福州市人群大肠埃希菌产ESBLs表型与基因型的初步研究

论文摘要

目的:在调查福州市饮食行业从业人员肠道大肠埃希菌一般耐药情况的基础上,调查分析福州市人群产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌检出率、表型与基因型别的流行情况,为制定地区特异性耐药菌株的防治策略提供依据。方法:2006年3月～2006年6月间,收集并鉴定福州市饮食行业从业人员肠道大肠埃希菌,采用琼脂稀释法检测这些细菌对14种抗菌药物的耐药性;同期,收集福州市5家医院住院病人肠道外感染标本的大肠埃希菌。采用临床实验室标准化研究所（Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI）推荐的终浓度为1μg/ml的头孢他啶、头孢噻肟、头孢曲松及氨曲南对上述两种来源的大肠埃希菌进行ESBLs的表型初筛试验,对于初筛阳性者采用微量肉汤稀释法进行确证试验,试验过程均以国际标准菌株大肠埃希菌ATCC25922（非产ESBLs菌株）和肺炎克雷伯菌ATCC700603（产ESBLs菌株）作为阴阳性对照。采用聚合酶链式反应（PCR）检测ESBLs的表型确证试验阳性者的相关编码基因blaSHV和blaCTX-M,并用限制性片段长度多态性（RFLP）分析产CTX-M型ESBLs亚型。结果:本研究分离的饮食行业从业人员肠道大肠埃希菌共716株,其中对青霉素类耐药率最高达65.78%（471/716）;对氨基糖苷类抗菌药物耐药率为21.39%（153/716）;对一代喹诺酮耐药率为37.15%（266/716）;而对三代头孢和三代喹诺酮类药物耐药率均较低,分别为17.74%（127/716）和5.39%（41/716）。这些菌株的多重耐药（对三种或三种以上抗生素同时耐药）率达到33.79%（242/716）。本研究还发现,这些现场分离菌株对第三代头孢类抗生素与喹诺酮类药物耐药性差异有统计学意义（χ2=54.38,p<0.01）,而对第三代头孢类抗生素与对氨基糖苷类药物耐药性差异无统计学意义（χ2=3.31,p>0.05）。饮食行业从业人员肠道分离的大肠埃希菌和临床感染标本分离的大肠埃希菌产ESBLs检出率分别为2.51%（18/716）和37.68%（102/264）,从这两部分人群共检出120株产ESBLs大肠埃希菌,这些产ESBLs大肠埃希菌的基因型别为:12.50%（15/120）携带SHV型基因、87.5%（105/120）携带CTX-M基因、并有10.80%（13/120）同时携带CTX-M基因和SHV型基因。105株CTX-M型中有20.00%（21/105）为CTX-M-1亚群、2.86%（3/105）为CTX-M-2亚群、77.14%（81/105）为CTX-M-9亚群（CTX-M-14）,未发现CTX-M-9亚群（CTX-M-13）。此120株产ESBLs大肠埃希菌皆为多重耐药菌,对青霉素的耐药率已达100%（120/120）;对一、二代头孢耐药率达70%以上,对三代头孢耐药率皆在60%以上,且以头孢噻肟最高达95.33%（115/120）;对氨基糖苷庆大霉素和卡那霉素耐药率为70.83%（85/120）和69.16%（83/120）;对喹诺酮类药物除对萘啶酸耐药率高达84.17%（101/120）外,其他耐药率皆在60%左右。结论:（1）福州市饮食行业从业人员肠道大肠埃希菌对14种抗菌药物,耐药率较高的是青霉素,较敏感的是三代头孢和三代喹诺酮类。（2）福州市饮食行业从业人员肠道大肠埃希菌对第三代头孢菌素与对喹诺酮类药物耐药差异有统计学意义,而对第三代头孢菌素与对氨基糖苷类耐药性差异无统计学意义。（3）福州市临床感染标本产ESBLs大肠埃希菌检出率与国内其他地区检出率大致相同,但远高于饮食行业从业人员肠道产ESBLs大肠埃希检出率。（4）福州市产ESBLs大肠埃希菌基因型别以产CTX-M为主,部分菌株产SHV型,或者同时产CTX-M和SHV型两种基因,与国内其他研究相似,但不同于欧美国家。它们的出现可能严重威胁本地抗感染治疗,应严密监测和控制此产酶的流行和播散。（5）本研究采用PCR-RFLP的方法分析CTX-M的亚型,福州市CTX-M型ESBLs以CTX-M-9亚群（CTX-M-14）为主,此外尚有CTX-M-1亚群和CTX-M-2亚群,与国内外研究不同,亚型具有一定的区域特异性。此PCR-RFLP是一种快速、简便的CTX-M型ESBLs亚群分析方法。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语
• 前言
• 第一部分 饮食从业人员肠道大肠埃希菌的一般耐药情况调查
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 第二部分 饮食从业人员与医院来源大肠埃希菌产ESBLs 表型与基因型的初步研究
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 综述
• 致谢