乙肝病毒相关性肝病患者幽门螺旋杆菌感染的研究

论文摘要

目的：研究原发性肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝病患者幽门螺旋杆菌感染情况；进一步探讨幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori, HP）的感染与原发性肝癌、肝硬化、慢性肝炎等肝脏疾病的关系。方法：1.收集原发性肝癌、肝硬化、慢性乙肝等肝脏疾病患者556例,肝功能正常的体检人群60例,采用免疫层析法检测患者血清中anti-H.pylori IgG。2.筛选40例石蜡标本（原发性肝癌20例、胃癌7例、肺癌4例、胆管癌4例、直肠癌5例）,提取DNA,以螺杆菌属特异基因16S rRNA及Hp特异性抗原基因26-kDa为引物,进行PCR（Polymerase chain reaction, PCR）扩增,检测各类组织Hp感染情况；免疫组化法进一步研究Hp感染情况。结果：1.肝病患者血清anti-H.pylori IgG检测结果1)研究发现乙肝病毒相关性肝病患者（包括乙型肝炎、乙肝后肝硬化、乙肝后肝癌）Hp感染者200例（73.3%）,其他肝脏疾病Hp感染者126例（44.5%）,正常人群组Hp感染者24例（40.0%）,三组比较乙肝病毒相关性肝病患者Hp感染率明显高于乙肝病毒阴性的肝病患者及正常人群,χ2检验有极显著性差异（P<0.001）；2)乙型肝炎、乙型肝炎后肝硬化、乙型肝炎后肝癌三组患者的感染率分别为62.7%、77.0%、79.7%,三组比较,后两者感染率明显高于单纯乙型肝炎患者,χ2检验提示显著性差异（P<0.05）,而乙肝后肝硬化患者与乙肝后肝癌患者感染率比较无显著性差异；3)慢性肝病中非乙肝相关性肝硬化、非乙肝相关性肝癌、其他肝脏良性病变三组感染率分别为47.0%、48.2%、40.3%,各组间χ2检验提示无显著性差异（P>0.05）；4) HBV DNA活动者按病毒载量分级后,各级别的Hp感染率分别为69.0%、60.7%、70.5%,χ2检验提示各级之间无显著性差异（P>0.05）；5)HC患者按Child-push分级后,A、B、C各级之间的Hp感染率分别为51.9%、63.4%、65.6%,χ2检验提示各级之间无显著性差异（P>0.05）。6)HC与HE患者感染率分别是65.3%、58.8%,两者比较无显著性差异（P>0.05）。2.石蜡肝癌组织中螺杆菌基因的检测结果1)在20例肝癌标本中有9例扩增出400bp的目的片段（16S rRNA）,阳性率45.0%,7例胃癌中6例阳性,阳性率为85.7%,而非肝癌组无l例阳性,与胃癌患者比较差异显著（P<0.05）,与其他癌症标本比较有显著性差异（P<0.01）。2)9例螺杆菌16S rRNA基因阳性的石蜡标本再用26-kDa基因的引物扩增,结果有6例显示阳性,阳性率66.7%,胃癌标本阳性率100%。3.石蜡组织免疫组化染色结果1)20例肝癌标本中有6例观察到了弯曲状或杆状的细菌存在,阳性率30.0%。而非肝癌组未观察到细菌的存在,二者比较差异显著（P<0.05）；2)胃癌标本中4例（57.1%）观察到弯曲状细菌存在,与肝癌组织相比差异显著（P<0.01）。结论：1.调查显示乙肝病毒相关性肝病患者与其他肝病患者及正常人群相比,更容易感染Hp；随着病情加重,Hp感染率明显增高,提示Hp可能加重乙肝病情,显示Hp具有肝细胞毒性作用；肝硬化、肝癌、肝性脑病Hp感染率较高,提示Hp感染与慢性肝病患者并发症（如肝性脑病）的发生有一定相关性。2.研究显示,原发性肝癌组织中存在幽门螺旋杆菌感染,提示幽门螺旋杆菌的感染可能与肝癌的发生存在一定的关系；9例螺杆菌16S rRNA基因阳性的石蜡标本中有3例标本H.pylori种特异性抗原基因26-kDa阴性,提示肝内可能存在与Hp种系高度相似的其他肝螺旋杆菌；均获得目的片段的6例肝癌组织中,有3例HBsAg阳性,就Hp与HBV在肝癌的发生过程中是否存在协同作用,有待于扩增病例数进一步研究。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 英文縮略语索引
• 前言
• 第一部分 肝病患者血清anti-H.pylori IgG检测
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 第二部分 原发性肝癌组织中幽门螺旋杆菌的感染研究
• 1. 材料和方法
• 2. 结果
• 3. 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述一
• 参考文献
• 综述二
• 参考文献
• 致谢
• 研究生期间发表文章情况