一、LC-MS分析饲料中的己烯雌酚（论文文献综述）
肖志明[1]（2021）在《典型双酚类化合物在鸡蛋和蛋鸡体内代谢转化规律研究》文中研究指明环境内分泌干扰物（Environmental endocrine disrupting chemicals,EDCs）又称环境类激素（Environmental hormone）,是指可通过干扰动物或人体内保持自身平衡和调节发育过程天然激素的合成、分泌、运输、结合、反应和代谢等过程,从而对动物或人体的生殖、神经和免疫系统等的功能产生影响的外源性化学物质。EDCs具有低含量以及干扰动物和人体内分泌过程、“三致”（致癌、致畸、致突变）、诱发糖尿病等毒性效应,能够通过食物链危害人体健康。目前,对于EDCs影响食品安全相关研究是国际上的热点研究课题,但关于EDCs在“环境—饲料—养殖动物—畜禽产品”全链条迁移转化方面仍存在盲区。针对上述问题,本研究建立了饲料及畜产品中双酚类EDCs的高灵敏度确证分析方法,揭示了双酚类EDCs在饲料及畜产品中的赋存状态,并在国际上首次阐明了新型双酚类化合物BPF在蛋鸡体内的迁移转化及代谢规律,初步探明了其从“环境—饲料—养殖动物—畜禽产品”全链条迁移中的Carry-over和Transfer factor,为饲料和畜产品中双酚类EDCs的风险评估和限量制定提供基础性数据支撑。研究建立了饲料和动物源性食品中八种双酚类化合物（BPA、BPS、BPF、BPAF、BPB、BPP、BPAP、BPBP）的直接提取和超声探针辅助酶解（Enzymatic probe sonication,EPS）结合超高效液相色谱—串联质谱（UPLC-MS/MS）检测方法。方法的检出限（LODs）为0.02～0.05?g/kg,定量限（LOQs）为0.1～0.2?g/kg,平均回收率在81.2～106.0%之间,批内变异系数为0.6～9.7%,批间变异系数均≤12.5%,在0～50?g/L范围内的线性关系良好（R2≥0.996）。本研究EPS时间仅为120 s,而传统酶解方法需要12 h以上,从而大幅提升工作效率,特别适用于大批量动物源性样品的检测处理。将建立的EPS-UPLC-MS/MS方法用于市售动物源性食品中双酚类化合物的暴露分析,结果显示BPA、BPS、BPF、BPAF、BPP和BPB的检出率分别为65.2%、42.4%、33.7%、29.4%、28.3%和27.2%,表明BPA替代品已经得到了大范围应用,并对动物源性食品造成一定程度的污染。通过Pearson相关性分析结果显示BPA和BPAF、BPS和BPF、BPS和BPAF、BPF和BPAF之间均具有显着相关性,表明这些化合物在动物源性食品中存在共同污染,可能具有相同的污染来源。研究发现BPF暴露对蛋鸡的生产性能具有显着影响,空白对照组、低剂量组（0.1 mg/kg）、中剂量组（0.5 mg/kg）和高剂量组（2.5 mg/kg）蛋鸡的产蛋率分别为82.8±2.3%、89.3±3.8%、82.2±4.3%和75.6±3.3%。低剂量组、高剂量组蛋鸡产蛋率与空白对照组相比均具有极显着性差异（p<0.001）,中剂量组蛋鸡产蛋率和空白对照组之间则无差异,表明BPF暴露对蛋鸡产蛋率的影响呈现典型的非剂量—效应关系（Non-linear/non-monotonic dose-response curve）。鉴于非剂量—效应关系是内分泌干扰物的典型特征之一,也与动物和人体正常的激素作用是一致的,表明BPF暴露对蛋鸡可能具有内分泌干扰效应。BPF在蛋鸡体内吸收迅速,在暴露第2天即可从鸡蛋中检出BPF,并在暴露期第11天达到峰浓度(Cmax),低、中、高剂量组Cmax分别为1.63±1.30μg/kg、7.06±2.83μg/kg和26.2±4.96μg/kg。中剂量组在暴露后第8天即超过了欧盟规定的人体BPA每日耐受摄入量（Tolerable Daily Intake,TDI）4μg/kg bw/day,而高剂量组仅需暴露4天后即可超过TDI限量规定。BPF在蛋黄中的含量（69.1±7.4μg/kg）远高于蛋清中（3.0±0.4μg/kg）,蛋黄中BPF浓度大约是蛋清中的23倍。蛋鸡肝脏中BPF的含量水平远高于血浆、鸡蛋和肌肉,表明肝脏是双酚类化合物主要的作用靶标。低、中、高剂量组肝脏中BPF的消除半衰期大约为5.8、4.5和4天。肝脏中BPF消除呈现先快后慢的趋势,低剂量组在消除期第14天后低于方法LODs,中、高剂量组则在第28天后低于方法LODs。采用超高效液相色谱—高分辨率质谱（UPLC-HRMS）研究了BPF在蛋鸡体内外代谢,发现BPF在鸡肝微粒体中主要发生细胞色素P450酶参与的羟基化、水解和氧化反应,发现了5种I相代谢产物,分别为4-（Hydroxymethyl）phenol（m/z 123）、o-OH BPF（m/z 215）、GSH conjugated BPF（m/z 504）和GSH conjugated o-OH BPF（m/z 520）。BPF在蛋鸡体内则主要发生葡萄糖醛酸酶和硫酸酯酶参与的羟基化及结合反应,共发现了6种II相代谢产物,分别为肝脏细胞色素P450酶作用下生成的羟基化Hydroxylated BPF（m/z 215）,芳基硫酸酯酶作用下生成的单磺酸结合BPF（BPF-sulfate,m/z 279）以及双磺酸结合BPF（BPF-disulfate,m/z 359）,葡萄糖醛酸酶作用下生成的单葡萄糖醛酸结合BPF（BPF-glucuronide,m/z 375）和双葡萄糖醛酸结合BPF（BPF-diglucuronide,m/z 551）,以及BPF-磺酸/葡萄糖醛酸（BPF-sulfate/glucuronide,m/z 455）。
