厚朴挥发性成分的HS-SPME-GC指纹图谱建立

厚朴挥发性成分的HS-SPME-GC指纹图谱建立

论文摘要

厚朴(Magnoliae officinalis Cortex)为木兰科植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils.)及凹叶厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils.var. biloba Rehd. et Wils.)的干燥干皮、枝皮和根皮。本课题以厚朴为研究对象,采集和购买了多批不同产地或部位的厚朴药材共15批,采用顶空-固相微萃取-气相色谱法(HS-SPME-GC)对其成分进行分析,并结合顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱(HS-SPME-GC-MS)的鉴定结果,建立其中药色谱指纹图谱。通过聚类分析、相似度分析的结果对其品质进行评价。同时为了比较不同方法及不同化学模式之间的异同,采用高效液相色谱法(HPLC)获取反映不同批次厚朴化学本质差异的数量化特征,为厚朴的质量控制提供科学的、系统的评价依据。1.对HS-SPME-GC法分析厚朴挥发性成分的萃取条件和色谱条件进行优化。通过考察不同条件下出峰个数和总峰面积的变化差异,对不同涂层的SPME商用萃取头、萃取温度、萃取时间和样品用量等影响因素进行优化,结果表明:采用PDMS/DVB萃取头,取厚朴粉末0.2g在70℃恒温条件下萃取60min,可达到较好的萃取效率;同时也对色谱柱、升温程序、流速、分流比等分离因素进行了条件优化,筛选出HP-50毛细管柱(30 m×0.32mm×0.25μm),程序升温:50℃(1min),以4℃/min上升到140℃(2min),以2℃/min上升到180℃,以12℃/min上升到280℃(5 min),流速1.3 ml/min,分流比为15:1的色谱条件较适合建立厚朴药材的中药色谱指纹图谱。2.按上述优化条件对不同产地或不同部位的15批厚朴药材进行批量分析,共获得42个共有色谱峰,并经HS-SPME-GC-MS鉴定确认了15个组分。以喇叭茶醇为内参照峰,建立指纹图谱。通过聚类分析,15批次药材被分成4类。其中1、2类为推荐品,选取其中10个批次建立共有模式,并计算生成的对照图谱与15个批次之间的相似度,结果表明各批次的相似度均在0.9以上,未发现离群样品,而其中11号批次因保存不当导致挥发性成分流失,其聚类结果在第四类、相似度在15个批次中最低,与实际情况相符,所以本研究所采用的HS-SPME方法适合于中药材GC指纹图谱的建立。3.对21个批次厚朴的主要药效成分厚朴酚和和厚朴酚进行比较分析,建立其共有模式,以厚朴酚、和厚朴酚为考察指标,用系统聚类分析对其进行化学模式识别研究。21批药材被分为4类,其中1类为推荐品,较好的反映了不同产地的厚朴酚性成分的差异。与厚朴药材GC指纹图谱进行比较,未发现厚朴药材GC指纹图谱的分析结果与其主要药效成分含量的差异性之间的关联。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 前言
  • 第一章 综述
  • 1 中草药挥发性成分的研究进展
  • 1.1 中草药挥发性成分的分类
  • 1.2 中草药挥发性成分的应用
  • 2 厚朴的研究
  • 2.1 厚朴的产地
  • 2.2 厚朴的分类
  • 2.3 中药厚朴的成分
  • 2.4 中药厚朴的药理作用
  • 2.5 厚朴成分的研究进展
  • 3 中药指纹图谱研究
  • 3.1 中药指纹图谱的定义
  • 3.2 中药指纹图谱的特点
  • 3.3 中药指纹图谱的研究意义
  • 3.4 中药指纹图谱的构建方法
  • 3.5 中药指纹图谱的建立
  • 3.6 重要参数的建立
  • 3.7 中药指纹图谱方法的验证
  • 3.8 气相色谱指纹图谱在中药挥发性成分研究中的应用
  • 3.9 厚朴的指纹图谱的研究进展
  • 4 中草药挥发性成分的分析进展
  • 4.1 中草药挥发性成分的提取方式
  • 4.2 中草药挥发性成分的分离检测技术
  • 5 固相微萃取技术及研究进展
  • 5.1 固相微萃取技术的介绍和研究进展
  • 5.2 萃取涂层的种类
  • 5.3 萃取效率的影响因素
  • 5.4 固相微萃取技术的特点
  • 6 本文立题依据
  • 第二章 色谱分离条件与萃取条件的优化
  • 1 仪器和试剂
  • 2 样品收集和预处理
  • 3 色谱条件
  • 4 厚朴挥发油的制备
  • 5 HS-SPME-GC方法
  • 6 色谱分离条件的优化
  • 6.1 色谱柱的选择
  • 6.2 升温程序的筛选
  • 6.3 分流比的筛选
  • 6.4 流速的筛选
  • 7 萃取条件的优化
  • 7.1 萃取涂层的优化
  • 7.2 萃取温度的优化
  • 7.3 萃取时间的优化
  • 7.4 样品用量的优化
  • 7.5 进样口温度的优化
  • 7.6 HS-SPME-GC方法的确定
  • 8 讨论
  • 8.1 色谱分离分析的优化
  • 8.2 HS-SPME的萃取条件的优化
  • 第三章 HS-SPME-GC法建立厚朴的指纹图谱
  • 1 仪器和试剂
  • 2 样品的收集及预处理
  • 3 顶空固相微萃取气相色谱法指纹图谱的建立
  • 3.1 色谱条件
  • 3.2 GC和GC-MS测定方法
  • 3.3 方法学考察
  • 3.4 厚朴药材指纹图谱共有模式的建立和结果
  • 3.5 GC-MS的测定结果
  • 3.6 指纹图谱参照峰的确定及共有特征峰确定
  • 3.7 系统聚类分析
  • 3.8 相似度分析
  • 4 结果与讨论
  • 第四章 厚朴药材酚性成分在各产地中的差异比较
  • 1 仪器、试剂与对照品
  • 2 样品收集和预处理
  • 3 厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量同时测定
  • 3.1 色谱条件
  • 3.2 检测波长的选择
  • 3.3 系统适用性试验
  • 3.4 供试品溶液的制备
  • 3.5 对照品的制备
  • 3.6 测定方法
  • 3.7 聚类分析结果
  • 4 结果与讨论
  • 结语
  • 参考文献
  • 附图
  • 在读期间撰写和发表的论文
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].HS-SPME-GC法测定头孢噻肟钠中多种有机溶剂残留量[J]. 中国医药指南 2012(16)
    • [2].厚朴挥发性成分的HS-SPME-GC指纹图谱建立[J]. 中国现代中药 2015(04)
    • [3].食用油脂中挥发性卤代烃的HS-SPME-GC联用分析[J]. 食品科学 2011(06)
    • [4].分子蒸馏纯化薰衣草精油主要成分的HS-SPME-GC分析[J]. 食品工业科技 2018(02)
    • [5].菊花的气相色谱指纹图谱及其系统聚类分析[J]. 理化检验(化学分册) 2017(06)
    • [6].缬草中挥发性成分的HS-SPME-GC法分析[J]. 时珍国医国药 2013(05)
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