急性冠状动脉综合征患者血管新生与循环内皮细胞的研究

论文题目: 急性冠状动脉综合征患者血管新生与循环内皮细胞的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物医学工程

作者: 王春玲

导师: 修瑞娟

关键词: 冠状动脉疾病,可溶性,血管新生,光学蛋白质芯片,椭偏光学显微成像,循环内皮细胞,细胞因子

文献来源: 中国协和医科大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的：第一部分：(1)探讨急性心肌梗死(AMI)患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)、血管形成素-1(Ang-1)及可溶性酪氨酸激酶受体Tie-2(sTie-2)的浓度变化；(2)根据检测结果，体外应用重组VEGF、Ang-1蛋白及重组人可溶性Tie-2／Fc嵌合体蛋白(Tie-2／Fc)，观察其对内皮细胞存活及管状形成的影响及可能的信号传导途径，推测AMI急性期血管新生的状况；(3)构建血清sTie-2检测用蛋白质光学芯片，探讨将光学蛋白质芯片检测法(OPC-IE)用于检测sTie-2浓度的可行性。第二部分：(1)应用携带抗CD146抗体的免疫磁珠分离计数AMI及不稳定心绞痛(UA)患者外周血中循环内皮细胞(CECs)；(2)探讨CECs与疾病及炎性相关因子C反应蛋白质(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNFα)的关系，探讨其产生的可能机制；(3)根据第一和第二部分的结果，探讨AMI时血清sTie-2浓度升高与内皮细胞损伤的关系。 方法：(1)ELISA法检测AMI患者(入院当天、发病48h、72h及7d时分别取血)和健康对照组血清中VEGF、Ang-1及sTie-2浓度变化；(2)体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，应用MTT法、Hoechst33342染色及Annexin V／PI双染法检测重组VEGF、Ang-1及不同浓度Tie-2／Fc对内皮细胞存活的影响；(3)构建3D凝胶，评价各种干预对内皮细胞管状形成的影响；(4)收集细胞，应用Western blotting检测重组VEGF、Ang-1及Tie-2／Fc对内皮细胞磷酸化Tie-2受体和蛋白激酶B(Akt)蛋白表达的影响。收集细胞培养上清液检测NO浓度变化，探讨可能的信号传导途径；(5)构建sTie-2检测用光学蛋白质芯片，使用OPC-IE法检测以上研究对象血清中sTie-2浓度；(6)AMI及UA患者入院时取静脉血抗凝，用携带抗CD146抗体的免疫磁珠分离外周血中的CECs。将已知数量的HUVECs混合于全血中，用于检测免疫磁珠分离的效果；荧光显微镜下计数；遗传性血友病因子(vWF)、CD31免疫组化及透射电镜对分选细胞进行内皮源性鉴定；(7)应用Annexin V-FITC／PI双染法检测CECs的凋亡状态；(8)免疫透射比浊法或酶联免疫法检测血清中各种炎性相关因子的水平。 结果：(1)AMI组(n=27)各时间点的VEGF及Ang-1水平与对照组(n=28)相

论文目录:

缩写词表

中文摘要

英文摘要

第一部分：急性心肌梗死患者可溶性Tie-2的检测及其对血管新生作用的研究

前言

实验资料

实验方法

实验结果

一、临床研究结果

二、基础研究结果

三、ELISA法与OPC-IE法检测血清sTie-2浓度的比较

讨论

存在的问题及今后研究方向

结论

参考文献

第二部分：急性冠状动脉综合征患者循环内皮细胞与炎性因子的相关性研究

前言

资料与方法

实验结果

1．研究对象的临床特征

2．HUVECs的免疫磁珠分离结果

3．临床标本的CECs特征

4．临床标本CECs凋亡检测结果

5．研究对象的CECs水平

6．炎性相关因子检测结果

7．CECs与炎性相关因子相关性研究结果

8．IL-6及TNFα与其他因素的相关性分析

9．CECs与血清sTie-2及VEGF水平的关系

讨论

今后研究方向

结论

参考文献

论文综述：循环内皮细胞的研究及进展

待发表英文文章校样

1. Soluble angiopoietin receptor Tie-2 in patients with acute myocardial infarction and its effects on angiogenesis

2. Serum C-reactive protein and circulating endothelial cells in patients with acute myocardial infarction

致谢

个人简历

发布时间: 2006-10-13

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