mPTP在七氟烷后处理诱导脑保护中的作用研究

论文摘要

脑缺血损伤是围术期常见并发症,寻找其保护措施是目前研究热点之一。我们实验室研究发现“缺血预处理”及多种“非缺血预处理”（如:吸入麻醉药、电针和高压氧）均能明显减轻脑缺血损伤。2003年zhao等发现心肌缺血后,在长时间的再灌注之前进行数次短暂再灌注/缺血的循环,可明显减轻心肌缺血再灌注损伤的现象,由此提出“缺血后处理”（Ischemic Postconditioning, IPost）概念。最近,我们研究发现在脑和脊髓缺血再灌注损伤中同样存在“缺血后处理”现象。与预处理相比,“缺血后处理”具有明显的优势,可行性强,临床应用前景广阔。但“缺血后处理”仍然具有一定的局限性,因此寻找可模拟“缺血后处理”的“非缺血后处理”手段具有重要意义。七氟烷是一种新型吸入麻醉药,具有明显的优势,临床使用广泛。目前关于“七氟烷后处理”能否模拟脑“缺血后处理”的保护效果未见报道,因此研究“七氟烷后处理”是否具有脑保护作用意义重大。本研究利用大鼠中动脉阻闭模型（Middle Cerebral Artery Occlusion, MCAO）,首先研究七氟烷后处理是否有脑保护作用,进而探讨mPTP在七氟烷后处理脑保护中的作用。本研究由二部分组成:第一部分为七氟烷后处理脑保护作用及其剂量效应关系的研究;第二部分为mPTP在七氟烷后处理脑保护机制中的作用研究。第一部分七氟烷后处理对脑保护作用的研究目的评价在缺血后期及再灌注早期吸入不同浓度的七氟烷行后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其剂量依赖性。方法雄性SD大鼠50只,随机分为空白对照组、吸氧组和0.5MAC、1.0MAC、1.5MAC七氟烷后处理组,每组10只。采用MCAO模型120min后再灌注72h制备局灶性脑缺血模型。各七氟烷后处理组于再灌注即刻的前20min和后10min给予不同浓度七氟烷吸入。再灌注后的24h、48h和72h行神经行为学评分并于最后一次评分后测定脑梗死容积比。结果0.5MAC、1.0MAC和1.5MAC组的脑梗死容积比分别为0.39±0.03,0.31±0.03和0.24±0.03 （各组之间P<0.05）,明显小于对照组0.53±0.05 （P<0.05）。吸氧组为0.51±0.05,与对照组无显著性差异（P>0.05）。各个时间点七氟烷后处理组神经行为学评分明显优于对照组和吸氧组。结论在局灶性脑缺血再灌注的缺血后期和再灌注早期吸入0.5MAC、1.0MAC和1.5MAC七氟烷行后处理均具有脑保护作用,且呈剂量依赖性。第二部分mPTP在七氟烷后处理诱导脑保护中的作用研究Part I: mPTP开放剂Atr对七氟烷后处理脑保护作用的影响目的观察苍术苷（Atr）对七氟烷后处理诱导的脑保护作用的影响。方法清洁级雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,1.0MAC Sevo组,1.0MAC Sevo+Atr组,1.0MAC Sevo+vehicle组和单纯Atr组。每组10只。Sevo后处理于再灌注即刻的前20min和后10min给予Sevo吸入。Atr于Sevo后处理前即刻通过侧脑室注射。再灌注后的24h、48h和72h行神经行为学评分并于最后一次评分后测定脑梗死容积比。结果缺血再灌注72h后脑梗死容积百分比Sevo组0.32±0.05明显小于空白对照组0.55±0.07 （P=0.000）; Sevo +Atr组0.57±0.06和空白对照组（P=0.418）、Atr组0.56±0.05 （P=0.605）均无统计学差异,而和Sevo组有明显统计学差异（P=0.000）;Atr组和空白对照组无统计学差异（P=0.768）;Sevo+vehicle组（0.35±0.06,P=0.218）和Sevo组相比无明显统计学差异。各时间点神经行为学评分Sevo组和Sevo+vehicle组明显优于对照组（P<0.05）。Sevo+Atr组以及单纯Atr组明显低于Sevo后处理组（P<0.05）。结论mPTP开放剂可取消七氟烷后处理的脑保护作用。Part II: mPTP关闭剂CsA对七氟烷后处理脑保护作用的影响目的观察环孢菌素A （CsA）对七氟烷后处理诱导的脑保护作用的影响。方法清洁级雄性SD大鼠50只,随机分为对照组,1.0MAC Sevo组,1.0MAC Sevo+CsA组,1.0MAC Sevo+vehicle组和单纯CsA组。每组10只。Sevo后处理于再灌注即刻的前20min和后10min给予Sevo吸入。CsA于Sevo后处理前即刻通过侧脑室注射。再灌注后的24h、48h和72h行神经行为学评分并于最后一次评分后测定脑梗死容积比。结果缺血再灌注72h后脑梗死容积百分比Sevo组（0.31±0.04）、Sevo +CsA组（0.25±0.04）、CsA组（0.30±0.03）和Sevo+vehicle组（0.33±0.05）均明显小于空白对照组（0.55±0.05） （P=0.000）; Sevo +CsA组（0.25±0.04）明显小于Sevo组和CsA组。Sevo组、Sevo+vehicle组、Sevo+ CsA组和单纯CsA组在各时间点明显优于对照组（P<0.05）。Sevo+ CsA组在各时间点明显优于Sevo后处理组（P<0.05）。结论mPTP关闭剂具有脑保护作用,并协同增强七氟烷后处理的脑保护作用。结论1七氟烷后处理对脑缺血/再灌注损伤具有保护作用,并且在0.5MAC到1.5MAC之间其保护作用呈剂量依赖性增强。2 mPTP参与七氟烷后处理脑保护作用的机制。mPTP开放剂Atr可取消七氟烷后处理的脑保护作用。mPTP关闭剂CsA有脑保护作用,并协同增强七氟烷后处理的脑保护作用。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 文献回顾
• 正文
• 1 实验仪器和试剂
• 2 第一部分 七氟烷后处理对局灶性脑缺血的保护作用
• 1 实验动物分组
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 3 第二部分 mPTP 在七氟烷后处理脑保护中的作用研究
• 实验一 mPTP开放剂苍术苷对七氟烷后处理脑保护作用的影响
• 1 实验动物分组
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 mPTP 关闭剂CsA 对七氟烷后处理脑保护作用的影响
• 1 实验动物分组
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附图
• 个人简历和研究成果
• 致谢