洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的提取纯化及质量标准研究

论文摘要

目的：研究山茱萸科（Cornaceae）桃叶珊瑚属（Aucuba Thunb.）植物洒金桃叶珊瑚（Aucuba japonica cv. variegata）中桃叶珊瑚苷的提取纯化工艺、拟定桃叶珊瑚苷质量标准草案以及对桃叶珊瑚苷原料药稳定性的初步考察。方法：采用回流提取法提取洒金桃叶珊瑚叶中的桃叶珊瑚苷,并用高效液相色谱法测定桃叶珊瑚苷的含量。利用S-8大孔树脂和硅胶柱层析分离桃叶珊瑚苷,筛选出最佳工艺条件。采用结晶法纯化桃叶珊瑚苷,并对其进行结构鉴定。对桃叶珊瑚苷进行性状描述与理化常数测定、建立鉴别、检查、含量测定方法,评价桃叶珊瑚苷原料药的质量。通过高温、高湿影响因素实验初步考察桃叶珊瑚苷原料药的稳定性。结果：以桃叶珊瑚苷为主要指标成分,确定S-8大孔树脂分离桃叶珊瑚苷的最佳条件为：上样液浓度2.76mg/ml,上样液流速2BV/h,上样量9.56mg/g,洗脱溶媒15%乙醇,洗脱流速2BV/h,洗脱剂用量3BV。经S-8大孔树脂纯化,产品纯度达到48.04%,回收率82.30%。硅胶柱分离桃叶珊瑚苷的最佳条件为：上样量为35mg/ml,洗脱剂为甲醇-三氯甲烷（1：4）3BV与甲醇-三氯甲烷（1：3）3BV,洗脱体积为3BV,洗脱流速为2BV/h。经硅胶柱纯化,产品纯度为79.19%,回收率83.38%。结晶法纯化所得纯品纯度达到92.26%,回收率68.9%。采用IR、MS、NMR技术对纯品进行结构鉴定,所得结果与文献报道的桃叶珊瑚苷的结构一致。对桃叶珊瑚苷纯品进行性状描述、理化常数测定、鉴别、检查、含量测定以及稳定性研究,初步拟定桃叶珊瑚苷的质量标准草案。桃叶珊瑚苷为白色或类白色粉末状结晶；无臭；味苦；在水、甲醇中易溶,在无水乙醇中略溶,在三氯甲烷、石油醚等溶剂中不溶；略有引湿性,比旋度约为-117。。鉴别采用TLC、HPLC、IR等方法,按药典方法检查一般杂质,规定杂质限量。含量测定采用HPLC法,测定结果稳定,重现性好。稳定性实验表明,桃叶珊瑚苷对高温、高湿均不稳定。结论：用乙醇回流提取,并经大孔树脂和硅胶柱分离,结晶法纯化,所得桃叶珊瑚苷含量达到92.26%。质量标准草案内容全面,可操作性强。桃叶珊瑚苷在高温、高湿条件下均不稳定,应低温密封保存。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论
• 1.1 研究背景与意义
• 1.2 课题的来源
• 1.3 洒金桃叶珊瑚的研究进展
• 1.4 桃叶珊瑚苷的研究进展
• 1.4.1 桃叶珊瑚苷提取方法研究
• 1.4.2 桃叶珊瑚苷分离纯化方法研究
• 1.4.3 桃叶珊瑚苷含量测定方法研究
• 1.4.4 桃叶珊瑚苷药理活性研究
• 1.5 研究内容
• 1.5.1 洒金桃叶珊瑚叶的采集与桃叶珊瑚苷的提取
• 1.5.2 大孔吸附树脂纯化桃叶珊瑚苷工艺研究
• 1.5.3 硅胶柱纯化桃叶珊瑚苷工艺研究
• 1.5.4 结晶法纯化桃叶珊瑚苷以及结构鉴定
• 1.5.5 桃叶珊瑚苷的质量标准研究
• 第2章 大孔树脂分离桃叶珊瑚苷的研究
• 2.1 洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的含量测定
• 2.1.1 实验仪器与试药
• 2.1.2 色谱条件
• 2.1.3 溶液的配制
• 2.1.4 洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的含量测定
• 2.2 洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的提取
• 2.2.1 洒金桃叶珊瑚中桃叶珊瑚营的提取
• 2.2.2 供试品溶液的配制
• 2.2.3 浸膏①中桃叶珊瑚苷的含量测定
• 2.3 洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的初步分离
• 2.3.1 洒金桃叶珊瑚叶中桃叶珊瑚苷的初步分离
• 2.3.2 供试品溶液的配制
• 2.3.3 浸膏②中桃叶珊瑚苷的含量测定
• 2.4 S-8大孔树脂中有机残留物的测定
• 2.4.1 实验仪器与试药
• 2.4.2 色谱条件
• 2.4.3 对照品溶液的配制
• 2.4.4 S-8大孔树脂中残留物的提取
• 2.4.5 S-8大孔树脂中残留物的处理
• 2.4.6 S-8大孔树脂中残留物的测定
• 2.5 大孔树脂分离桃叶珊瑚苷的工艺研究
• 2.5.1 实验仪器与试药
• 2.5.2 装柱及样品贮备液的配制
• 2.5.3 S-8大孔树脂对桃叶珊瑚苷的纯化工艺研究
• 2.5.4 放大实验
• 第3章 硅胶柱分离桃叶珊瑚苷工艺研究
• 3.1 实验仪器与试药
• 3.2 薄层色谱条件
• 3.3 硅胶柱分离桃叶珊瑚苷工艺研究
• 3.3.1 洗脱剂的初步确定
• 3.3.2 洗脱剂比例考察
• 3.3.3 上样量考察
• 3.3.4 洗脱体积考察
• 3.3.5 洗脱流速考察
• 3.3.6 动态洗脱曲线
• 3.3.7 重复性
• 3.4 放大实验
• 3.4.1 硅胶柱分离桃叶珊瑚苷放大实验
• 3.4.2 供试品溶液的配制
• 3.4.3 桃叶珊瑚苷粗品中桃叶珊瑚苷的含量测定
• 第4章 结晶法纯化桃叶珊瑚苷及其结构鉴定
• 4.1 结晶法纯化桃叶珊瑚苷
• 4.1.1 实验仪器与试药
• 4.1.2 结晶法纯化桃叶珊瑚苷
• 4.2 桃叶珊瑚苷的结构鉴定
• 4.2.1 实验仪器与试药
• 4.2.2 桃叶珊瑚苷的结构鉴定
• 4.3 质量标准研究样品的制备
• 第5章 桃叶珊瑚苷的质量标准研究
• 5.1 桃叶珊瑚苷原料药质量标准（草案）
• 5.2 桃叶珊瑚苷原料药质量标准起草说明
• 5.2.1 实验仪器和试药
• 5.2.2 性状
• 5.2.3 鉴别
• 5.2.4 杂质检查
• 5.2.5 含量测定
• 5.2.6 小结
• 5.3 桃叶珊瑚苷原料药稳定性研究
• 5.3.1 实验仪器和试药
• 5.3.2 考察项目及方法
• 5.3.3 影响因素实验
• 5.3.4 小结
• 结论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读学位期间发表的论文及参加的科研课题