猪肝脏糖异生的品种特点及其糖皮质激素的作用

论文摘要

本实验以血浆皮质醇水平差异显著的二花脸猪和皮特兰猪为模型,描述肝脏糖异生功能相关的生理生化指标及肝脏糖异生途径关键酶表达的品种特点,并分析与肝脏糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor,GR）和11β-类固醇羟基脱氢酶1（11β-Hydroxysteroid dehydrogenase type 1,11β-HSD1）表达的关系,以阐述糖皮质激素在调控肝脏糖异生中的作用,并进一步检测肝脏GR基因表达的品种差异是否与肝脏GR基因5’-非翻译区甲基化的状况有关。1血液及肝脏生化指标的品种差异二花脸猪肝糖原极显著低于皮特兰猪（P＜0.01）;肝脏葡萄糖含量在品种间无显著差异。二花脸猪血液乳酸显著低于皮特兰猪（P＜0.05）,肝脏乳酸极显著高于皮特兰猪（P＜0.01）。以上结果提示:二花脸猪乳酸代谢的能力可能高于皮特兰猪。2猪肝脏糖异生关键酶基因表达品种差异用相对定量REAL-TIME RT-PCR方法比较两品种猪肝脏糖异生关键酶基因mRNA的表达.结果表明:二花脸猪丙酮酸羧化酶（Pyruvate carboxylase,PC）mRNA表达极显著高于皮特兰猪（P＜0.01）;品种间胞质磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（Cytosolphosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK-C）mRNA表达无显著差异,而二花脸猪线粒体磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（Mitochondria phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK-M）mRNA表达显著高于皮特兰猪（P＜0.05）。二花脸猪果糖-1,6-二磷酸酶（Fructose-1,6-bisphosphatase,FBPase）mRNA表达显著高于皮特兰猪（P＜0.05）。葡萄糖-6-磷酸酶（Glucose-6-phosphatase,G-6-P）mRNA表达无品种间差异。以上结果提示:二花脸可能因PC,FBPase mRNA的高表达而有较强的糖异生能力。而乳酸是糖异生的主要原料之一,提示肝糖异生途径的增强可能是二花脸猪乳酸代谢能力强的原因之一。3猪肝脏皮质醇含量的品种差异为检测血浆高水平的皮质醇水平是否也导致肝脏皮质醇水平较高,实验采用二氯甲烷提取肝脏匀浆后放免测定肝脏皮质醇含量。结果表明:两品种猪肝脏皮质醇含量无显著差异。以上结果提示:可能是GR而非局部组织皮质醇升高导致了肝脏糖异生关键酶表达的上升。4猪肝脏GR及11β-HSD1基因表达的品种差异用相对定量REAL-TIME RT-PCR方法比较两品种猪肝脏GR、11β-HSD1 mRNA表达。结果表明:二花脸猪GR及11β-HSD1 mRNA表达均显著高于皮特兰猪（P＜0.05）。表明二花脸猪糖皮质激素对肝脏的作用较强,可能是其肝脏糖异生关键酶表达升高的原因之一。5猪肝脏GR 5′-UTR甲基化的品种差异采用亚硫酸氢盐测序法检测GR 5′-UTR区域DNA甲基化水平。结果表明:GR5′-UTR区域甲基化水平无显著差异。以上结果提示:肝脏GR mRNA表达的品种差异与本实验检测的5′-UTR片段的甲基化无关。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一篇 文献综述
• 第一章 肝脏糖异生与猪的生产性能
• 1 肝脏糖异生概述
• 2 肝脏糖异生的调控
• 3 影响肝脏糖异生的因素
• 4 肝脏糖异生与猪生产性能
• 第二章 GR及其对肝脏糖异生的调节
• 1 GR的基因结构
• 2 GR的调控
• 3 GR的作用机理
• 4 GR对肝糖异生的调节
• 第二篇 试验研究
• 第三章 猪肝脏糖异生关键酶基因表达的品种差异
• 1 实验材料与方法
• 2 实验结果
• 3 讨论
• 第四章 猪肝脏GR mRNA表达及GR 5’-UTR甲基化的品种差异
• 1 试验材料与方法
• 2 试验结果
• 3 讨论
• 全文结论
• 参考文献
• 致谢