苗恩铭[2]（2020）在《多重丹磺酰氯固相标记结合LC-MS分析环境雌激素》文中指出环境雌激素属于内分泌干扰物,具有内源雌激素类似的生理效应。通过水体和食物链传递,这些污染物可以在生物体中富集、放大,造成一系列的危害,如种群性别比例失衡,雄性生育能力降低,破坏生态系统,影响种群繁衍,甚至物种灭绝。因此对这类物质的监控非常重要,需要灵敏、准确、高效的分析方法检测其在环境中的含量,为后续的防控与治理提供理论依据。液相色谱-质谱（LC-MS）技术是雌激素分析重要的方法。常规的外标法定量时,由于样品复杂成分和基质干扰,通常难以获得精准的测量结果。同位素标记法可以对大多数可标记的化合物实现准确分析,有效克服基质效应,校正共洗脱化合物的离子抑制和仪器运行条件差异造成的误差等,而且不受同位素内标商品化程度低,难以获取的限制。为了提升LC-MS的分析效率,本研究中发展了一种基于一组同位素丹磺酰氯标记的方法,将其用于多重标记雌激素,可实现在单次进样时分析多个样品。由于环境样品中雌激素的含量通常为痕量水平,难以直接检测,本实验中通过溶剂热法制备了可用于高效富集这类目标物的磁性C18材料,通过磁性固相萃取（MSPE）富集净化样品中的雌激素。结合MSPE和多重固相丹磺酰氯标记,发展了一种基于多重同位素固相标记结合LC-MS的方法,并将其应用于环境样品的分析。在构建方法过程中,对方法的回收率,准确性,精密度,检测限,定量限和线性定量范围进行系统评估,该方法具有较高的回收率（86.8%-93.2%）,稳定的重现性（日内RSDs<3.5%,日间RSDs<5.5%）,良好的准确性（96.8%-108.3%）,较低的检测限和定量限（LODs和LOQ分别为0.1-0.5 ng/L和0.5-2 ng/L）,定量浓度范围在0.01-100μg/L内保持良好的线性（R2>0.999）,验证了该方法可用于复杂样品中的雌激素准确分析。该方法分析了河水和鸡粪两类典型环境样品中的7种雌激素。在结果中均发现了雌激素的存在,在大辽河河口水中雌激素浓度为211.1-246.4 ng/L,主要的雌激素为雌酮（E1,45.2-52.6 ng/L）、己烯雌酚（DES,50.4-65.2 ng/L）和己烷雌酚（HES,19.2-23.7 ng/L）。鸡粪中雌激素的浓度为19.01-34.75μg/kg。E1（13.25-14.36μg/kg）为主要成分,占60%以上,其次是DES（1.57-2.03μg/kg）和HES（1.82-2.11μg/kg）,可能来源于饲料中的添加剂。该方法不仅可以用于环境样品的分析,还可以用于其他领域,有着广泛的应用范围。
王忠兴[3]（2019）在《食品中九种兽药残留免疫快速检测方法研究》文中研究指明近年来,食品安全问题频发,其中兽药残留问题是比较严重的一项食品安全问题,长期食用残留有抗生素、抗虫类兽药的食品,不仅会对人体健康造成危害,严重的甚至会导致细菌、寄生虫产生耐药性,威胁人类的生存。目前兽药的全球销售额在4000亿元左右,而我国作为兽药使用大国必须要加强对动物源性食品中兽药残留的监管。相较于仪器检测方法,免疫检测技术具有快速、高效、低成本、高通量以及高灵敏等优点,更加适用于对大批量样本的初筛。本研究以雌酮、雌二醇、雌三醇、地塞米松、氢化可的松、地克珠利、妥曲珠利、三氯苯达唑以及抗菌增效剂类药物等为研究对象,从半抗原的设计及修饰,免疫原的合成入手,经过小鼠免疫,细胞融合,细胞培养,腹水制备以及抗体纯化等过程,制备出针对各个药物的高灵敏以及高亲和力的单克隆抗体,并基于此抗体开发出相应的免疫快速检测方法。（1）根据各个雌激素（雌酮、雌二醇和雌三醇）的化学结构式,设计合成了能够在机体内暴露其特征性基团的完全抗原,并制备出针对各个雌激素药物特异性的单克隆抗体。所获的E1、E2和E3抗体的亚型为IgG2b,IgG2b以及IgG3,亲和力常数分别为8.23?109,6.68?109以及9.44?109,IC50分别为0.46 ng/mL,0.36 ng/mL以及0.39 ng/mL,各个抗体对其他激素类药物无交叉反应。通过优化工作点以及ic-ELISA工作液,成功建立了检测E1、E2和E3的ic-ELISA方法。Ic-ELISA对E1检测范围为0.111.96 ng/mL,牛奶样品中的添加回收率为81.087.9%;对E2检测范围为0.121.07 ng/mL,牛奶样品中的添加回收率为86.899.0%;对E3检测范围为0.082.03 ng/mL,牛奶样品中的添加回收率为87.093.0%。通过优化金标抗体的合成,试纸条抗原及金标抗体的用量等条件,建立了E1、E2和E3的胶体金免疫层析试纸条定性方法,该方法对牛奶中E1、E2和E3的消线值均为5ng/mL。（2）通过亲核取代的方法合成了DEX和HDS的半抗原,并通过活化酯法合成了两个药物的免疫原,成功制备出针对DEX和HDS的单克隆抗体。所获的DEX和HDS抗体的亚型分别为IgG2b和IgG2a,亲和力常数分别为6.34?109和5.72?109,IC50均为0.095 ng/mL,DEX抗体对倍他米松的交叉反应率为5.1%,HDS抗体对氟氢可的松的交叉反应率为4.7%,对其他类药物的交叉反应率都小于2%。通过优化工作点以及ic-ELISA工作液,成功建立了检测DEX和HDS的ic-ELISA方法,对DEX检测范围为0.0340.265 ng/mL,牛奶样品中的添加回收率为92.4102.8%;对HDS的检测范围为0.0290.301 ng/mL,牛奶样品中的添加回收率为92.098.5%。通过优化金标抗体的合成,试纸条抗原及金标抗体的用量等条件,建立了DEX和HDS的胶体金免疫层析试纸条定性检测方法,该方法对牛奶中DEX和HDS的消线值分别为0.5 ng/mL和2 ng/mL。（3）成功设计和合成了地克珠利、妥曲珠利以及三氯苯达唑三种抗寄生虫类兽药的半抗原和完全抗原,并成功制备出这几种药的抗体。所获的抗DIC、TOL以及TCD抗体的亚型分别为IgG2a,IgG1以及IgG2a,亲和力常数分别为2.24?1010,8.68?109以及5.46?109,IC50分别为0.36 ng/mL,2.19 ng/mL以及1.49 ng/mL,各个抗体只针对原药及其代谢物有交叉反应,对其他类抗寄生虫药无交叉。通过优化工作点以及ic-ELISA工作液,成功建立了检测DIC、TOL以及TCD的ic-ELISA方法,其对这三种药物的检测范围分别为0.121.07 ng/mL,0.568.57 ng/mL以及0.375.91 ng/mL。添加回收试验显示,对鸡肉中DIC的添加回收率为97.4107.8%,对鸡肉中TOL的添加回收率为94.9102.4%,对牛肉中TCD的添加回收率为99.1101.4%。