论文摘要
骨疏丹方剂由淫羊藿、蛇床子、骨碎补和丹参四味中药组成。本文对骨疏丹颗粒剂工艺进行了研究,并对其建立了5组分同时测定的含量测定方法,为骨疏丹颗粒剂质量控制提供了保证;完善了骨疏丹方剂的药动学研究。一、骨疏丹颗粒剂制备工艺研究以吸湿性和成型性为指标,对五种常用辅料分别进行单一辅料和双辅料的筛选,并通过正交设计试验方法确定骨疏丹颗粒剂处方工艺。即主辅料比例为3∶1,糊精和乳糖两辅料间比例为2∶1,乙醇的浓度为85%。通过测定休止角和临界相对湿度,考察颗粒的流动性与吸湿性。二、骨疏丹颗粒剂的质量控制方法对骨疏丹颗粒剂中的中柚皮苷、淫羊藿苷和蛇床子素进行了薄层色谱鉴别。建立了RP-HPLC法测定骨疏丹颗粒剂含量的方法。采用Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm,5.0μm）柱,流动相:乙腈—水（21∶79）,检测波长为280 nm,柱温为25℃,流速为1.0 mL·min-1,进样量20μL。结果新北美圣草苷,柚皮苷,淫羊藿苷,欧前胡素和蛇床子素分别在5.32-160 mg·L-1,4.90-147 mg·L-1,10.2-307 mg·L-1,1.58-47.3 mg·L-1和8.02-241 mg·L-1浓度范围内线性关系良好,回归方程分别为Y=1.01×104x+11.0,Y=4.63×104x+65.7,Y=2.26x104x-17.7,Y=2.80×104x+3.11和Y=2.56×104x-8.36。平均回收率分别为95.8%,97.0%,97.1%,98.3%和98.6%。本研究为骨疏丹颗粒剂的质量控制提供了方法依据。三、骨疏丹中新北美圣草苷和柚皮苷在大鼠体内的药物动力学研究建立了同时测定大鼠血浆中新北美圣草苷和柚皮苷的液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）,以橙皮苷为内标,色谱条件采用ACQUITY UPLCTMBEH C18色谱柱,流动相为乙腈-水（20:80,v/v）,流速为0.25 mL·min-1,柱温为40℃;质谱条件采用ESI源,负离子检测方式,多反应监测（MRM）。新北美圣草苷和柚皮苷分别在15.0-960 ng·mL和12.0-1200 ng·mL-1范围内线性关系良好。新北美圣草苷日内和日间精密度的RSD值分别不大于9.7%和7.6%,柚皮苷日内和日间精密度的RSD值分别不大于7.8%和12.9%,新北美圣草苷的准确度（RE）在-4.3～0.43%之间,柚皮苷的准确度（RE）在-3.8～3.0%之间。新北美圣草苷和柚皮苷的回收率均大于90%。研究了大鼠灌胃骨疏丹后新北美圣草苷和柚皮苷的药物动力学。新北美圣草苷和柚皮苷的Cmax分别为236.5 ng·mL-1和332.5 ng·mL-1,t1/2分别为0.47 h和0.41 h,Tmax均为0.20h,AUC0～∞分别为204.5 ng·mL-1·h和386.2 ng·mL-1·h,均表现为吸收快,消除快。