东北梅花鹿染色体C-带和高分辨G-带研究

论文摘要

目的:梅花鹿隶属偶蹄目、鹿科、鹿属。东北梅花鹿（Cervus Nippon Hortulorum）是国内仅存的三个亚种之一,具有很高的药用价值和经济价值。长久以来人们对东北梅花鹿的研究大多集中在理化性质和饲养管理以及疾病预防领域,对东北梅花鹿的核基因和染色体领域研究的较少。本文通过对东北梅花鹿的C显带和高分辨G显带技术及其带型的分析,为东北梅花鹿的细胞遗传学研究提供基础资料,为进一步提高染色体的显带数量提供依据,为后期的基因定位打下基础。方法:（1）锯茸时采集外周血,培养72小时后收集细胞,对染色体标本进行C分带处理,分析东北梅花鹿染色体的C显带结果。（2）锯茸时采集外周血,A组氨甲喋呤（Methotrexate,MTX）同步化细胞后洗脱MTX,加入胸腺嘧啶核苷（Thymidine,TdR）启动细胞周期,B组MTX同步化细胞后洗脱MTX,加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-Bromodexyuridine,BrdU）启动细胞周期,C组MTX同步化细胞后直接加入TdR启动细胞周期,D组MTX同步化细胞后直接加入BrdU启动细胞周期,测定各组的分裂指数。（3）锯茸时采集外周血,采用A组的方法培养细胞,收集细胞后结合胰酶G显带技术对东北梅花鹿染色体进行显带并分析。结果与结论:（1）常染色体仅着丝点处显带,并且第1、2号染色体着丝点染色较浅,仅隐约可见。X染色体着丝点呈较大的深染区。Y染色体整体浅染,着丝点不明显。这说明在亚种水平上,东北梅花鹿可能具有C带多态性。（2）A与C,B与D处理之间的分裂指数存在极显著差异,说明洗脱MTX会显著提高细胞的分裂指数,MTX的作用不仅仅是抑制胸腺嘧啶核苷甚至是嘌呤的合成,而且还能够抑制TdR以及其结构类似物BrdU参与DNA复制的活性;A与B处理之间存在极显著差异,表明当MTX被洗脱后,加入TdR启动细胞周期比加入BrdU启动细胞周期会有更高的细胞分裂指数,在一定浓度下TdR和BrdU启动DNA的复制的能力却有显著差别,TdR明显高于BrdU;C与D处理之间差异不显著,表明当MTX在细胞内长期存在时,无论是加入TdR还是BrdU都不会显著影响细胞的分裂指数。（3）高分辨G带的单套染色体共显带456条。根据Reading会议和家畜细胞遗传学国际命名体制,以试验结果为基础,绘制了东北梅花鹿高分辨G带模式图。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 绪论
• 1.1 梅花鹿研究现状
• 1.2 标记辅助选择研究及其QTL 定位
• 1.3 染色体研究现状
• 1.4 本文研究的目的和意义
• 2 东北梅花鹿染色体 C 带研究
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 3 东北梅花鹿外周血淋巴细胞同步化比较
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 4 东北梅花鹿染色体高分辨 G 带研究
• 4.1 实验材料
• 4.2 实验方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 参考文献
• 附：
• 1.基地鹿茸比较
• 2. 实验主要设备和试剂
• 3. 作者在攻读硕士学位期间的科研成果
• 4. 致谢