1株苏云金芽孢杆菌的生物活性研究

论文摘要

苏云金芽孢杆菌（Bt）可杀死鳞翅目、双翅目、膜翅目、同翅目、鞘翅目等多种有害昆虫,为此,人类将这种微生物进行人为培养后,又大量地投入到自然界中,成为全球产量最大、应用面最广的一种微生物农药。目前,对该菌的研究主要侧重在杀虫效应及杀虫基因的分子生物学领域,但就苏云金芽孢杆菌除了具有杀虫活性外,是否还具有其他生物活性和可利用价值的研究至今未见有相关报道。鉴于该菌种的大量使用,必将对生态环境产生一定影响,本文就从活性污泥中筛选出来的1株对重金属和有机磷农药有一定抗性的苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）进行了分子鉴定、培养条件、污废水净化、产酶特性等生物活性的研究,旨为查明苏云金芽孢杆菌对生态环境的影响,在污废水净化上的有效性,为加深对该菌种的进一步认识提供有价值的理论依据,研究结果如下本文采用了全自动微生物分析仪自动检测和细菌16SrDNA序列的PCR扩增和测序,对供试菌株进行了鉴定,鉴定结果表明：该菌株为苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）,并对小菜蛾和玉米螟有毒杀作用。以微生物学培养法进行了苏云金芽胞杆菌培养条件的筛选,该菌株最适培养温度为37℃左右,最适pH值为7,最适培养时间为12小时,最佳培养基组成及含量为：葡萄糖、蔗糖、酵母膏、KH2PO4含量分别为2.0、1.0、2.0、0.5。该株苏云金芽孢杆菌对污废水具有较好的净化效果,可降低污水中的BOD5、悬浮固体、浊度、蛋白质、氨氮及正磷酸盐含量,去除率分别为40%,76.47%,42.32%,19.38%,40.66%和61.92%,比对照分别提高了40%,42.08%,24.44%,6.93%,21.2%和47.58%；对污废水具有较好的絮凝效果,接种2天后,其絮凝率达到69.62%,比对照提高了57.9%,其絮凝效果相当于壳聚糖的处理效果。该株苏云金芽孢杆菌可以产生淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶和硝酸还原酶,但不产生纤维素酶和果胶酶。该菌株对有机磷农药-乐果和重金属-镉均具有一定抗性,对乐果最高耐受浓度为10mg/ml,乐果最低抑菌浓度为2.0mg/ml；对镉最高耐受浓度为1.0g/L,镉最低抑菌浓度为0.4g/L。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 苏云金芽孢杆菌
• 1.1.1 苏云金芽孢杆菌的发现
• 1.1.2 苏云金芽孢杆菌的杀虫机理
• 1.1.3 苏云金芽孢杆菌的杀虫谱
• 1.1.4 苏云金芽孢杆菌的研究现状
• 1.2 污染水体的微生物处理
• 1.2.1 重金属污染水体的微生物处理
• 1.2.2 含油污废水的微生物处理
• 1.2.3 氮、磷超标污水的微生物处理
• 1.2.4 农药污染水体的微生物处理
• 1.3 有益微生物的开发利用
• 1.3.1 淀粉酶高产菌株的开发利用
• 1.3.2 脂肪酶高产菌株的开发利用
• 1.3.3 蛋白酶高产菌株的开发利用
• 1.3.4 纤维素酶高产菌株的开发利用
• 1.3.5 半纤维素酶高产菌株的开发利用
• 1.3.6 果胶酶高产菌株的开发利用
• 1.3.7 硝酸还原酶高产菌株的开发利用
• 1.3.8 磷酸酶高产菌株的开发利用
• 1.3.9 絮凝剂高产菌株的开发利用
• 1.4 本论文研究目的及研究内容
• 1.5 本论文研究特色和创新
• 第二章 苏云金芽孢杆菌的鉴定
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 试验方法
• 2.2 试验结果与分析
• 第三章 苏云金芽孢杆菌的杀虫实验
• 3.1 试验材料与方法
• 3.1.1 试验材料
• 3.1.2 试验方法
• 3.2 试验结果与分析
• 3.2.1 苏云金芽孢杆菌对小菜蛾的杀虫活性
• 3.2.2 苏云金芽孢杆菌对玉米螟杀虫活性
• 3.3 结论
• 第四章 苏云金芽孢杆菌培养条件的筛选
• 4.1 试验材料与方法
• 4.1.1 试验材料
• 4.1.2 试验方法
• 4.2 试验结果与分析
• 4.2.1 温度对菌种的影响
• 4.2.2 pH对菌种的影响
• 4.2.3 苏云金芽孢杆菌生长曲线的测定
• 4.2.4 正交试验
• 4.3 结论
• 第五章 苏云金芽孢杆菌抑菌及净化污水效果的检测
• 5.1 试验材料及方法
• 5.1.1 试验材料
• 5.1.2 试验方法
• 5.3 试验结果与分析
• 5.3.1 对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果
• 5.3.2 生化需氧量（BOD）测定
• 5.3.3 化学需氧量（COD）测定
• 5.3.4 固形物和浊度的测定
• 5.3.5 氨氮含量测定
• 5.3.6 蛋白含量测定
• 5.3.7 磷含量测定
• 5.3.8 苏云金芽孢杆菌及壳聚糖对污废水净化效果的比较
• 5.4 结论和讨论
• 5.4.1 结论
• 5.4.2 讨论
• 第六章 苏云金芽孢杆菌产酶能力的检测
• 6.1 试验材料与方法
• 6.1.1 试验材料
• 6.1.2 试验方法
• 6.2 试验结果与分析
• 6.3 结论
• 第七章 苏云金芽孢杆菌的抗性试验
• 7.1 试验材料与方法
• 7.1.1 试验材料
• 7.1.2 试验方法
• 7.2 试验结果与分析
• 7.2.1 苏云金芽孢杆菌对有机磷农药-乐果的耐受性
• 7.2.2 苏云金芽孢杆菌对重金属（镉）的耐受性
• 7.3 结论与讨论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表学术论文情况
• 致谢