通过优化金标抗体的合成,试纸条抗原及金标抗体的用量,金标抗体重悬液,孵育时间等条件,借助于手持试纸条扫描仪,建立了DIC、TOL以及TCD的胶体金免疫层析试纸条定量方法,该方法对鸡肉中DIC的检测限为1.08μg/kg,添加回收率为96.96%110.21%;对鸡蛋和鸡肉中TOL-SO2的检测限分别为1.19和0.78μg/kg,添加回收率分别为90.6%96.6%和87.1%89.4%;对鸡肉中TCD及其代谢物的检测限在0.11μg/kg到0.47μg/kg之间,回收率为92.0%107.3%。（4）以TMP、DVD、OMP和BQP的母核结构为基础,合成了抗菌增效剂类药物的半抗原,并通过免疫小鼠成功获得了群选性抗菌增效剂类药物抗体,该抗体的亚型为IgG2b,亲和力常数为5.46?1010,对TMP、DVD、OMP和BQP的IC50分别为0.09ng/mL,0.12 ng/mL,0.21 ng/mL以及0.25 ng/mL。通过优化工作点以及ic-ELISA工作液,成功建立了可同时检测TMP、DVD、OMP和BQP的ic-ELISA方法。Ic-ELISA对这四种抗菌增效剂类兽药的检测范围为0.0250.739 ng/mL,牛肉样品的添加回收实验显示ic-ELISA对TMP、DVD、OMP和BQP的回收率为95.7%101.8%。通过优化金标抗体的合成,试纸条抗原及金标抗体的用量等条件,建立了同时检测TMP、DVD、OMP和BQP的胶体金免疫层析试纸条定性方法,该方法对牛肉中TMP、DVD、OMP和BQP的消线值分别为0.25,0.5,1和1μg/kg。（5）本研究开发了一种基于金纳米粒子的多重免疫层析试纸条方法,该试纸条包含三条检测线,可同时检测牛奶样品中的17种激素类药物,这些激素可分为3类:NR及其类似物,DEX及其类似物以及HES及其类似物。通过优化multi-ICS方法中包被抗原的浓度、金标抗体的用量以及金标重悬液的组分及含量,在最优条件下,组装了multi-ICS。成功将multi-ICS方法应用于牛奶中多种激素的同时定性检测,对17种激素类物质最低消线值可达1 ng/mL。借助于手持试纸条扫描仪以及标准抑制曲线,可实现对17种激素的定量检测。Multi-ICS对NR及其代谢物的检测限为0.064.85 ng/mL;对DEX及其类似物的检测限为0.0052.85 ng/mL;对HES及其类似物的检测限为0.032.14ng/mL。实际样品的添加回收率在78.8%到99.4%之间,满足真实样本检测要求。
段宏[4]（2019）在《量子点荧光微球在免疫层析方法中的应用研究》文中进行了进一步梳理免疫层析技术具有简单快速、操作容易、成本低廉、结果肉眼可见等优势,在医学检测、食品安全与环境监测等领域被广泛应用。然而传统的免疫层析方法因检测灵敏度不高,在某些微量或痕量分析物残留检测方面仍存在较大的缺陷,导致无法满足各领域内日益增长的检测要求。提高免疫层析方法的检测灵敏度已成为急需解决的瓶颈问题。与传统胶体金相比,荧光标记物因具有更高的信号强度从而能显着提高检测灵敏度。量子点因具有发光强度高、激发光谱宽、发射光谱窄等优点,近年来被广泛应用于构建高灵敏和多元免疫层析方法。将大量量子点包裹进聚合物微球中,可使得量子点发光强度和稳定性均大大提升。因此,量子点荧光微球作为免疫层析技术的探针,具有广阔的应用前景。本论文围绕量子点荧光微球在免疫层析方法中的应用研究进行了如下工作:（1）利用超声乳化-乳液溶剂挥发法将大量CdSe/ZnS量子点包裹进聚合物,简便高效地制备了量子点荧光微球。所得微球具有单分散性好,表面有丰富羧基,内部量子点载量大且发光强度高,荧光稳定性好等优点。此外,通过改变乳化过程中超声功率、表面活性剂用量、油相溶剂用量等参数实现了微球粒径在60～600nm范围内的可控制备。大粒径的微球可包裹更多量子点,因此量子点微球发光强度随着粒径增大而迅速增强。（2）以255 nm量子点荧光微球为免疫标记物制备荧光探针,分别应用于竞争与夹心型免疫层析方法以实现ZEN与pf的定量检测。在最优条件下,分别获得了定量检测ZEN和pf的标准曲线。通过计算其最低检出限,表明量子点荧光微球免疫层析方法实现了ZEN与pf的高灵敏检测,灵敏度较常规胶体金免疫层析方法提高了6倍和17倍。通过基质加标样品和实际样品的检测,结果表明所构建的免疫层析方法对实际样本检测均具有较好的准确性、可重复性（变异系数小于10%）和可靠性（检测结果与LC-MS/MS及临床检测结果具有较好相关性）。（3）因荧光微球发光强度随着微球粒径增加而增强。从理论上分析,微球粒径是影响荧光微球免疫层析方法检测性能的重要因素。因此本文制备了系列不同粒径的量子点荧光微球,并分别以OTA与HBs Ag为模式分析物,阐明量子点微球粒径对竞争和夹心型免疫层析方法灵敏度的影响。结果表明适当增大量子点微球粒径可以提高竞争型免疫层析试纸条的检测灵敏度,但过大的粒径会产生严重的空间位阻效应反而降低其检测灵敏度。在本研究中,中等大小粒径（124 nm）的量子点微球在竞争型免疫层析方法中展现了最高的检测灵敏度。由于NC膜孔径能影响纳米探针的涌动速率进而影响免疫反应效率,因此在针对HBsAg的夹心免疫分析方法中,本研究同时探讨了量子点微球粒径与NC膜孔径对试纸条检测灵敏度的影响。结果表明,使用中等粒径即235nm的微球为探针,NC膜型号为CN95（孔径15μm）,试纸条检测HBsAg的灵敏度最佳,较胶体金免疫层析试纸条提高了20倍。该荧光试纸条在HBsAg实际样本检测中展现了比商业化胶体金免疫层析技术更高的准确性,90个实际样本检测准确率达到100%。（4）通过简单调节量子点微球中黄色量子点(QD575)与红色量子点(QD615)比例,制备了不同荧光颜色的量子点微球。将其作为检测探针,构建了多色荧光免疫层析试纸条检测玉米中的ZEN,OTA与FB1。结果表明,该多色荧光试纸条可在15 min内通过肉眼可视判读ZEN,OTA与FB1的检测结果,且不同待检物的检测结果可通过区分T线上不同荧光颜色与强度进行判断。该方法对ZEN,OTA与FB1的肉眼可视检测灵敏度为10 ng/mL,5 ng/m L和20 ng/mL,并在实际样本检测中展现了良好的特异性和可靠性（检测结果与UPLC-FLD方法具有较好的一致性）。综上所述,本研究得到了如下一些新颖的研究结果:1)采用超声乳化-乳液溶剂挥发法实现了量子点荧光微球在60～600nm范围内的可控制备。所得微球粒径均一且发光强度高,可做为一种优良的免疫标记物;将其应用于免疫层析方法中,我们实现了ZEN与pf的高灵敏检测,灵敏度较常规免疫层析技术分别提高了6倍和17倍。2)首次探讨了免疫层析方法的尺寸效应与试纸条检测灵敏度的关系,得出竞争和夹心型量子点荧光微球免疫层析技术中最佳探针粒径为124nm和235nm。研究结果为荧光免疫层析方法标记探针的选择提供了一定的理论指导。3)通过简单调节量子点微球中几种不同发射波长量子点的比例,成功制备了不同荧光颜色的量子点微球,并构建了多重免疫层析方法,实现了玉米中多种真菌毒素可视化检测。研究结果为多重免疫层析技术平台的发展提供了一定的借鉴。
