秦巴山区宜昌百合的体细胞胚诱导及植株再生体系的研究

论文摘要

秦巴山区及其毗邻地区在我国来说是野生百合资源分布最丰富的地区之一,该地区总共有11种野生百合资源,这其中包括有野生百合资源的变种在内（郭美等2010）。但是最近几年以来,该地区的野生百合资源的种群的生存和繁衍不断的受到来自于一些商用的购于国外的种球的侵入以及一些外来的植物种群的渗入等方面的威胁,而且这些地区的野生百合资源赖以生存的生态环境也经受到了来自于自然的以及人为的等众多因素的破环,因此,对野生百合种质资源进行保护和保存的工作就显得非常的关键（薛晓娜等2007）。相对于百合的其它的组织培养途径来说,体细胞胚的发生诱导途径是一种具有后代数量多、繁殖速度快、结构较完整、再生率较高等众多的优点的途径（崔凯荣2010）。本实验研究了秦巴山区的野生宜昌百合（Lilium leucanthum）的组织培养体系和体细胞胚胎发生诱导体系,对宜昌百合的体细胞胚胎的发生诱导的各种影响因素做了探究。实验结果如下:1.野生宜昌百合的不定芽的发生诱导的研究:野生宜昌百合的鳞片最佳消毒时间:酒精30s和升汞10min的组合,在此消毒灭菌过程中的污染率是33.33%,死亡率为10%。诱导野生宜昌百合不定芽的最佳激素组合是:MS+1.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA,其不定芽诱导率是86.67%。不同部位的鳞片诱导分化不定芽能力由高到低的排列顺序为:中层>外层>内层。2.野生宜昌百合的体细胞胚胎的发生诱导的研究:三个不同生态型的宜昌百合体细胞胚胎发生的最佳诱导激素浓度组合有所不同。采自于陕西省镇巴县渔渡乡的宜昌百合体细胞胚胎发生的诱导最佳激素浓度组合是:MS+0.5 mg/L TDZ+1.0 mg/L NAA,其诱导体细胞胚胎发生率为91.43%;采自于陕西省留坝县留侯镇的宜昌百合体细胞胚胎发生的诱导最佳激素浓度组合是:MS+0.5mg/L TDZ+2.0mg/L NAA,其诱导体细胞胚胎的发生率为77.14%;采自于甘肃舟曲县立节镇的宜昌百合体细胞胚胎发生的诱导最佳激素浓度组合是:MS+0.5mg/L TDZ+1.5mg/L NAA,其诱导体细胞胚胎的发生率为85.71%。暗培养是诱导野生宜昌百合的体细胞胚胎发生的有利条件。鳞片的不同部位诱导体细胞胚胎发生、分化的能力由高到低排列顺序为:基部>中部>上部。60g/L的蔗糖浓度为诱导宜昌百合体细胞胚胎发生的最佳蔗糖浓度,其诱导率最高是90%。0.1g/L活性炭浓度为诱导宜昌百合体细胞胚胎发生的最佳活性炭浓度,其诱导率最高是83.33%。3.野生宜昌百合快繁与再生体系建立的最佳途径的研究:野生宜昌百合的一个接种鳞片通过不定芽诱导方式平均生成4.3个小鳞茎,一个接种鳞片通过体细胞胚诱导方式平均生成11.5个小鳞茎。宜昌百合的体细胞胚诱导方式是宜昌百合快繁和再生体系建立的更好的途径。4.野生宜昌百合试管苗的膨大、生根以及移栽的研究:影响野生宜昌百合试管苗鳞茎膨大的最佳培养基是:2MS+0.2mg/L NAA,增大倍数最大为2.51倍。野生宜昌百合生根的最佳培养基为:MS+0.2mg/L NAA+0.1g/L AC,最长根达到35.74cm。与此同时,本研究结果表明暗培养也是影响野生宜昌百合试管苗鳞茎膨大及生根的有利条件。野生宜昌百合试管苗的最佳炼苗时间为8天,移栽后成活率最高为83%;1/2MS营养液喷施移栽植株的叶面能达到最佳的效果,成活率达到80%;鳞茎直径大于1cm时移栽苗成活率最高,达到了88%;试管苗的根长在1-2cm时,移栽苗的成活率最高为77%。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1.1 百合属植物的栽培历史以及生物学特性
• 1.1.1 百合属植物的栽培历史
• 1.1.2 百合属植物目前的栽培发展现状
• 1.1.3 百合属植物的生物学特性
• 1.2 我国的野生百合种质资源的现状
• 1.2.1 野生百合资源的起源分布
• 1.2.2 野生百合资源现在所面临的危机
• 1.3 野生百合的体细胞胚发生研究进展
• 1.3.1 体细胞胚的发生
• 1.3.2 百合体细胞胚诱导及再生植株在我国的研究现状
• 1.3.3 百合体细胞胚的发生条件
• 1.4 本研究的目的意义及主要内容
• 第二章 宜昌百合不定芽的诱导
• 2.1 试验材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 外植体的消毒处理
• 2.2.2 培养条件
• 2.2.3 试验设计
• 2.3 结果与分析
• 2.3.1 酒精和升汞组合的灭菌时间对灭菌效果的影响
• 2.3.2 激素浓度及其组合对鳞片诱导不定芽的影响
• 2.3.3 外植体鳞片的部位对诱导不定芽产生的影响
• 2.3.4 不定芽诱导产生后代植株小鳞茎的增殖状况
• 2.4 讨论
• 2.4.1 酒精和升汞组合的灭菌时间对灭菌效果的影响
• 2.4.2 激素浓度组合对诱导不定芽的影响
• 2.4.3 鳞片部位的诱导不定芽的能力差异性
• 第三章 宜昌百合体细胞胚的诱导
• 3.1 试验材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 接种方式
• 3.2.2 体细胞胚形成的观察
• 3.2.3 试验设计
• 3.3 结果与分析
• 3.3.1 激素浓度及其组合对鳞片体细胞胚诱导的影响
• 3.3.2 光，暗条件对鳞片体细胞胚诱导的影响
• 3.3.3 鳞片的不同部位对诱导体细胞胚的影响
• 3.3.4 蔗糖的浓度对体细胞胚诱导的影响
• 3.3.5 活性炭的浓度对体细胞胚诱导的影响
• 3.3.6 体细胞胚形成的观察结果
• 3.3.7 体细胞胚胎发生的途径
• 3.3.8 体细胞胚诱导产生的鳞茎球以及生长状况
• 3.3.9 再生小鳞茎球的生根诱导
• 3.3.10 再生小鳞茎膨大的研究
• 3.3.11 再生植株的驯化和移栽
• 3.4 讨论
• 3.4.1 激素的组合对体细胞胚诱导的影响
• 3.4.2 光暗对宜昌百合体胚诱导
• 3.4.3 鳞茎片的部位对宜昌百合体细胞胚的诱导
• 3.4.4 蔗糖对宜昌百合体细胞胚诱导的影响
• 3.4.5 活性炭对宜昌百合体细胞胚诱导
• 3.4.6 体细胞胚产生的方式
• 3.4.7 炼苗和移栽
• 第四章 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介