杨健:牛乳中蜡样芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及验证论文

杨健:牛乳中蜡样芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及验证论文

本文主要研究内容

作者杨健,侯婷婷,佐兆杭,郭瑜,姚笛(2019)在《牛乳中蜡样芽孢杆菌荧光定量PCR检测方法的建立及验证》一文中研究指出:目的建立一种快速检测牛乳中蜡样芽孢杆菌的荧光定量PCR方法,并进行验证。方法根据GenBank中登录的蜡样芽孢杆菌gyrB基因序列及荧光定量PCR要求,设计合适的特异性引物,提取菌体DNA,对目的基因进行扩增及克隆;以重组质粒为模板进行荧光定量PCR扩增,绘制标准曲线;以蜡样芽孢杆菌DNA为模板进行荧光定量PCR扩增,确定其扩增条件。对建立的方法进行特异性及灵敏性验证。结果建立的方法检测其他3种牛乳中常见致病菌(大肠埃希菌、志贺菌、沙门菌)未见特异性扩增,即无交叉反应;最低检出限为1×10-7 ng/μL。以掺入蜡样芽孢杆菌的牛乳为样品,可检测到牛乳中10. 4 CFU/mL的蜡样芽孢杆菌,优于国标方法(GB 4789. 14-2014)检测含有相同菌落数的蜡样芽孢杆菌(仅能检测到1. 04×102CFU/mL)。结论建立的方法特异性强,灵敏性高,适用于快速、准确检测牛乳中的蜡样芽孢杆菌,为实验室快速检测致病菌提供了参考。

Abstract

mu de jian li yi chong kuai su jian ce niu ru zhong la yang ya bao gan jun de ying guang ding liang PCRfang fa ,bing jin hang yan zheng 。fang fa gen ju GenBankzhong deng lu de la yang ya bao gan jun gyrBji yin xu lie ji ying guang ding liang PCRyao qiu ,she ji ge kuo de te yi xing yin wu ,di qu jun ti DNA,dui mu de ji yin jin hang kuo zeng ji ke long ;yi chong zu zhi li wei mo ban jin hang ying guang ding liang PCRkuo zeng ,hui zhi biao zhun qu xian ;yi la yang ya bao gan jun DNAwei mo ban jin hang ying guang ding liang PCRkuo zeng ,que ding ji kuo zeng tiao jian 。dui jian li de fang fa jin hang te yi xing ji ling min xing yan zheng 。jie guo jian li de fang fa jian ce ji ta 3chong niu ru zhong chang jian zhi bing jun (da chang ai xi jun 、zhi he jun 、sha men jun )wei jian te yi xing kuo zeng ,ji mo jiao cha fan ying ;zui di jian chu xian wei 1×10-7 ng/μL。yi can ru la yang ya bao gan jun de niu ru wei yang pin ,ke jian ce dao niu ru zhong 10. 4 CFU/mLde la yang ya bao gan jun ,you yu guo biao fang fa (GB 4789. 14-2014)jian ce han you xiang tong jun la shu de la yang ya bao gan jun (jin neng jian ce dao 1. 04×102CFU/mL)。jie lun jian li de fang fa te yi xing jiang ,ling min xing gao ,kuo yong yu kuai su 、zhun que jian ce niu ru zhong de la yang ya bao gan jun ,wei shi yan shi kuai su jian ce zhi bing jun di gong le can kao 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国生物制品学杂志的杨健,侯婷婷,佐兆杭,郭瑜,姚笛,发表于刊物中国生物制品学杂志2019年03期论文,是一篇关于荧光定量论文,蜡样芽孢杆菌论文,基因论文,中国生物制品学杂志2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国生物制品学杂志2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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