莫紫梅,宁芯,陈宁周,林丹[5]（2019）在《QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速检测鸡鸭肉中己烯雌酚残留》文中研究表明建立鸡鸭肉中己烯雌酚（diethylstilbestrol,DES）残留的QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱测定方法。均质样品用水分散后加入乙腈提取,经分散固相萃取净化后,采用XBridge Phenyl-C18色谱柱（150 mm×2.1 mm,3.5μm）分离,在电喷雾电离负离子模式下以多反应监测方式检测,流动相为水-乙腈。结果表明:DES在质量浓度0.50～20.00 ng/mL范围内线性良好,相关系数为0.999 9;3个加标水平的平均回收率为70.4%～81.6%,相对标准偏差为3.1%～3.9%;检出限和定量限分别为0.1、0.4μg/kg。
张瑞凌,许亦真,刘建萍,李福伟,张冲[6]（2019）在《酶联免疫法测定水产品中己烯雌酚残留量》文中研究说明采用酶联免疫法测定水产品中残留己烯雌酚的含量,并采用液相色谱-质谱联用法验证阳性结果。实验结果表明,该方法对水产品中己烯雌酚的检出限为0.35μg/kg,回收率达77%～91%,具有良好的灵敏度和准确度。
冒玉娟,王婧,刘佳敏,张盼盼[7]（2019）在《己烯雌酚残留检测研究进展》文中研究表明己烯雌酚是人工合成雌激素中作用最强的一种,曾一度作为促生长剂应用于畜牧养殖业。研究发现,其在动物性产品中的残留对人体健康和生态环境都会造成严重危害。阐述了己烯雌酚的残留特点及其危害,重点对其残留检测方法的研究进展进行了综述。
张昵昵[8]（2019）在《中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立》文中研究表明中药饲料添加剂因其能提高动物生产性能、无污染、无残留等优势,近年来在养殖业中被广泛应用。但调查发现,市场上销售的中药饲料添加剂有时会非法添加化学物质。本研究根据近年来国内中药饲料添加剂的非法添加情况,选取催情散、保胎无忧散、健胃散、降脂增蛋散共4种中药饲料添加剂,对其中可能添加的雌二醇等7种非法添加物,采用高效液相色谱（HPLC）法在相同的条件下进行检测。检测方法建立如:（1）色谱条件采用C18色谱柱（250 mm*4.6 mm,5 μm）,梯度洗脱流动相A:水,流动相B:乙腈,柱温40℃,检测波长为230nm,流速为1.0 min。采用该HPLC条件,对7种化学成分进行专属性、线性关系、检测限和定量限、精密度以及添加回收试验的测定。（2）方法验证性试验在上述色谱条件下,7种化学物质能够被分离,且都为单一物质峰,呋喃西林、呋喃妥因、硝呋酚酰肼、雌三醇、雌二醇、雌酮、双烯雌酚的出峰保留时间依次为:6.853 min、10.170 min、15.770 min、16.097 min、20.455 min、22.263 min、23.043 min;所检测的成分线性关系良好（r>0.9992）;7种化学成分在不同样品中的平均加样回收率和相对标准差（RSD）分别为:100.5%-103.04%、3.6%-4.8%;100.7%-102.4%、1.7%-2.6%;103.3%-104.6%、1.5%-2.3%;101.3%-%-102.9%、1.7%-2.7%;精密度、稳定性、重复性考察也符合分析要求。结论:本研究成功建立了同时检测4种中药饲料添加剂中非法添加7种化学物质的HPLC方法。该方法可在相同色谱条件下同时检测多种化学物质,与已有的检测方法相比,简化了检测程序,且精密度和稳定性良好。
庄姗姗[9]（2019）在《福建省主要饮用水源水中兽药复合污染特征及初步风险评价研究》文中进行了进一步梳理随着我国人口的增加和生活水平的提高,禽畜水产等动物性食品的消费量越来越大,集约化养殖的规模也不断扩大,兽药的种类、生产量和使用量随之大增。兽药使用后会以多种形式、通过多种途径进入水环境,而河流、湖泊、水库等地表水往往是城市饮用水源,因此,研究兽药在饮用水源水中的残留及其风险评价具有重要意义。本研究以25类137种兽药为目标物,建立其在饮用水源水中灵敏、可靠的同时分析方法,应用于福建省主要水源（九龙江、晋江、闽江）水中兽药监测,了解复合污染特征,并进行初步安全风险评价。主要研究结果如下:1.137种兽药的SPE-LC-MS/MS分析方法采用LC-MS/MS技术,在ESI电离和MRM采集模式下,通过优化母离子、子离子、碰撞能等质谱参数以及洗脱程序、定容溶剂等色谱条件,确立了 137种兽药的LC-MS/MS分组同时测定方法。目标兽药在设定的浓度范围内线性关系良好,R2≥0.9910,仪器检出限在0.001 μg/L-5 μg/L之间,满足目标兽药检测的灵敏度要求。通过优化针式滤膜、SPE洗脱和淋洗溶剂、水样pH值以及Na2EDTA加入量等条件,建立了饮用水源水中137种目标兽药同时分析的前处理方法,并比较了外标法、同位素替代物法和基质匹配法的定量效果。在5 ng/L、20 ng/L和100 ng/L三个加标浓度下,各有87.6%、92.7%和94.2%的目标物回收率在40%-130%之间,对应相对标准偏差（n=4）分别为0.2%-26.5%、0.8%-27.6%和0.3%-23.6%;仅阿苯哒唑、螺旋霉素、雌三醇、氯舒隆、安乃近等少数目标兽药回收率偏低。97.8%目标兽药的方法检测限在0.01-3.0 ng/L,定量限在0.05-10.0 ng/L,充分满足饮用水源水中多种类痕量兽药的检测要求。2.福建省主要饮用水源水中兽药复合污染特征研究分别于2018年5、10、11月采集了九龙江北溪、晋江和闽江水系共计55个站位的表层水样,运用上述建立的分析方法,进行了137种目标兽药的监测。