湿加松无性系组培快繁技术研究

论文摘要

本文以澳大利亚种源湿加松为试材,对其组织培养技术进行了系统研究,取2年生实生苗茎尖,通过腋芽诱导构建完整植株体系,研究了湿加松外植体消毒方法,基本培养基筛选,细胞分裂素6-BA、生长素NAA、IBA、蔗糖、光照强度、光照时间等外界因子对芽的诱导、增殖,伸长,以及生根的影响。主要结果如下:1.外植体消毒:从2年生实生苗采集嫩枝,选择无木质化带芽茎尖,将其剪成2cm左右,用清水冲洗5min,然后在超净工作台上,放2滴土温-20用无菌水冲洗2次,再用70%乙醇消毒10s,最后用0.1%HgCl2浸泡6.5min,消毒效果较好,无菌率达到89.2%。2.芽诱导:以GD+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1+蔗糖2%为基本培养基,在光照时间12h·d -1,光强40μmol·m-2·s-1条件下培养,诱导率较高,芽的生长速度也较快。3.继代培养:继代培养以GD为基本培养基,随着继代次数的增加逐渐减少细胞分裂素6-BA浓度。最初继代,6-BA浓度1.0mg·L-1、0.5mg·L-1。然后6-BA浓度直接降到0.1mg·L-1,继代3-4次,芽的增殖系数可以达到4-5,培养期间无玻璃化和褐变现象。4.诱导生根:培养基、植物生长调节剂（NAA、IBA）对湿加松继代苗的诱导生根均有影响。以GD+蔗糖2%+IBA（0.1-0.3）mg·L-1为生根培养基,诱导效果较好,生根率可达45%。5.炼苗移栽:将诱导生根的组培苗,在自然光照下炼苗7d,然后移栽于草炭土和蛭石混合基质里（2:1=V/V）,成活率可达80%,10d后苗高可伸长2cm。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 植物组培快繁的意义
• 1.1.1 繁殖材料快速脱毒
• 1.1.2 单倍体和体细胞胚胎的发生
• 1.1.3 种质保存
• 1.1.4 体细胞无性系变异与植物改良
• 1.2 组织培养中的三大难题
• 1.2.1 褐变
• 1.2.2 玻璃化
• 1.2.3 污染
• 1.3 松属树种组织培养研究概况
• 1.3.1 影响松属体细胞胚胎发生的主要因素
• 1.3.2 影响松属体细胞胚胎发生的其他因素
• 1.4 湿加松杂交亲本概况
• 1.4.1 湿地松简介
• 1.4.2 加勒比松简介
• 1.5 湿加松的研究概况
• 1.5.1 国外研究情况
• 1.5.2 国内研究情况
• 1.5.3 湿加松组培研究意义
• 2 湿加松组织培养与无性系快繁技术的建立
• 2.1 试验材料与方法
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 材料培养
• 2.1.3 材料处理方法
• 2.1.4 培养条件
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 外植体消毒处理
• 2.2.2 诱导培养基筛选与优化
• 2.2.3 继代培养基优化
• 2.2.4 生根培养基的选择
• 3 结果与分析
• 3.1 不同消毒处理对湿加松外植体污染的影响
• 3.2 湿加松初始培养基的选择
• 3.2.1 不同的培养基对芽诱导的影响
• 3.2.2 不同激素浓度和激素组合对诱导芽的影响
• 3.2.3 蔗糖浓度对诱导不定芽的影响
• 3.2.4 光照时间对不定芽诱导的影响
• 3.2.5 光强对诱导不定芽的影响
• 3.3 不同继代培养基对诱导芽的影响
• 3.3.1 不同的继代培养基和植物生长调节剂浓度对诱导芽的影响
• 3.3.2 丛生芽和愈伤组织的增殖
• 3.4 生根培养基的选择
• 3.4.1 不同培养基和NAA 浓度对诱导生根的影响
• 3.4.2 IBA 和NAA 对诱导不定根的影响
• 3.4.3 IBA、NAA 对诱导生根的影响
• 3.4.4 组培苗移栽
• 3.4.5 种胚的分化和诱导愈伤
• 4 结论与讨论
• 4.1 外植体消毒与污染调控
• 4.2 基本培养基的重要性
• 4.3 继代培养过程中的调整
• 4.4 诱导不定根
• 4.5 炼苗与移栽措施
• 4.6 种胚诱导愈伤
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介