鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林高效液相色谱荧光检测法及其残留消除规律的研究

论文摘要

本研究以京海黄鸡产蛋鸡为试验素材,建立了鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林残留的高效液相色谱荧光检测方法。同时通过该产蛋鸡分别以25mg·kg-1·b.w·d剂量内服阿莫西林和以60mg·kg-1·b.w·d剂量内服氨苄西林,每天1次给药,连续5d,研究了蛋清、蛋黄、全蛋中阿莫西林和氨苄西林的残留消除规律。研究结果表明：1.建立了阿莫西林在蛋清、蛋黄及全蛋中的前处理方法和HPLC荧光检测方法,阿莫西林在蛋清中的回收率在77.43%～89.67%之间,日内和日间RSD均分别低于9.63%和14.22%；阿莫西林在蛋黄中的回收率在79.37%～88.79%之间,日内和日间RSD均分别低于9.71%和12.88%；阿莫西林在全蛋中的回收率在80.47%-89.53%之间,日内和日间RSD均分别低于9.61%和14.80%。阿莫西林在5-800ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997,n=8）,检测限为1.2ng·g-1,定量限为3.9ng.g-1,可满足鸡蛋中阿莫西林残留检测的要求。2.建立了氨苄西林在蛋清、蛋黄及全蛋中的前处理方法和HPLC荧光检测方法,蛋清中氨苄西林的回收率在79.12%-88.52%之间,日内RSD低于9.44%,日间RSD低于13.34%；蛋黄中氨苄西林的回收率在78.64%-83.60%之间,日内RSD低于8.94%,日间RSD低于12.36%；全蛋中氨苄西林的回收率在78.30%-85.11%之间,日内RSD低于9.64%,日间RSD低于12.48%。氨苄西林在5-800ng·mL-1范围内线性关系良好（r=0.9994,n=7）,检测限为0.4ng·g-1,定量限为1.5ng·g1,可满足鸡蛋中氨苄西林残留检测的要求。3.建立了同时测定阿莫西林和氨苄西林在蛋清、蛋黄及全蛋中的前处理方法和HPLC荧光检测方法,蛋清中阿莫西林和氨苄西林的回收率分别在80.53%～、89.84%和80.08%～87.63%之间,蛋黄中阿莫西林和氨苄西林的回收率分别在78.24%～87.42%和77.79%～80.91%之间,全蛋中阿莫西林和氨苄西林的回收率分别在78.40%～88.72%和77.60%～82.01%之间。阿莫西林和氨苄西林的检测限分别为1.2ng·g-1和0.4ng·g-1,定量限分别为3.9ng·g-1和1.5ng·g-1。可满足同时测定鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林残留检测的要求。4.研究了产蛋鸡以25mg·kg-1·b.w.d的剂量,连续5d,每天1次内服阿莫西林后鸡蛋中阿莫西林的残留消除规律。结果表明：在给药期间,蛋清、蛋黄和全蛋中的阿莫西林残留量呈上升趋势,停药第1d,蛋清和全蛋中阿莫西林残留量达到峰值,而蛋黄中阿莫西林残留量在停药第2d达到峰值,其残留量分别为13.1073ng·g-1、13.7757ng·g-1和16.0672ng·g-1,且蛋黄中阿莫西林残留量比蛋清中阿莫西林残留量高。在休药期间,蛋清、蛋黄和全蛋中阿莫西林残留量呈递减趋势,停药第6d,蛋清中阿莫西林残留量低于检测限（1.2ng·g-1）,而蛋黄和全蛋中阿莫西林仍然可以被检测到（1.2ng·g-1）；停药第10d,全蛋中阿莫西林残留量低于检测限（1.2ng·g-1）；停药第12d,蛋黄中阿莫西林残留量低于检测限（1.2ng·g-1）。蛋黄中阿莫西林残留比蛋清中残留消除缓慢,消除时间长。5.研究了产蛋鸡以60mg·kg-1·b.w.d的剂量,连续5d内,每天1次内服氨苄西林后鸡蛋中氨苄西林的残留消除规律。