论文摘要
人参果为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Meyer)的成熟果实。随着人参地上部分利用的研究进展,人参果具有高含量的人参皂苷和显著的生理活性,已引起国内外学者的广泛关注。本研究以名贵中药人参的果实为原料,生物体系选择上,主要以丛毛红曲霉、锈色红曲霉、巴克红曲霉、橙色红曲霉、白地霉等5种菌株为主,在底物选择方面,则以人参皂苷中某些单体皂苷含量较大的人参果浆为首选,摇瓶液体发酵研究人参皂苷生物转化报道较少,以上菌种发酵转化人参皂苷迄今尚未见系统的报道。近年来,随着分子生物学技术的进步,人参皂苷的生物合成重又引起人们的研究热情,并从基因水平上试图阐明人参皂苷生物合成途径。本研究将利用人参果浆及其发酵液液体发酵方法从人参总皂苷含量的变化、单体皂苷组成比例等方面进行了较为系统的研究。将人参果汁经过钴60辐射灭菌后分别接入丛毛红曲霉、锈色红曲霉、巴克红曲霉、橙色红曲霉、白地霉等5种菌株进行微生物发酵,通过正交实验确定最佳发酵工艺条件,最适pH为7.0,最佳装液量为120ml,最适温度为30℃,最适转速为120 rpm。得到人参果浆发酵液,总皂苷含量最高的是发酵14天的白地霉,果浆原汁总皂苷含量为3.565mg/ml,发酵后达到4.366mg/ml,总苷含量高出果浆原汁22.47%。通过大孔吸附树脂柱富集人参果总皂苷,通过静态吸附实验对4种大孔吸附树脂粗筛,选定了吸附量较大的树脂D101。并对树脂D101进行了吸附pH、解析乙醇浓度、解析pH值等进行了初步的探讨,得出了最佳工艺:人参果浆发酵液pH6.5达到最大吸附量,以pH为7的70%乙醇为洗脱剂,流速为6ml/min可达到最大解析率56.89%有机溶剂提取、萃取、大孔吸附树脂层析、硅胶柱层析等常规的植物化学方法和技术手段通过多种不同的提取、分离工艺路线,从人参果中分得5个单体化合物,并结合HPLC方法,对人参果浆原汁及发酵液中单体皂苷进行含量测定。这些工作的完成,为人参皂苷生物转化及生物合成提供新方法、新途径,对深入研究人参皂苷生物转化、生物合成机理、新用途的开发具有较大的理论意义与实际应用价值。