结果显示:九龙江北溪、晋江、闽江饮用水源水中兽药检出种类和各站位检出浓度范围分别为12类32种（4.9-1595.0 ng/L）、9类24种（61.6-274.0 ng/L）和12类26种（135.7-797.2 ng/L）。整体上,氯霉素类、磺胺类、大环内酯类、抗虫药类和金刚烷胺为三大水系中的主要检出类别;其中,磺胺甲恶唑、金刚烷胺和氟甲砜霉素是九龙江水系的主要污染物,金刚烷胺、金霉素和氨丙啉是晋江水系的主要污染物,盐霉素、磺胺甲恶唑和氟甲砜霉素是闽江水系的主要污染物。3.九龙江、晋江和闽江水域中兽药污染的水质安全和生态风险评价受限于标准限值的缺失,暂时无法对饮用水源水中检出的兽药残留进行水质安全评价。利用风险商值法对九龙江、晋江和闽江水系的兽药残留进行了水生生态风险评价。结果表明:磺胺类、大环内酯类和喹诺酮类对九龙江具有较高的生态风险,喹诺酮类、大环内酯类、磺胺类和四环素类对晋江具有较高的生态风险,磺胺类、大环内酯类和四环素类对闽江具有较高的生态风险。磺胺类的磺胺甲恶唑、磺胺嘧啶和大环内酯类的红霉素、林可霉素为三大水系的主要风险贡献者。本研究结果为水中多种类兽药的分析监测提供了技术手段的参考,为风险评价和兽药管理提供了科学数据
刘小凤[10]（2018）在《LC-QqTOF-MS法检测猪饲料与肌肉中多类兽药残留研究》文中研究说明随着人民对动物源食品安全的关注,国内外现已禁止许多兽药在养殖业的应用,对于饲料中添加的兽药和临床上使用的兽药都制定了最大残留限量（MRLs）和休药期。但是目前,仍存在兽药在饲料中违法添加、治疗动物疾病时不合理用药和标签外用药等行为,给兽药管理部门的监控带来一定难度。因此,建立一种同时对多类兽药残留的快速筛选方法是非常必要的。目前,国内外采用LC-MS/MS检测兽药残留的方法较多,检测猪饲料和猪肌肉的多类多残留LC-QqTOF-MS法还不具有普遍性。因此,本论文用LC-QqTOF-MS法研究多类兽药在猪饲料和猪肌肉中的检测方法,快速筛选出猪饲料和猪肌肉中的兽药残留。为猪饲料和猪肌肉中的多残留检测提供技术支持,提高多残留领域的检测能力和水平,从而保证消费者的安全。1.猪肌肉中兽药多类多残留的LC-QqTOF-MS方法研究选取26种不同种类的兽药添加到猪肌肉中,采用QuEChERS方法前处理,即正己烷饱和乙腈-酸水进行提取,无水硫酸钠、C18净化。考察了该方法的特异性、LOD、LOQ、回收率、精密度、基质效应,发现0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml兽药回收率在50%以上的占80.77%、84.62%、80.77%,标准曲线R2≥0.95的化合物占84.62%。0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml兽药基质效应在80%-120%范围内的占53.85%、53.85%、42.31%,猪肌肉中LOQ为0.02μg/ml-0.66μg/ml,LOD为0.006μg/ml-0.2μg/ml,90%的化合物重复性日内和日间相对标准偏差<20%,可应用到猪肌肉多类兽药残留分析快速筛查与确证。进一步通过手动分析和自动分析（数据库匹配）的比较,标准品添加,发现标准品存在的化合物手动分析上的有32种,自动分析上的有34种,存在假阳性和假阴性结果,假阳性13个,假阴性3个。用该方法进行50份猪肌肉样品临床检测,快速筛查出45种疑似化合物,4种疑似维生素,41种疑似兽药。2.猪饲料中兽药多类多残留LC-QqTOF-MS方法研究选取32种不同种类的兽药添加到猪饲料中,采用1%甲酸乙腈提取,十倍体积的水稀释,由LC-QqTOF-MS进行样品分析。考察了该方法的特异性、LOD、LOQ、回收率、精密度、基质效应,发现在三个不同的添加水平（0.2μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml）下,回收率50%以上的分别占77.42%,77.42%,70.97%,三个添加水平下绝大部分兽药基质效应均在80%-120%范围内,标准曲线R2≥0.99。方法重复性除2种兽药高于20%外,其余均在20%以下。LOQ为0.02μg/ml-0.66μg/ml,LOD为0.006μg/ml-0.2μg/ml,可应用到猪饲料多类兽药残留分析快速筛查与确证。该方法被应用到四家饲料公司且不同发育时期饲料样品,共60份饲料样品的筛查中,快速筛查出13种疑似化合物。
二、LC-MS分析饲料中的己烯雌酚（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、LC-MS分析饲料中的己烯雌酚（论文提纲范文）
（1）典型双酚类化合物在鸡蛋和蛋鸡体内代谢转化规律研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 环境内分泌干扰物(EDCs)概述 |
| 1.1.1 EDCs定义 |
| 1.1.2 EDCs类别 |
| 1.1.3 EDCs暴露 |
| 1.1.4 EDCs危害 |
| 1.1.5 EDCs作用机制 |
| 1.2 双酚类EDCs概述 |
| 1.2.1 双酚类EDCs相关法律法规规定 |
| 1.2.2 双酚类EDCs理化性质 |
| 1.2.3 双酚类EDCs暴露 |
| 1.2.4 双酚类EDCs毒性作用 |
| 1.2.5 双酚类EDCs检测技术 |
| 1.2.6 双酚类EDCs代谢 |
| 1.3 本论文研究内容 |
| 1.3.1 研究背景及意义 |
| 1.3.2 研究内容 |
| 第二章 饲料及畜产品中双酚类化合物检测方法建立及暴露评估 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 基质添加标准曲线 |
| 2.2.2 方法的检出限(LODs)和定量限(LOQs) |
| 2.2.3 方法的选择性 |
| 2.2.4 准确度、精密度和重现性 |
| 2.2.5 实际样品测定 |
| 2.2.6 人体通过动物源性食品摄入双酚类EDCs暴露评估 |
| 2.3 讨论 |
| 2.3.1 质谱条件优化 |
| 2.3.2 色谱条件优化 |
| 2.3.3 直接提取法条件优化 |
