉米赤霉烯酮的吸附率分别为23.45%、96.02%、20.01%、12.64%、13.38%、16.21%、56.67%、86.30%和97.42%。在模拟胃液环境中,9种吸附剂对黄曲霉毒素B1的吸附率分别为58.37%、12.58%、33.72%、76.94%、54.75%、42.97%、44.55%、50.83%和71.22%,对玉米赤霉烯酮的吸附率分别为95.34%、29.36%、15.08%、41.02%、73.21%、76.15%、23.94%、86.67%和87.09%；在模拟小肠环境中,9种吸附剂对黄曲霉毒素B1的吸附率分别为85.94%、42.62%、47.06%、79.72%、66.04%、58.72%、58.67%、66.08%和75.32%,对玉米赤霉烯酮的吸附率分别为66.48%、72.48%、69.38%、29.63%、82.77%、86.22%、94.55%、96.32%和94.38%。试验二：饲料及原料中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮检测方法的研究对黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮定量分析的高效液相色谱条件进行筛选、优化。最终确定用90%的乙腈溶液提取毒素,经正己烷和二氯甲烷萃取净化后, HPLC检测。在上述色谱条件下,黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮分别在10 ng·ml-1-5.0μg·ml-1。和8.0 ng·ml-1-5.0μg·ml-1l范围内有较好的线性关系,相关系数分别为0.9992和0.9997,检出限分别为10.05 ng·ml-1和7.74 ng·ml-1。平均回收率分别为80.53%～105.28%和90.72%～102.87%,相对标准偏差分别为0.59%～12.83%和2.58%～12.72%。试验三：动物饲养试验试验选取了30头体重在70kg左右的后备母猪,随机分成6个处理组,分别饲喂以下日粮：基础日粮、基础日粮+吸附剂P3+霉玉米、基础日粮+吸附剂1+霉玉米、基础日粮+霉玉米、基础日粮+吸附剂P3、基础日粮+吸附剂1。每组设5个重复。结果表明：1)发霉饲料影响动物的采食量、日增重和饲料利用率,降低动物的生产性能,而霉变饲料中添加吸附剂1或P3可以缓解上述负面影响。2)发霉饲料显著增加了试验猪血清谷氨酰胺转氨酶活性（P<0.05）和血清E2浓度（P<0.05）明显降低血清LH含量（P<0.05）,对其它指标也产生了不同程度的影响,但差异不显著（P>0.05）,霉变饲料中添加吸附剂1或P3明显的缓解了霉菌毒素对血液指标的负面影响。3)添加发霉玉米的三组粪样中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮含量分别为348.55ng·ml-1、2645.99ng·ml-1、322.10ng·ml-1和2628.76ng·ml-1、270.84ng·ml-11992.63ng·ml-1,其它组的粪样中均未检出毒素；血液样品中,除了基础日粮+霉玉米组检出了2.71ng·ml-1的玉米赤霉烯酮,其它组未检测出两种毒素。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 引言
• 第一部分 文献综述
• 1 霉菌毒素研究进展
• 1.1 霉菌及霉菌毒素的危害
• 2 霉菌毒素脱毒的使用方法:霉菌毒素吸附剂
• 2.1 常用的霉菌毒素吸附剂原料
• 2.2 霉菌毒素吸附剂评价
• 3 研究目的和意义
• 参考文献
• 第二部分 研究内容
• 第一章 霉菌毒素吸附剂吸附效果的体外评价
• 1 体外等温吸附评价
• 1.1 仪器和试剂
• 1.2 试验方法
• 2 模拟胃肠道环境下霉菌毒素吸附剂吸附能力的评价
• 2.1 猪消化道食糜上清液的制备
• 2.2 试验方法
• 3 结果与分析
• 3.1 标准曲线与回归方程
• 3.2 吸附试验反应体系中吸附剂和毒素浓度的确定
• 3.3 体外等温环境对霉菌毒素的吸附
• 3.4 模拟胃肠道环境对霉菌毒素的吸附
• 4 讨论
• 5 本章小结
• 参考文献
• 第二章 饲料及原料中霉菌毒素检测方法的研究
• 1 仪器和试剂
• 2 试验方法
• 2.1 样品的采集及制备
• 2.2 样品中毒素的提取
• 2.3 毒素的净化
• 2.4 霉菌毒素检测方法条件的筛选
• 2.5 检测方法性能指标考察
• 3 结果与分析
• 3.1 霉菌毒素提取与净化
• 3.2 萃取溶剂的选择
• 3.3 毒素萃取的过程
• 3.4 霉菌毒素检测方法条件的筛选
• 3.5 检测方法性能指标考察
• 4 讨论
• 4.1 提取和净化
• 4.2 流动相
• 5 本章小结
• 参考文献
• 第三章 动物饲养试验
• 1 试验材料
• 1.1 菌种活化与人工致霉
• 1.2 其它试验材料
• 2 试验设计
• 2.1 分组与配方
• 2.2 饲养管理
• 2.3 测定指标
• 2.4 样品采集与保存
• 2.5 样品测定
• 2.6 数据处理
• 3 结果与分析
• 3.1 生长性能指标
• 3.2 血液指标
• 3.3 霉菌毒素的残留
• 4 讨论
• 4.1 生产性能指标
• 4.2 血液指标
• 4.3 霉菌毒素的残留
• 5 本章小结
• 参考文献
• 全文结论
• 致谢