论文摘要
目的肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。其主要死因常为术后转移,研究表明新生毛细血管的形成是肺癌侵袭转移的必要条件。本研究通过对非小细胞肺癌（NSCLC）组织中乙酰肝素酶（Heparanase,HPA）、缺氧诱导因子-1α（Hypoxia Inducible Factors-1α,HIF-1α）、CD34及HPA mRNA表达的检测,进而探讨HPA、HIF-1α及CD34的表达与非小细胞肺癌的生成、侵袭转移的关系;HPA、HIF-1α的表达对非小细胞肺癌组织血管生成的影响;HPA与HIF-1α的表达在非小细胞肺癌组织中的相关性,为进一步揭示肺癌侵袭转移机制提供理论依据。方法1、应用免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）PV-9000通用型二步法检测了72例非小细胞肺癌组织和20例癌旁组织中HPA、HIF-1α和CD34的表达。通过CD34的表达计算出平均微血管密度（ Mean Microvessel Density,MVD）。2、应用原位杂交技术（In Situ Hybridization,ISH）检测了72例非小细胞肺癌组织和20例癌旁组织中HPAmRNA的表达。结果1、HPA在非小细胞肺癌组织和癌旁组织的表达比较:采用ISH和IHC法分别检测HPA mRNA和蛋白在72例肺癌组织和20例癌旁组织中的表达,检测结果显示:无论是mRNA水平还是蛋白水平,非小细胞肺癌组织中HPA的表达（ISH:75.0%,IHC:72.2%）均显著高于癌旁组织（ISH:0.0%,IHC:0.0%） （P<0.05）。综合ISH和IHC方法检测结果显示,非小细胞肺癌中HPA mRNA和HPA表达均与肺癌的淋巴结转移及TNM分期关系密切（P<0.05）;与患者年龄、性别、肿瘤最大直径、病理类型及肿瘤的分化程度无关（P>0.05）。非小细胞肺癌中HPA mRNA和HPA的表达具有极强的一致性（Pearson列联系数C=0.681）。2、HIF-1α在非小细胞肺癌组织和癌旁组织的表达比较:采用IHC法检测HIF-1α在72例肺癌组织和20例癌旁组织中的表达,检测结果显示:非小细胞肺癌组织中HIF-1α的表达（55.6%）显著高于癌旁组织（0.0%） （P<0.05）。检测结果表明,非小细胞肺癌组织中HIF-1α表达与肺癌的淋巴结转移及TNM分期关系密切（P<0.05）;与患者年龄、性别、肿瘤最大直径、病理类型及肿瘤的分化程度无关（P>0.05）。3、CD34（MVD值）在非小细胞肺癌组织和癌旁组织的表达比较:采用IHC法检测72例肺癌组织、20例癌旁组织CD34的表达,检查结果显示,MVD值在肺癌组织中的表达（40.36±11.24）明显高于癌旁组织（14.06±3.52）（P<0.05）。检测结果表明,非小细胞肺癌组织中MVD值与肺癌的淋巴结转移及TNM分期关系密切（P<0.05）;与患者年龄、性别、肿瘤最大直径、病理类型及肿瘤的分化程度无关（P>0.05）。4、肺癌组织中HPA的表达与血管生成:HPA阳性表达的肺癌组织中MVD值（44.24±11.62）显著高于HPA阴性表达的肺癌组织中MVD值（30.27±7.32） （P<0.05）,说明两者在表达强度方面可能具有一致性。5、肺癌组织中HIF-1α的表达与血管生成:HIF-1α阳性表达的肺癌组织中MVD值（46.62±11.80）显著高于HIF-1α阴性表达的肺癌组织中MVD值（33.52±6.53）（P<0.05）,说明两者在表达强度方面可能具有一致性。6、肺癌组织中HPA mRNA与HIF-1α的关系:肺癌组织中HPA mRNA的表达和HIF-1α的表达关系密切（χ2=7.500,P<0.005,C=0.307）。7、肺癌组织中HPA与HIF-1α的关系:肺癌组织中HPA的表达和HIF-1α的表达关系密切（χ2=10.471,P<0.005,C=0.356）。结论1、HPA mRNA和HPA在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。因而提示HPA可能与非小细胞肺癌的发生有关。非小细胞肺癌组织中HPA mRNA和HPA的表达与肺癌的淋巴结转移和TNM分期密切相关。与患者的年龄,性别,肿瘤的最大直径,肺癌的组织学类型,肿瘤分化程度无关。在非小细胞肺癌组织中HPA的表达与HPA mRNA的表达关系密切,提示HPA的表达情况可以间接反映其mRNA表达水平,而且HPA的高表达可能与HPA基因转录水平的上调有关。2、HIF-1α在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。因而提示HIF-1α可能与非小细胞肺癌的发生有关。非小细胞肺癌组织中HIF-1α的表达与肺癌的淋巴结转移和TNM分期密切相关。与患者的年龄,性别,肿瘤的最大直径,肺癌的组织学类型,肿瘤分化程度无关。3、CD34（MVD值）在非小细胞肺癌组织中的表达明显高于癌旁组织。非小细胞肺癌组织中MVD值与肺癌的淋巴结转移和TNM分期密切相关。4、在肺癌组织中HPA的表达强度与MVD值具有一致性,提示HPA可能是促进肺癌血管生成的重要因素之一。5、在肺癌组织中HIF-1α的表达强度与MVD值具有一致性,提示HIF-1α可能是促进肺癌血管生成的重要因素之一。6、在肺癌组织中HPA mRNA的表达与HIF-1α的表达关系密切,表达强度一致,提示HIF-1α对HPA的转录可能有正向调节作用,可能诱导HPA的转录。7、在肺癌组织中HPA的表达与HIF-1α的表达呈正相关,提示在肺癌的发生、发展过程中,HIF-1α与HPA可能具有协同作用。
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