| 2.3.4 超声探针辅助酶解(EPS)条件优化 |
| 2.3.5 双酚类EDCs检测结果比较 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 典型双酚类化合物BPF在鸡蛋和蛋鸡体内迁移转化规律研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 蛋鸡暴露试验方法 |
| 3.1.2 样品测定 |
| 3.1.3 统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 饲料和饲料原料中常规营养成分及BPF本底测定结果 |
| 3.2.2 混合均匀度测定 |
| 3.2.3 BPF暴露对蛋鸡生产性能的影响 |
| 3.2.4 BPF在鸡蛋中的分布规律 |
| 3.2.5 BPF在蛋鸡血液中的代谢规律 |
| 3.2.6 BPF在蛋鸡肝脏中的代谢规律 |
| 3.2.7 BPF在蛋鸡肌肉中的代谢规律 |
| 3.2.8 Carry-over和Transfer factor |
| 3.3 讨论 |
| 3.3.1 结合态BPF占总BPF的比例 |
| 3.3.2 BPF对蛋鸡生产性能的影响及其内分泌干扰作用机制 |
| 3.3.3 Carry-over rates和transfer factors |
| 3.4 小结 |
| 第四章 典型双酚类化合物BPF在蛋鸡体内外代谢比较研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.1.3 UPLC-HRMS测定 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 鸡肝微粒体蛋白浓度测定结果 |
| 4.2.2 鸡肝微粒体细胞色素P450酶活力测定结果 |
| 4.2.3 UPLC-HRMS质量控制 |
| 4.2.4 BPF裂解途径解析 |
| 4.2.5 BPF在鸡肝微粒体中的I相代谢产物 |
| 4.2.6 BPF在蛋鸡体内的II相代谢产物 |
| 4.3 讨论 |
| 4.3.1 药物体内外代谢研究方法 |
| 4.3.2 UPLC-HRMS非靶向筛查技术 |
| 4.3.3 样品前处理和仪器条件优化 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 结论 |
| 5.1 研究总结 |
| 5.2 创新点 |
| 5.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（2）多重丹磺酰氯固相标记结合LC-MS分析环境雌激素（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 1 选题背景、目的和意义 |
| 1.1 环境雌激素的介绍 |
| 1.2 环境雌激素的危害 |
| 1.3 雌激素检测技术国内外研究现状 |
| 1.4 研究内容与目的 |
| 2 标记试剂、磁性材料的合成和实验条件优化 |
| 2.1 同位素标记试剂的合成 |
| 2.1.1 引言 |
| 2.1.2 实验试剂和仪器 |
| 2.1.3 丹磺酰氯的合成 |
| 2.1.4 结果与讨论 |
| 2.2 磁化材料的合成 |
| 2.2.1 引言 |
| 2.2.2 实验试剂与设备 |
| 2.2.3 溶剂热法磁化材料 |
| 2.2.4 材料的表征 |
| 2.2.5 结果与讨论 |
| 2.3 实验条件优化 |
| 2.3.1 实验试剂及设备 |
| 2.3.2 HPLC-HRMS条件 |
| 2.3.3 雌激素标记实验 |
| 2.3.4 标记条件优化 |
| 2.3.5 磁性固相萃取条件优化 |
| 2.3.6 结果与讨论 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 多重标记结合磁性固相萃取分析方法的建立 |
| 3.1 样品采集 |
| 3.1.1 样品采集与预处理 |
| 3.1.2 HPLC仪器条件 |
| 3.2 方法验证 |
| 3.2.1 空白样品的准备 |
| 3.2.2 HPLC-HRMS仪器条件 |
| 3.2.3 多重标记相对响应值 |
| 3.2.4 方法的准确性 |
| 3.2.5 方法的回收率与精密度 |
| 3.2.6 方法的线性定量范围 |
| 3.2.7 方法的检测限和定量限 |
| 3.3 在实际样品中的雌激素分析 |
| 3.3.1 多重标记结合磁性固相萃取处理实际样品 |
| 3.3.2 在大辽河河口水中的雌激素分析 |
| 3.3.3 在鸡粪中的雌激素分析 |
| 3.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 |
| 致谢 |
（3）食品中九种兽药残留免疫快速检测方法研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 立题背景 |
| 1.2 激素类兽药概述 |
| 1.2.1 雌激素 |
| 1.2.2 糖皮质激素 |
| 1.3 激素类兽药残留检测 |
| 1.3.1 仪器检测方法 |
| 1.3.2 免疫检测方法 |
| 1.4 抗寄生虫类药物概述 |
| 1.4.1 理化性质 |
| 1.4.2 生理作用 |
| 1.4.3 限量标准 |
| 1.5 抗寄生虫类药物残留检测 |
| 1.5.1 仪器检测方法 |
| 1.5.2 免疫检测方法 |
| 1.6 抗菌增效剂类药物概述 |
| 1.6.1 理化性质 |
| 1.6.2 生理作用 |
| 1.6.3 限量要求 |
| 1.7 抗菌增效剂类药物残留检测 |
| 1.8 立题依据和主要研究内容 |
| 1.8.1 本课题的意义及研究目的 |
| 1.8.2 本课题的主要研究内容 |
| 第二章 半抗原的设计、修饰及完全抗原的合成 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 仪器与试剂 |
| 2.2.1 实验仪器与设备 |
| 2.2.2 实验试剂与材料 |
| 2.3 试验方法 |
| 2.3.1 雌激素半抗原的合成 |
| 2.3.2 糖皮质激素半抗原的合成 |
