莫苯唑酸对牛脂促进的大鼠结肠癌发生的化学预防作用

论文摘要

背景:结肠癌是世界范围内导致死亡的主要肿瘤之一,近年来在我国的发病率呈快速上升趋势。结肠癌发生是一个多步骤、多阶段的过程。流行病学及相关动物实验证实,脂类饮食对结肠癌发生有极重要影响。饱和脂肪酸饮食习惯国家如欧美等国,结肠癌发病率较高。我们既往研究了玉米油、橄榄油、鱼油、牛脂等对大鼠结肠癌形成的影响,发现12周10%牛脂饮食虽未显著增加大鼠结肠癌早期损害标志-异常隐窝灶（aberrant crypt foci, ACF）的数量（仅见极少量）,且未见瘤体产生,但结肠上皮细胞增生及肿瘤相关蛋白胞浆β-catenin表达水平均明显增高。在氧化偶氮甲烷（azoxymethane, AOM）一过性协同作用下,牛脂可显著增强大鼠结肠上皮细胞的增生、提高上皮细胞胞浆β-catenin的水平,提高结肠异常隐窝灶ACF的数量,增加肿瘤数量。这些结果表明牛脂可促进大鼠结肠癌发生。因此,在高脂饮食人群中开展结肠癌化学预防有积极意义。大量研究表明环氧化酶（cyclooxygenase, COX）在结肠癌的发生过程中有重要作用。COX-1及COX-2均参与了结肠癌的发生过程,且COX-1参与时期可能更早。COX-1可促进结肠上皮DNA损伤干细胞存活,可维持结肠肿瘤生长至一定阶段。动物模型中,COX-1基因敲除及COX-1抑制剂如莫苯唑酸均具有结肠肿瘤抑制作用。目的:1.观察COX-1选择性抑制剂莫苯唑酸（mofezolac）对牛脂促进的大鼠结肠癌发生的影响。2.探讨莫苯唑酸影响牛脂促进的大鼠结肠癌发生的可能机制。方法:1.雄性SD大鼠96只,随机分为生理盐水处理组、AOM处理组。生理盐水处理组大鼠分别予10%牛脂（牛脂组）,10%牛脂+1200ppm莫苯唑酸（牛脂+莫苯唑酸组）;AOM处理大鼠分别予10%牛脂（牛脂组+AOM组）,10%牛脂+1200ppm莫苯唑酸（牛脂+AOM+莫苯唑酸组）。2.实验第12周,各组处死部分大鼠取结肠组织,亚甲蓝染色后立体显微镜下计数异常增生隐窝灶ACF的数量。3.实验第44周,各组处死部分大鼠取结肠,甲醛固定后计数肿瘤数量;部分大鼠腹腔注射BrdU标记液,2h后处死大鼠,切取远端结肠组织,有肿瘤形成组则取相应部位肿瘤周围外观正常结肠组织,石蜡包埋并切片,免疫组化检测结肠隐窝增殖状况。观察结肠隐窝增殖细胞分布变化,计算增殖细胞数量。4.实验第44周,各组处死部分大鼠后玻片刮取结肠黏膜,有肿瘤形成组则刮取肿瘤周围外观正常结肠黏膜组织,提取蛋白后western blot检测胞浆β-catenin、COX-1的表达水平。结果:1.实验第12周,牛脂组、牛脂+莫苯唑酸组见极少量ACF,未予统计;牛脂+AOM+莫苯唑酸组总ACF（101±11.92 vs. 185±17.45, P<0.05）及多隐窝ACF（multiplicity, ACF）数量（60±9.38 vs . 110.25±7.10, P<0.05）显著少于牛脂+AOM组。2.实验第44周,牛脂组、牛脂+莫苯唑酸组未见肿瘤形成。牛脂+AOM+莫苯唑酸组的肿瘤数量显著低于牛脂+AOM组（2.5±2.3 vs . 5.3±1.2, P<0.05）,且肿瘤发病率也显著降低（66.7% vs . 100%, P<0.05）。3.实验第44周,莫苯唑酸显著降低牛脂组（5.00±0.82 vs . 3.25±0.50, P<0.05）、牛脂+AOM组大鼠（7.75±0.96 vs . 4.75±0.50, P<0.05）结肠上皮隐窝增殖细胞数量。给予莫苯唑酸大鼠,增殖细胞多分布于隐窝底部。4.实验第44周,莫苯唑酸均明显降低牛脂组、牛脂+AOM两组大鼠结肠黏膜胞浆β-catenin、COX-1的表达水平（P<0.05）。结论:1. COX-1选择性抑制剂莫苯唑酸可有效抑制牛脂促进的大鼠结肠癌发生。2. COX-1、β-catenin的表达抑制可能参与了莫苯唑酸的抑制结肠癌发生过程。3.莫苯唑酸可能是高脂饮食人群化学预防结肠癌的潜在药物。

论文目录

• 一、英文缩略词表
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、论文正文
• 引言
• 材料与方法
• 结果
• 讨论
• 小结
• 五、参考文献
• 六、综述与参考文献
• 七、文章发表情况
• 八、致谢