论文摘要
背景急性冠脉综合征（Acute Coronary Syndrome，ACS）是冠心病的危重症，其发病存在明显的性别差异。即使考虑其他危险因素，男性性别仍是冠心病的独立危险因子，而雄激素的作用一直存在争议，是目前心血管领域的研究热点之一。研究证实血管内皮抗凝活性降低，血栓形成是急性冠脉综合征的主要特征，而我们的前期实验发现生理浓度睾酮（Testosterone，T）可通过雄激素受体（AndrogenReceptor，AR）促进人脐静脉内皮细胞（Human Umbilical Vein Endothelial Cell，HUVEC）合成、分泌组织因子途径抑制物（Tissue Factor Pathway Inhibitor，TFPI），增强内皮抗凝活性，但是其具体机制不明，本实验即是对该调节通路的进一步研究。目的观察生理浓度睾酮处理后，人脐静脉内皮细胞核转录因子（Nuclear Factor，NF）活性变化及对TFPI表达合成的影响，探讨生理浓度睾酮在转录因子（Transcription Factor，TF）环节调节TFPI表达的机制。方法（1）将体外培养的人脐带静脉内皮细胞（HUVEC）分为单纯培养基对照组、生理浓度睾酮组和雄激素受体拮抗剂（Flutamide，F）预处理组，应用转录因子活性芯片技术，分析三组人脐静脉内皮细胞核内转录因子活性的差异；（2）将体外培养的HUVEC细胞分为单纯培养基对照组（Control组）、不同浓度睾酮组(3×10-9，3×10-8，3×10-6，3×10-5mol／L Testosterone组：T-9组，T-8组，T-6组，T-5组)、Flutamide组（F组）、Flutamide预处理组(F+T-8组)、TNF-α处理组（TNF-α组）、TNF-α预处理组(TNF-α+T-8组)、PFT-α处理组（PFT-α组）、PFT-α预处理组(PFT-α+T-8组)，ELISA法测各组TFPI蛋白水平，real-time RT-PCR检测各组TFPI mRNA水平。结果（1）睾酮作用后有5个转录因子的活性明显变化，其中活性明显上调的转录因子有3个，包括c-Myb、Myc和P53；显著下调的转录因子有2个，包括核因子κb（NF-κb）和SP1；Flutamide能有效消除睾酮的上述作用：（2）生理浓度睾酮(3×10-8mol／L)组TFPI蛋白与mRNA水平与对照组相比明显增加，而超生理浓度睾酮(3×10-5 mol／L)组则明显低于对照组，Flutamide可消除上述作用；通过TNF-α上调NF-κb和SP1活性后，TFPI的表达明显受到抑制，生理浓度睾酮可抑制TNF-α的这种作用；而PFT-α增加TFPI的表达，与生理浓度睾酮共同作用后，TFPI的表达进一步增加。结论（1）生理浓度睾酮可通过雄激素受体使HUVEC核转录因子c-Myb、Myc-Max、P53的活性上调，同时使NF-κb和SP1的活性下调；（2）生理浓度睾酮可通过明显减弱转录因子NF-κb和SP1的活性，而促进HUVEC TFPI表达，发挥防止血栓形成的保护作用。
论文目录
相关论文文献
标签：睾酮论文; 雄激素受体论文; 人脐静脉内皮细胞论文; 转录因子论文; 组织因子途径抑制物论文;