论文摘要
目的前瞻性研究熊去氧胆酸（ursodeoxycholic acid,UDCA）、UDCA联合泼尼松龙两种治疗方案对原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis,PBC）的治疗效果,分析PBC患者肝脏生化指标、血清免疫球蛋白、外周血淋巴细胞亚群、细胞因子、抗线粒体抗体（anti-mitochondrial antibody,AMA）、抗M2亚型的抗线粒体抗体（AMA—M2）、抗GP210抗体和抗SP100抗体的临床相关性及其在两药物治疗后的变化特点。方法30例PBC患者（男1例,女29例,年龄由33至72岁,平均年龄52.33±8.77岁）,均已接受UDCA（20人）或UDCA联合泼尼松龙（10人）治疗至少2年。根据当前治疗方案分为UDCA组（U组,20人）和UDCA联合泼尼松龙组（UP组,10人）,PBC患者入选标准符合美国肝脏病学会2000年制定的PBC诊疗指南;入选研究患者签署知情同意书。治疗药物剂量为UDCA 13-15mg/kg/d;泼尼松龙起始剂量0.5mg/kg/d,4周开始减量,减至7.5mg/d时维持。于治疗前采集详细的临床及实验室资料,在治疗后第3、6、24月随访病人,动态检测肝脏生化指标（包括ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL、TBA、ALB）,白细胞计数（WBC）,血清IgG、IgA、IgM,外周血淋巴细胞亚群（包括B细胞、NK细胞、T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD4+CD28—T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD8+CD28-T细胞、CD4+CD25+T细胞）、血清细胞因子（包括TNF—α、IL—1β、IL—2、IL—4、IL—6、IL—10）及自身抗体（AMA、AMA-M2、抗GP210抗体、抗SP100抗体）的水平。结果U组和UP组患者在治疗后肝生化指标ALT（分别为P=0.001和P=0.016）、AST（U组P=0.009）、ALP（UP组P=0.018）、GGT（UP组P=0.027）均有所下降。治疗后3个月时,U组ALT、ALP下降迅速且明显低于UP组（分别为P=0.016和P=0.039）,此后差异消失。不同治疗组PBC患者血清IgG、IgA、IgM水平,外周血白细胞计数以及淋巴细胞亚群在治疗前后均无明显变化（P＞0.05）。不同治疗组PBC患者血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IL-1β水平都随治疗时间的延长而降低,尤其在治疗后24个月以上时下降最为明显（P＜0.05）。自身抗体检测结果显示,30例患者中AMA阳性率90%;AMA-M2阳性率73.33%;血清AMA滴度、AMA-M2水平在治疗后无明显改变（P＞0.05）。抗GP210抗体和抗SP100抗体表达阳性率分别为33.3%和16.67%。抗GP210抗体阴性组PBC患者的ALT、AST、ALP和IgM指标随着治疗时间的延长而逐渐降低（分别为P=0.000,P=0.000,P=0.014,P=0.039）。抗SP100抗体阴性组患者ALT、AST、ALP和GGT在治疗后明显降低（分别为P=0.007,P=0.015,P=0.005,P=0.048）。相关性分析显示,PBC患者肝脏ALT、AST、ALP和GGT指标与细胞因子IL-1β,IL-2,IL-6,IL-4,IL-10等指标间均具有不同程度正相关（P＜0.05）。细胞因子IL-1β和IL-10水平与淋巴细胞比例、CD8+CD28+T细胞比例之间均具有较好的正相关,与CD8+CD28-T细胞比例之间呈较好的负相关（P＜0.05）。抗GP210抗体水平与AST、DB、TBA、IgA、IgM之间均呈明显的正相关（P＜0.05）,抗SP100抗体与IgG水平之间均呈现较好的负相关（P＜0.05）。结论1、UDCA单药治疗和UDCA与泼尼松龙的联合治疗均可缓解PBC患者部分异常的肝脏生化指标,在考虑治疗副作用的情况下UDCA单药治疗仍为PBC的首选方案;2、两种治疗方案对PBC患者外周血中免疫球蛋白、Th1、Th2型T淋巴细胞,CD8+CD28—调节T细胞、CD4+CD25+调节T细胞、NK细胞和B细胞均无明显调节作用;3、两种治疗方案均有缓慢抑制Th1型细胞因子IL-2表达的作用,IL-2水平低表达可抑制T淋巴细胞的活化效应;4、两种治疗方案均有缓慢抑制PBC患者Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10水平的作用,这类细胞因子水平下降可降低对B细胞活化效应,抑制过高的体液免疫反应对自身组织的损伤;5、两种治疗方案均能缓慢抑制PBC患者炎性细胞因子TNF-α与IL-1β水平的表达,PBC患者Th2型细胞因子与炎性细胞因子水平的降低,可抑制患者体内单核巨嗜细胞增殖活化,缓解患者肝脏内小叶间胆管的免疫炎症病理损伤;6、血清AMA、AMA-M2是PBC患者标志性抗体,但与病情轻重无关;抗GP210抗体与与PBC患者病情相关,可用于评估疾病严重度;抗GP210抗体和抗SP100抗体阳性的患者对药物治疗反应不佳,提示它们对于预测药物疗效有一定临床价值。