兔心肌缺血再灌注后c-fos，PCNA，Bax，Bcl-2的表达意义

论文摘要

目的 研究家兔心肌细胞缺血再灌注后c-fos，PCNA，Bax，Bcl-2的表达意义。方法 新西兰大白兔18只，随机分为三组：缺血15min再灌注0min组（Ⅰ组，n=6）：缺血15min再灌注15min组（Ⅱ组，n=6）；缺血15min再灌注30min组（Ⅲ组，n=6），模拟不停跳冠脉搭桥手术所涉及的小范围缺血再灌注区域进行手术，分别取缺血再灌注区域及对照区域（非缺血再灌注区）心肌组织进行光镜观察和c-fos，PCNA，Bax，Bcl-2的免疫组织化学检测。结果 Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组心肌细胞缺血再灌注后均有c-fos阳性表达，c-fos阳性率随着再灌注时间延长逐渐增高，不同再灌注时点c-fos阳性率的差异有统计学意义（P＜0.05）。对照区的心肌细胞也有c-fos阳性表达，但c-fos阳性率低于缺血再灌注区心肌，差异有统计学意义（P＜0.05）；Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组心肌细胞均有PCNA阳性染色出现，三组在不同再灌注时点PCNA阳性率与对照区比较差异有统计学意义（P＜0.05），缺血再灌注区Ⅰ组与Ⅲ组PCNA阳性率比较差异有统计学意义（P＜0.05）；Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组心肌细胞均有Bax，Bcl-2阳性染色出现，缺血再灌注区心肌细胞在不同再灌注时点Bax，Bcl-2阳性率随再灌注时间延长逐渐增高，差异有统计学意义（P＜0.01），Bax／Bcl-2阳性率比值随再灌注时间延长增加。结论 ① 心肌缺血（和）再灌注显著诱导c-fos的表达，c-fos表达增加与心肌再灌注损伤有关；② 心肌缺血再灌注后诱发细胞促凋亡／抗凋亡相关基因激活，存在着凋亡基因／抗凋亡基因与增殖基因共同表达的特点；③ Fos蛋白表达有可能作为早期心肌缺血再灌注辅助诊断的形态学指标；④ 应用抑制c-fos基因表达的药物的有可能减少心肌缺血再灌注损伤。

论文目录

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• 摘要
• ABSTRACT
• 英文缩略词表
• 前言
• 第一章 材料和方法
• 1 材料
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要实验药物
• 1.3 主要实验试剂
• 1.4 主要仪器设备
• 2 方法
• 2.1 实验动物分组
• 2.2 动物模型制备方法
• 2.3 实验动物心肌标本编码规则
• 2.4 石蜡切片HE染色步骤
• 2.5 S-P法免疫组化染色实验步骤
• 2.6 SABC法免疫组化染色实验步骤
• 2.7 Envision法免疫组化染色实验步骤
• 2.8 免疫组化常用试剂配置方法
• 2.9 心肌标本石蜡切片检测方法
• 2.9.1 HE染色检测方法
• 2.9.2 c-fos染色检测方法
• 2.9.3 PCNA染色检测方法
• 2.9.4 Bax染色检测方法
• 2.9.5 Bcl-2染色检测方法
• 2.10 统计学处理
• 第二章 结果
• 1 心肌标本石蜡切片HE染色结果
• 2 心肌标本石蜡切片c-fos染色结果
• 3 心肌标本石蜡切片PCNA染色结果
• 4 心肌标本石蜡切片Bax染色结果
• 5 心肌标本石蜡切片Bcl-2染色结果
• 6 各组动物心肌细胞Bax,Bcl-2阳性率及Bax/Bcl-2均数比值结果
• 第三章 典型图片
• 1 心肌标本石蜡切片HE染色典型图片
• 2 心肌标本石蜡切片c-fos染色典型图片
• 3 心肌标本石蜡切片PCNA染色典型图片
• 4 心肌标本石蜡切片Bax染色典型图片
• 5 心肌标本石蜡切片Bcl-2染色典型图片
• 第四章 讨论
• 1.1 c-fos基因与心肌缺血再灌注的关系
• 1.2 PCNA与心肌缺血再灌注的关系
• 1.3 Bax,Bcl-2与心肌缺血再灌注的关系
• 1.4 本章小结
• 第五章 结论
• 参考文献
• 综述
• 附录
• 致谢
• 作者简历
• 导师评语