果胶酶产生菌HDYM-02的诱变育种

论文摘要

果胶酶是一类分解果胶质的酶的总称,是含有多种组分的复合酶。果胶酶广泛分布于高等植物和微生物中,在某些原生动物和昆虫中也有发现。在微生物中,细菌、放线菌、酵母和霉菌都能代谢合成果胶酶。果胶酶在工业生产领域中是一种重要的新兴酶类。据统计,目前果胶酶在全世界食品酶的销售额中占25 %。本文以黑龙江巴彦亚麻有限公司沤麻池中分离筛选出的HDYM-02为出发菌株,先用紫外线进行诱变,从大量突变株中进行筛选,选育出4株产果胶酶性质稳定且酶活明显提高的突变株:U6,U12,U27,U36,其中的U12在6h时的酶活为出发菌株的1.44倍。将U12作为亚硝基胍诱变出发菌株,经过4轮诱变,筛选出突变株4株:N4, N15, N33, N52。其中N33在24h时的酶活为85.39 umol/mL。将N33进行紫外和亚硝基胍复合诱变,得到突变株4株:F6, F18,F22,F35其中F22在24h时的酶活达到98.33umol/mL。最后将F22进行紫外和硫酸二乙酯符合诱变,得到本研究的最终突变株F’14,其在24h时的酶活为111.27umol/mL,是出发菌株产量（34.39umol/mL）的3.2倍将最终突变株F’14转接10代,用DNS法测其发酵液的吸光值,测定结果显示UN37发酵液的吸光值比较稳定,说明果胶酶产量稳定没有出现回复突变,并且较出发菌株的吸光值有很大提高。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 果胶概述
• 1.1.1 果胶物质的定义
• 1.1.2 果胶物质的存在及化学组成
• 1.2 果胶酶概述
• 1.2.1 果胶酶的定义及分类
• 1.2.2 果胶酶的性质和作用方式
• 1.3 果胶酶的应用
• 1.3.1 在食品行业的应用
• 1.3.2 在纺织和造纸工业中的应用
• 1.3.3 在生物技术领域中的应用
• 1.3.4 在医药行业中的应用
• 1.3.5 其他领域的应用
• 1.4 微生物发酵法生产果胶酶的研究
• 1.4.1 产果胶酶的微生物
• 1.4.2 果胶酶的发酵生产
• 1.5 果胶酶高产菌株的选育
• 1.6 诱变方法研究现状
• 1.6.1 物理方法
• 1.6.2 化学方法
• 1.6.3 复合因子诱变
• 1.6.4 基因工程方法
• 1.7 果胶酶的分析方法
• 1.8 本研究的目的和意义
• 第2章 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 菌株及保藏条件
• 2.1.2 主要试剂及配制
• 2.1.3 培养基
• 2.1.4 主要仪器
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 培养方法
• 2.2.2 产孢试验
• 2.2.3 生长曲线的绘制
• 2.2.4 葡萄糖标准曲线的绘制
• 2.2.5 诱变处理
• 2.2.6 筛选突变株
• 2.2.7 高产菌株遗传稳定性试验
• 第3章 结果与分析
• 3.1 产孢试验
• 3.2 生长曲线的绘制
• 3.3 葡萄糖标准曲线
• 3.4 果胶酶高产菌株的选育
• 3.4.1 种子液稀释倍数的确定
• 3.4.2 最佳诱变剂量的选择
• 3.4.3 诱变结果
• 3.4.4 遗传稳定性分析
• 3.5 最高果胶酶产量突变株的遗传图谱
• 第4章 结论与讨论
• 4.1 菌株 HDYM-02 的诱变育种
• 4.2 测定方法的选择
• 4.2.1 定性分析
• 4.2.2 定量分析
• 4.3 工作设想
• 结论
• 参考文献
• 致谢