曼陀罗组织培养及两种方法测定4种植物种子含油量的比较研究

论文摘要

能源危机是人类将要面对的巨大挑战,生物能源的开发利用已经成为一大热点。能源植物可直接或间接地作为燃料代替化石燃料,因此,为了提高能源植物曼陀罗种子含油量,本文以其下胚轴为外植体,初步建立了曼陀罗组织培养体系,为今后利用转基因培育优良的、高含油量的新品系提供了依据;此外,本文还利用两种不同方法测定了4种植物的种子含油量,并对两种方法进行了比较,旨在为寻找潜在能源植物提供科学方法和依据。本文取得的主要结论如下:1.用70%的酒精浸泡灭菌30s,再用30%的次氯酸钠溶液浸泡20min,用灭菌水冲洗后接种到无激素的MS培养基上;取苗龄为5-7天的无菌苗,将其下胚轴切成0.5-1.0cm的小段,接种到愈伤诱导培养基中,先暗培养48小时后转入培养箱内;待愈伤组织直径生长到约1.0-1.5cm时,将其取出并转入不定芽诱导培养基进行诱导;当不定芽长至约3-4cm时,移至生根培养基中培养（培养条件均为:温度26±1℃,湿度70%-80%,光照14h·d-1、光强2500lux）。曼陀罗下胚轴愈伤诱导培养基为6-BA 1.0 mg·L-1+ 2,4-D 0.3 mg·L-1,诱导率为96.67%;不定芽诱导培养基为6-BA 2.5 mg·L-1+ NAA 0.1 mg·L-1,其不定芽诱导率为57.78%;,最佳的生根培养基是1/2MS + IBA 0.2 mg·L-1+ NAA 0.05 mg·L-1,生根率为60.00%;炼苗移栽后,组培苗成活率为90%。2.本文对曼陀罗种子采用不同处理后,其发芽率及发芽势均发生了较大变化。55℃和80℃热水浸泡种子后均取得了较好的效果,其发芽率分别为40%和47.5%,发芽势均为35%;而使用浓硫酸浸泡种子后,发芽率和发芽势达到了最高,分别为67.5%和42.5%。由此得出,提高曼陀罗种子发芽率和发芽势的最佳处理为浓硫酸浸泡20min后在45℃的温水中浸泡24h。3.本文采用核磁共振法和索氏提取法测定了4种潜在能源植物的种子含油量并对其进行了分析比较。结果表明:核磁共振法测定的种子含油量明显高于索氏提取法。核磁共振法测定种子含油量具有简便、无损坏等特点,弥补了索氏提取法耗时、不能提取磷脂、糖脂、脂蛋白等结合态脂类的不足,可用于能源植物种子含油量的快速测定,为筛选潜在能源植物新种质资源提供了可靠方法。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 组织培养研究进展
• 1.1.1 植物组织培养的概述
• 1.1.2 植物组织培养的种类
• 1.1.3 植物组织培养的研究进展
• 1.1.4 植物组织培养的应用
• 1.1.5 曼陀罗的简介及其组织培养的研究进展
• 1.2 种子休眠的研究进展
• 1.2.1 种子休眠的原因
• 1.2.2 种子休眠的解除方法
• 1.3 能源植物的研究进展
• 1.3.1 能源植物简介
• 1.3.2 国外能源植物研究概况
• 1.3.3 国内能源植物研究概况
• 1.3.4 能源植物的发展前景
• 1.3.5 本文研究的抗逆经济植物的简介
• 2 曼陀罗下胚轴再生体系建立
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料与实验药品、仪器
• 2.1.2 实验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 种子的灭菌
• 2.2.2 愈伤组织诱导
• 2.2.3 不定芽诱导
• 2.2.4 生根培养
• 2.2.5 炼苗移栽
• 2.3 讨论
• 2.3.1 种子的灭菌处理
• 2.3.2 外植体的选择
• 2.3.3 褐变现象的发生
• 2.3.4 生长调节剂的影响
• 2.3.5 不定芽的生长
• 2.3.6 组培苗的生根
• 3 曼陀罗种子的发芽试验
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料与实验药品、仪器
• 3.1.2 实验方法
• 3.2 结果与分析
• 3.3 讨论
• 4 曼陀罗及其他3 种潜在能源植物的种子含油量测定
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 材料与实验药品、仪器
• 4.1.2 实验方法
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 核磁共振法与索氏提取法测定结果的比较
• 4.2.2 两种方法测定的不同生境下曼陀罗种子含油量的比较
• 4.3 结论与讨论
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表学术论文情况
• 致谢