| 2.3.3 抗寄生虫类药物半抗原的合成 |
| 2.3.4 抗菌增效剂药物半抗原的合成 |
| 2.3.5 完全抗原的合成与结果表征 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 半抗原的设计 |
| 2.4.2 雌激素半抗原的鉴定 |
| 2.4.3 糖皮质类激素半抗原的鉴定 |
| 2.4.4 抗寄生虫类兽药半抗原的鉴定 |
| 2.4.5 抗菌增效剂类兽药半抗原的鉴定 |
| 2.4.6 完全抗原的表征 |
| 2.5 本章小结 |
| 第三章 单克隆抗体的制备与表征 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 仪器与试剂 |
| 3.2.1 实验仪器与设备 |
| 3.2.2 实验试剂与材料 |
| 3.2.3 实验溶液配制 |
| 3.2.4 实验动物和细胞 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 小鼠免疫 |
| 3.3.2 阳性小鼠筛选 |
| 3.3.3 细胞融合 |
| 3.3.4 杂交瘤细胞株的筛选 |
| 3.3.5 单克隆抗体纯化 |
| 3.3.6 单克隆抗体的鉴定 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 小鼠的抗血清的检测 |
| 3.4.2 杂交瘤细胞的筛选 |
| 3.4.3 单克隆抗体亚型的鉴定 |
| 3.4.4 单克隆抗体交叉反应率的测定 |
| 3.4.5 单克隆抗体亲和力的测定 |
| 3.5 本章小结 |
| 第四章 间接竞争酶联免疫吸附法用于食品中兽药残留的检测 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 仪器与试剂 |
| 4.2.1 实验仪器与设备 |
| 4.2.2 实验试剂与材料 |
| 4.3 试验方法 |
| 4.3.1 ic-ELISA工作点的选择 |
| 4.3.2 ic-ELISA工作液pH的优化 |
| 4.3.3 ic-ELISA工作液离子强度的优化 |
| 4.3.4 ic-ELISA工作液有机溶剂含量的优化 |
| 4.3.5 样品前处理 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 ic-ELISA工作点的确定 |
| 4.4.2 ic-ELISA工作液的优化 |
| 4.4.3 ic-ELISA标准抑制曲线的建立 |
| 4.4.4 实际样本添加回收实验 |
| 4.5 本章小结 |
| 第五章 免疫层析方法用于食品中激素类兽药的定性检测 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 仪器与试剂 |
| 5.2.1 实验仪器与设备 |
| 5.2.2 实验试剂与材料 |
| 5.2.3 实验溶液配制 |
| 5.3 试验方法 |
| 5.3.1 金纳米粒子的合成 |
| 5.3.2 金标抗体的合成 |
| 5.3.3 免疫层析试纸条的组装 |
| 5.3.4 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 5.3.5 免疫层析试纸条包被抗原及金标抗体使用量的优化 |
| 5.3.6 免疫层析试纸条的使用及原理 |
| 5.3.7 实际样本的检测 |
| 5.4 结果与讨论 |
| 5.4.1 金纳米粒子的表征 |
| 5.4.2 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 5.4.3 包被抗原浓度及金标抗体使用量的优化 |
| 5.4.4 牛奶中激素类药物的检测 |
| 5.5 本章小结 |
| 第六章 免疫层析方法用于食品中抗菌增效剂类兽药多残留检测 |
| 6.1 引言 |
| 6.2 仪器与试剂 |
| 6.2.1 实验仪器与设备 |
| 6.2.2 实验试剂与材料 |
| 6.2.3 实验溶液配制 |
| 6.3 试验方法 |
| 6.3.1 金纳米粒子的合成 |
| 6.3.2 金标抗体的合成 |
| 6.3.3 免疫层析试纸条的组装 |
| 6.3.4 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 6.3.5 免疫层析试纸条包被抗原及金标抗体使用量的优化 |
| 6.3.6 免疫层析试纸条的使用及原理 |
| 6.3.7 实际样本的检测 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 6.4.2 包被抗原浓度及金标抗体使用量的优化 |
| 6.4.3 鸡肉中抗菌增效剂类兽药的检测 |
| 6.5 本章小结 |
| 第七章 免疫层析方法用于食品中抗寄生虫类兽药的定量检测 |
| 7.1 引言 |
| 7.2 仪器与试剂 |
| 7.2.1 实验仪器与设备 |
| 7.2.2 实验试剂与材料 |
| 7.2.3 实验溶液配制 |
| 7.3 试验方法 |
| 7.3.1 金纳米粒子的合成 |
| 7.3.2 金标抗体的合成 |
| 7.3.3 免疫层析试纸条的组装 |
| 7.3.4 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 7.3.5 免疫层析试纸条包被抗原及金标抗体使用量的优化 |
| 7.3.6 金标抗体重悬液的优化 |
| 7.3.7 试纸条孵育时间的优化 |
| 7.3.8 免疫层析试纸条的使用及原理 |
| 7.3.9 实际样本的检测 |
| 7.4 结果与讨论 |
| 7.4.1 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 7.4.2 包被抗原浓度及金标抗体使用量的优化 |
| 7.4.3 金标抗体重悬液的优化 |
| 7.4.4 试纸条孵育时间的优化 |
| 7.4.5 动物源性食品中抗寄生虫类兽药的定性检测 |
| 7.4.6 胶体金免疫层析试纸条标准曲线的建立 |
| 7.4.7 动物源性食品中抗寄生虫类兽药的定量检测 |
| 7.5 本章小结 |
