濒危植物疏花水柏枝（Myricaria Laxiflora）种群遗传分化与黄酮类化合物变异研究

论文摘要

疏花水柏枝（Myricaria laxiflora（Franch.）P. Y. Zhang et Y. J. Zhang）隶属柽柳科、水柏枝属,是一种多年生灌木,特产于我国长江三峡地区的秭归、巴东、巫峡口等地,分布海拔70-130m以下。本文在调查疏花水柏枝自然种群的基础上,选择了库区内6个种群作为研究对象。结合其形态分化、等位酶分析、黄酮类化合物含量多样性、SDS-PAGE电泳探讨了疏花水柏枝各种群之间的形态变异、种群内及种群间的遗传多样性水平、以及由黄酮类化合物含量的变化所体现出生境与其次生代谢产物之间累积的关系。结果如下: ● 方差分析显示:疏花水柏枝个体之间存在一定程度的变异,20个形态指标中有8个差异达显著水平,有3个指标差异达极显著水平;不同个体聚类结果表明,多数不同种群个体混聚在一起,种群内部个体之间形态差异较大,另外同一种群的不同个体,也有少量的聚在一起,表明种群内部遗传上较为相似;种群水平上的聚类分析显示,跳石种群与其它5个种群差异较大,培石的种群与巫峡口的种群形态变化不大,由于其不存在较大的地理隔离,种群间有较多的基因交流。 ● 检测的7种等位酶中谱带清晰的有5种,分别为过氧化物酶（PER）、细胞色素氧化酶（CYT）、超氧化物歧化酶（SOD）、酯酶（ES）、淀粉酶（AMY）。共获得34条酶谱带,确定了16个等位基因位点,其中9个为多态位点,7个为单态位点。多态位点百分率为60.67%,且都具有2个等位基因。平均每个位点的等位基因数为1.64个,平均每个位点的等位基因有效数Ae为1.60。平均预期杂合度He为48%,实际杂合度HO为82%,表现出较高的遗传多样性。 ● SDS-PAGE凝胶电泳分析表明:望霞和培石的种群与其它种群间已经有了一定程度

论文目录

• 目录
• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 1.1 引言
• 1.2 濒危植物保护生物学研究进展
• 1.2.1 遗传多样性的研究
• 1.2.2 濒危植物遗传多样性研究的主要方法
• 1.2.3 基因流在濒危植物保护中的作用
• 1.2.4 黄酮类化合物的研究
• 1.3 研究对象
• 1.3.1 疏花水柏枝形态特征
• 1.3.2 疏花水柏枝的地理分布及系统学意义
• 1.3.2.1 疏花水柏枝生境特征
• 1.3.2.2 疏花水柏枝系统学意义
• 1.4 研究进展
• 1.5 目的及意义
• 第二章 材料与方法
• 2.1 样地的确定、调查与取样
• 2.2 研究方法
• 2.2.1 疏花水柏枝形态分化研究
• 2.2.2 疏花水柏枝等位酶分析
• 2.2.2.1 样品制备
• 2.2.2.2 电泳及染色
• 2.2.2.3 Rf值计算及图谱绘制
• 2.2.2.4 遗传多样性的度量
• 2.2.2.5 种群或种的遗传结构度量
• 2.2.2.6 种群间遗传关系度量
• 2.2.2.7 聚类分析
• 2.2.3 疏花水柏枝SDS-PAGE标记分析
• 2.2.3.1 蛋白提取
• 2.2.3.2 蛋白定量
• 2.2.3.3 凝胶制备
• 2.2.3.4 点样及电泳
• 2.2.3.5 染色和脱色
• 2.2.3.6 聚类分析
• 2.2.4 疏花水柏枝黄酮类化合物变异研究
• 2.2.4.1 取材
• 2.2.4.2 药品及主要仪器
• 2.2.4.3 测定方法
• 2.2.4.4 正交试验
• 第三章 结果与讨论
• 3.1 疏花水柏枝形态分化数量分析
• 3.1.1 方差分析
• 3.1.2 聚类分析
• 3.1.2.1 个体水平上的聚类分析
• 3.1.2.2 种群水平上的聚类分析
• 3.1.3 讨论
• 3.2 疏花水柏枝酶电泳的遗传分化研究
• 3.2.1 谱带分布式样
• 3.2.2 种群遗传结构分析
• 3.2.3 种群遗传分化
• 3.2.4 种群间遗传距离的聚类分析
• 3.2.5 SDS-PAGE凝胶电泳分析
• 3.3 疏花水柏枝黄酮类化合物标记研究
• 3.3.1 芦丁吸收峰测定和标准曲线绘制
• 3.3.2 不同乙醇浓度对提取总黄酮量的影响
• 3.3.3 不同温度条件对提取总黄酮量的影响
• 3.3.4 不同酸碱度对提取总黄酮量的影响
• 3.3.5 正交实验
• 3.3.6 种群间总黄酮的变异
• 3.3.6.1 提取结果测定
• 3.3.6.2 结果分析
• 第四章 结论
• 参考文献
• 致谢