结果表明：在给药期间,蛋清、蛋黄和全蛋中氨苄西林残留量呈上升趋势,停药第1d,蛋清和全蛋中氨苄西林残留量达到峰值,而蛋黄中氨苄西林残留量在停药第2d达到峰值,其残留量分别为12.4136ng·g-1、12.2861ng·g-1和17.2553ng·g-1,且蛋黄中氨苄西林残留量比蛋清中氨苄西林残留量高。在休药期间,蛋清、蛋黄和全蛋中氨苄西林残留量呈递减趋势,停药第9d,蛋清和全蛋中氨苄西林残留量低于检测限（0.4ng·g-1）,而蛋黄中氨苄西林仍然可以被检测到（0.4ng·g-1）；停药第10d,蛋黄中氨苄西林残留量低于检测限（0.4ng·g-1）。蛋黄中氨苄西林残留比蛋清中残留消除缓慢,消除时间长。6.参考日本关于阿莫西林在鸡蛋中的最高残留限量（MRLs）标准（10μg·kg-1）,建议产蛋鸡以25mg·kg-1·b.w.d的剂量连续5d,每天1次内服阿莫西林时,其休药期（WDT）为5d；建议产蛋鸡以60mg·kg-1·b.w.d的剂量连续5d,每天1次内服氨苄西林时,其WDT为7d。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 符号说明
• 第一部分 文献综述
• 第二部分 研究内容
• 实验一 鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林残留的检测方法研究
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 实验动物
• 1.1.2 给药剂量、途径及样品采集
• 1.1.3 药品与试剂
• 1.1.4 试剂配制
• 1.1.5 主要仪器设备
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 药物原粉纯度的测定
• 1.2.2 样品前处理方法的建立
• 1.2.3 样品检测方法的建立
• 1.3 数据处理
• 2 结果与分析
• 2.1 衍生条件的优化
• 2.2 色谱操作条件
• 2.2.1 衍生试剂色谱图
• 2.2.2 AMO的色谱分离
• 2.2.3 AMP的色谱分离
• 2.2.4 AMO和AMP的色谱分离
• 2.3 标准曲线与线性范围的确定
• 2.3.1 阿莫西林的标准曲线与线性范围
• 2.3.2 氨苄西林的标准曲线与线性范围
• 2.4 鸡蛋样品回收率的测定
• 2.4.1 鸡蛋中阿莫西林回收率的测定
• 2.4.2 鸡蛋中氨苄西林回收率的测定
• 2.4.3 同时提取鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林时回收率的测定
• 2.5 精密度的测定
• 2.5.1 阿莫西林精密度的测定
• 2.5.2 氨苄西林精密度的测定
• 2.6 灵敏度的测定
• 3 讨论
• 3.1 衍生试剂的选择
• 3.2 衍生条件的优化
• 3.3 检测方法的选择
• 3.4 检测器的选择
• 3.5 检测波长的筛选
• 3.6 流动相的优化
• 3.7 标准溶液的稳定性
• 3.8 样品的提取与净化
• 3.9 方法的回收率
• 3.10 方法的灵敏度
• 4 小结
• 实验二 鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林残留消除规律的研究
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.1.1 试验动物
• 1.1.2 药品与试剂
• 1.1.3 试剂配制
• 1.1.4 主要仪器设备
• 1.2 试验方法
• 1.2.1 给药剂量、途径及样品采集
• 1.2.2 鸡蛋中阿莫西林和氨苄西林浓度的高效液相色谱分析
• 1.2.3 数据分析处理
• 2 结果
• 2.1 鸡蛋中阿莫西林的残留消除规律
• 2.2 鸡蛋中氨苄西林的残留消除规律
• 3 讨论
• 3.1 阿莫西林在鸡蛋中的消除规律
• 3.2 氨苄西林在鸡蛋中的消除规律
• 4 小结
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读硕士学位期间发表论文及获得专利情况