本文主要研究内容
作者曹博,张亚楠,孔祥芬,徐冬清,叶棋浓,丁丽华,卫勃（2019）在《人类乳头状瘤病毒E6相关蛋白的原核表达及纯化》一文中研究指出：目的原核表达及纯化带GST标签的人类乳头状瘤病毒E6相关蛋白E6AP,为研究泛素化修饰与多种疾病的机制关联提供实验基础。方法以人卵巢文库为模板,利用PCR技术扩增E6AP编码序列,将其插入pGEXKG-GST载体中。利用DH5α感受态细胞鉴定重组质粒并大量克隆。质粒转入大肠杆菌Rossate菌株,小量诱导表达。利用GST融合蛋白纯化磁珠提取并纯化GST-E6AP融合蛋白,SDS-PAGE电泳和Western印迹检测纯化效率。结果 PCR技术成功获取大小约为2559 bp的E6AP编码序列,与pGEX-KG-GST载体连接,双酶切鉴定及公司测序结果显示GST-E6AP载体构建成功。转入Rossate菌株后诱导质粒小量表达,获取并提纯带有GST标签的E6AP重组蛋白。SDS-PAGE电泳和Western印迹结果显示E6AP蛋白纯化成功。结论成功构建重组质粒并表达GSTE6AP蛋白,获取纯化E6AP蛋白,为进一步研究泛素化在疾病发生发展中的地位和作用奠定坚实基础。
Abstract
mu de yuan he biao da ji chun hua dai GSTbiao qian de ren lei ru tou zhuang liu bing du E6xiang guan dan bai E6AP,wei yan jiu fan su hua xiu shi yu duo chong ji bing de ji zhi guan lian di gong shi yan ji chu 。fang fa yi ren luan chao wen ku wei mo ban ,li yong PCRji shu kuo zeng E6APbian ma xu lie ,jiang ji cha ru pGEXKG-GSTzai ti zhong 。li yong DH5αgan shou tai xi bao jian ding chong zu zhi li bing da liang ke long 。zhi li zhuai ru da chang gan jun Rossatejun zhu ,xiao liang you dao biao da 。li yong GSTrong ge dan bai chun hua ci zhu di qu bing chun hua GST-E6AProng ge dan bai ,SDS-PAGEdian yong he Westernyin ji jian ce chun hua xiao lv 。jie guo PCRji shu cheng gong huo qu da xiao yao wei 2559 bpde E6APbian ma xu lie ,yu pGEX-KG-GSTzai ti lian jie ,shuang mei qie jian ding ji gong si ce xu jie guo xian shi GST-E6APzai ti gou jian cheng gong 。zhuai ru Rossatejun zhu hou you dao zhi li xiao liang biao da ,huo qu bing di chun dai you GSTbiao qian de E6APchong zu dan bai 。SDS-PAGEdian yong he Westernyin ji jie guo xian shi E6APdan bai chun hua cheng gong 。jie lun cheng gong gou jian chong zu zhi li bing biao da GSTE6APdan bai ,huo qu chun hua E6APdan bai ,wei jin yi bu yan jiu fan su hua zai ji bing fa sheng fa zhan zhong de de wei he zuo yong dian ding jian shi ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自军事医学的曹博,张亚楠,孔祥芬,徐冬清,叶棋浓,丁丽华,卫勃，发表于刊物军事医学2019年05期论文，是一篇关于人基因论文,人类乳头状瘤病毒相关蛋白论文,原核表达论文,纯化论文,泛素化论文,军事医学2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自军事医学2019年05期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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