低氧诱导因子1α、诱导型一氧化氮合酶在神经干细胞缺氧、复氧损伤的作用

论文摘要

目的:探讨低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor1α,HIF-1α）、诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase ,iNOS）与神经干细胞缺氧、复氧损伤的关系。方法:取出生24h以内的Wistar大鼠,无菌条件下取出鼠脑,剥离脑膜,分离海马组织,Hank’s液漂洗,移至预先加入适量基础培养液（DMEM/F12）的小瓶中,剪碎,吹打成细胞悬液,滤除组织块,调至密度为5×105/ml后转入25ml培养瓶中培养。7-8d传代一次。按试剂盒提供的方法进行nestin荧光染色。将实验组分两组（缺氧组和缺氧-复氧两组）,以终浓度为150uM-CoCl2的培养基培养细胞,制备模拟缺氧模型。缺氧4h后去除CoCl2形成复氧模型（组）。测定两组NSCs的增殖情况;RT-PCR法测HIF-1αmRNA、iNOS mRNA水平;DNA片段法测定NSCs的凋亡。结果:随着缺氧时间的延长,HIF-1αmRNA表达增加,在缺氧8h时达到高峰;iNOS mRNA表达增加,在缺氧12h达高峰。复氧时HIF-1αmRNA、iNOS mRNA表达都降低。HIF-1αmRNA表达的变化幅度要比iNOS mRNA大。缺氧0-8h凋亡与正常对照组无明显变化,缺氧12h后凋亡明显增加。结论: HIF-1αmRNA、iNOS mRNA表达增加可促进神经干细胞的增殖,抑制神经干细胞的凋亡。HIF-1α的作用显著于iNOS。

论文目录

• 一 中文摘要
• 二 英文摘要
• 三 前言
• 四 文献综述
• 五 材料与方法
• 六 结果
• 七 讨论
• 八 结论
• 九 参考文献
• 十 致谢
• 十一 英文缩写
• 十二 附图