运动发酵单胞菌adhB基因置换变形链球菌Idh基因重组质粒的构建

运动发酵单胞菌adhB基因置换变形链球菌Idh基因重组质粒的构建

论文摘要

变形链球菌是龋病的主要致病菌,乳酸脱氢酶作为变形链球菌的重要致病因子,能够消化糖代谢的中间产物丙酮酸生成乳酸,造成牙面局部酸性环境,促使牙体组织脱矿,继发龋损。本研究从失活乳酸脱氢酶活性抑制变形链球菌产酸入手,研究替代疗法在龋病预防中的应用。为解决乳酸脱氢酶基因完全缺失对变形链球菌致死性影响的问题,本实验在已成功克隆变形链球菌ldh 基因和其翻译起始密码子上游431bp 和终止子下游882bp 同源区的基础上,应用反向PCR 法造成乳酸脱氢酶基因缺失突变,采用酶切连接方法引入运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶基因进行置换,构建重组质粒pMDLA。为后续研究奠定基础,同时亦拓展了工业菌株运动发酵单胞菌在医学领域的应用。

论文目录

  • 引言
  • 材料与方法
  • 1 主要材料
  • 1.1 菌株和质粒
  • 1.2 酶和试剂
  • 1.3 主要仪器设备
  • 1.4 引物设计及合成
  • 1.5 培养基
  • 2 主要方法
  • 2.1 运动发酵单胞菌的复苏培养及菌种保存
  • 2.2 运动发酵单胞菌基因组DNA 的制备
  • 2.3 聚合酶链反应
  • 2.4 PCR 产物的回收
  • 2.5 感受态细胞的制备
  • 2.6 adhB 基因片段TA 克隆构建重组质粒pGEMA
  • 2.7 adhB 置换ldh 构建重组质粒pMDLA
  • 实验结果
  • 1 PCR 法扩增得到adhB 基因片段
  • 2 重组质粒pGEMA 的构建及鉴定
  • 3 反向PCR 法诱导ldh 基因缺失突变
  • 4 重组质粒pMDLA 的构建和鉴定
  • 讨论
  • 1 反向PCR 法在诱导ldh 缺失突变中的应用
  • 2 酶切位点的设计
  • 3 运动发酵单胞菌在医学领域中应用的扩展
  • 结论
  • 参考文献
  • 附图和附表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 附录综述
  • 致谢
  • 导师及作者简介
  • 相关论文文献

    • [1].IDH突变胶质母细胞瘤研究进展[J]. 化工时刊 2020(08)
    • [2].间变性星形细胞瘤,IDH-突变[J]. 中国现代神经疾病杂志 2017(09)
    • [3].肥胖细胞型星形细胞瘤,IDH-突变[J]. 中国现代神经疾病杂志 2017(10)
    • [4].络活喜联合倍他乐克降低中青年IDH疗效观察[J]. 医学理论与实践 2016(24)
    • [5].伴IDH突变的急性髓系白血病的靶向治疗进展[J]. 临床血液学杂志 2020(02)
    • [6].弥漫性星形细胞瘤,IDH-突变[J]. 中国现代神经疾病杂志 2016(10)
    • [7].IDH突变和1p/19q联合缺失型脑胶质瘤的影像学研究进展[J]. 放射学实践 2020(09)
    • [8].甘蔗绵蚜不同地理种群异柠檬酸脱氢酶(IDH)的多样性[J]. 华东昆虫学报 2008(02)
    • [9].基于IDH专利数据的中国设计产业集聚趋势及其演变实证研究[J]. 系统工程 2015(07)
    • [10].胶质瘤p53、PTEN和IDH与HIF-1α的相关性[J]. 生命科学 2017(08)
    • [11].IDH基因突变与胶质瘤相关性的研究进展[J]. 中国医学影像学杂志 2020(02)
    • [12].生脉注射液联合低温可调钠血液透析在预防IDH的应用[J]. 智慧健康 2020(15)
    • [13].酰胺质子转移成像可预测高级别胶质瘤的生存期和IDH突变状态[J]. 国际医学放射学杂志 2020(01)
    • [14].IDH智能热网系统在供热系统上的应用分析[J]. 区域供热 2017(02)
    • [15].磁共振动态磁敏感对比增强成像在术前脑胶质瘤分级诊断及IDH突变状态评估中的应用价值[J]. 现代肿瘤医学 2020(21)
    • [16].IDH智能热网中心建设案例[J]. 供热制冷 2016(06)
    • [17].胶质瘤病人异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变的成像预测:系统回顾和荟萃分析[J]. 国际医学放射学杂志 2019(02)
    • [18].临床分子病理指标检测评估IDH突变型原发性胶质母细胞瘤患者预后的价值[J]. 江苏医药 2018(12)
    • [19].IDH突变及其抑制剂在恶性肿瘤治疗中的研究进展[J]. 肿瘤药学 2018(05)
    • [20].IDH在跑气保用胎侧支撑胶中的应用研究[J]. 中国橡胶 2019(12)
    • [21].高级别脑胶质瘤IDH表型与预后相关性的MR研究进展[J]. 国际医学放射学杂志 2020(03)
    • [22].幕上IDH野生型胶质母细胞瘤的MRI图谱:表型、治疗和预后的概率图[J]. 国际医学放射学杂志 2020(01)
    • [23].脑胶质瘤IDH基因突变与定量多模态MRI研究进展[J]. 中国医学影像技术 2017(10)
    • [24].对进行维持性血液透析治疗的患者出现IDH的影响因素分析[J]. 当代医药论丛 2018(16)
    • [25].IDH突变的弥漫性和间变性星形细胞瘤具有相同的发病年龄和极小的生存期差异:一个WHO分级的问题[J]. 临床与实验病理学杂志 2015(07)
    • [26].MR影像表型与临床特征相结合可提高对IDH野生型低级别胶质瘤的预后价值[J]. 国际医学放射学杂志 2020(04)
    • [27].硕人华源IDH项目喜获乌鲁木齐市科学技术进步奖[J]. 供热制冷 2017(05)
    • [28].幕上IDH突变型低级别胶质瘤MRI特征与病理相关研究[J]. 中华神经外科疾病研究杂志 2016(02)
    • [29].高阶成像参数可改善T_2/FLAIR不匹配征预测弥漫性低级别胶质瘤亚型即IDH突变与无1p19q共缺失的价值[J]. 国际医学放射学杂志 2020(02)
    • [30].幕上IDH突变型与野生型胶质细胞瘤MRI强化特征分析[J]. 中华神经外科疾病研究杂志 2018(06)

    标签:;  ;  ;  ;  

    运动发酵单胞菌adhB基因置换变形链球菌Idh基因重组质粒的构建
    下载Doc文档

    猜你喜欢