| 第八章 多重定量免疫层析试纸条检测食品中17种激素类药物残留 |
| 8.1 引言 |
| 8.2 仪器与试剂 |
| 8.2.1 实验仪器与设备 |
| 8.2.2 实验试剂与材料 |
| 8.2.3 实验溶液配制 |
| 8.3 试验方法 |
| 8.3.1 包被抗原的合成 |
| 8.3.2 金纳米粒子的合成 |
| 8.3.3 金标抗体的合成 |
| 8.3.4 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 8.3.5 Multi-ICS的组装 |
| 8.3.6 免疫层析试纸条包被抗原及金标抗体使用量的优化 |
| 8.3.7 金标抗体重悬液的优化 |
| 8.3.8 多重免疫层析试纸条的使用及原理 |
| 8.3.9 实际样本的检测 |
| 8.4 结果与讨论 |
| 8.4.1 包被抗原的表征 |
| 8.4.2 金纳米粒子标记抗体条件的优化 |
| 8.4.3 Multi-ICS T线包被抗原浓度及金标抗体使用量的优化 |
| 8.4.4 金标抗体重悬液的优化 |
| 8.4.5 牛奶中激素类药物的定性检测 |
| 8.4.6 Multi-ICS标准曲线的建立 |
| 8.4.7 Multi-ICS在实际样品中的应用 |
| 8.5 本章小结 |
| 主要结论 |
| 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 :作者在攻读博士学位期间发表的论文 |
（4）量子点荧光微球在免疫层析方法中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略语(Abbreviations) |
| 第1章 引言 |
| 1.1 免疫层析技术概述 |
| 1.1.1 免疫层析技术简介 |
| 1.1.2 免疫层析技术应用领域 |
| 1.1.3 免疫层析技术发展方向 |
| 1.1.4 提高免疫层析技术灵敏度的策略 |
| 1.1.5 免疫层析技术中标记材料 |
| 1.1.6 量子点微球 |
| 1.2 真菌毒素简介及其检测方法研究进展 |
| 1.2.1 玉米赤霉烯酮简介 |
| 1.2.2 赭曲霉毒素A简介 |
| 1.2.3 伏马菌素B_1简介 |
| 1.2.4 真菌毒素检测方法研究进展 |
| 1.3 疟疾简介及其检测方法的研究进展 |
| 1.3.1 疟疾简介 |
| 1.3.2 疟疾检测方法的研究进展 |
| 1.4 乙型肝炎简介及其检测方法的研究进展 |
| 1.4.1 乙型肝炎简介 |
| 1.4.2 乙型肝炎检测方法的研究进展 |
| 1.5 研究内容与意义 |
| 1.5.1 研究内容 |
| 1.5.2 研究意义 |
| 1.6 参考文献 |
| 第2章 基于高发光量子点微球的竞争型荧光免疫层析试纸条定量检测ZEN的方法学研究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料试剂与仪器设备 |
| 2.2.1 主要材料与试剂 |
| 2.2.2 主要仪器与设备 |
| 2.3 实验方法与步骤 |
| 2.3.1 量子点微球的制备与表征 |
| 2.3.2 QBs探针的制备与表征 |
| 2.3.3 量子点微球免疫层析试纸条的制备与组装 |
| 2.3.4 试纸条实验参数的优化 |
| 2.3.5 试纸条检测性能的评价 |
| 2.4 结果与讨论 |
| 2.4.1 量子点微球的制备与表征 |
| 2.4.2 QBs探针的制备与表征 |
| 2.4.3 试纸条制备参数优化 |
| 2.4.4 试纸条检测参数优化 |
| 2.4.5 ZEN量子点微球荧光试纸条定量标准曲线的构建 |
| 2.4.6 特异性评价 |
| 2.4.7 准确性及精密性分析 |
| 2.4.8 与ELSA方法和LC-MS/MC方法相关性评价 |
| 2.5 本章小结 |
| 2.6 参考文献 |
| 第3章 基于高发光量子点微球的夹心型荧光免疫层析试纸条定量检测pf的方法学研究 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 材料试剂与仪器设备 |
| 3.2.1 主要材料与试剂 |
| 3.2.2 主要仪器与设备 |
| 3.3 实验方法与步骤 |
| 3.3.1 量子点微球制备与表征 |
| 3.3.2 量子点微球探针的制备与表征 |
| 3.3.3 pf量子点微球荧光免疫层析试纸条的制备与组装 |
| 3.3.4 量子点微球荧光试纸条实验参数的优化 |
| 3.3.5 检测性能的评价 |
| 3.4 结果与讨论 |
| 3.4.1 量子点微球的表征 |
| 3.4.2 量子点微球探针的制备与表征 |
| 3.4.3 量子点微球荧光免疫层析试纸条的优化 |
| 3.4.4 pf量子点微球荧光试纸条定量标准曲线的建立 |
| 3.4.5 与胶体金试纸条方法学灵敏度对比 |
| 3.4.6 准确性与精密性评价 |
| 3.5 本章小结 |
| 3.6 参考文献 |
| 第4章 量子点微球粒径与荧光强度对竞争型免疫层析方法检测灵敏度的影响 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 材料试剂与仪器设备 |
| 4.2.1 主要材料与试剂 |
| 4.2.2 主要仪器与设备 |
| 4.3 实验方法与步骤 |
| 4.3.1 不同粒径量子点微球的制备与表征 |
| 4.3.2 不同粒径量子点微球探针的制备 |
| 4.3.3 量子点微球免疫层析试纸条的制备与组装 |
| 4.3.4 试纸条实验参数的优化 |
| 4.3.5 试纸条检测性能的评价 |
| 4.4 结果与讨论 |
| 4.4.1 量子点微球的制备与表征 |
| 4.4.2 试纸条制备参数优化 |
| 4.4.3 五种不同粒径免疫层析试纸条灵敏的比较 |
| 4.4.4 QB_(124)-ICA玉米样本中定量标准曲线的建立 |
| 4.4.5 特异性评价 |
| 4.4.6 准确性与精密性评价 |
| 4.4.7 与ELISA方法相关性评价 |
| 4.5 本章小结 |
| 4.6 参考文献 |
| 第5章 量子点微球粒径与NC膜孔径对夹心型免疫层析方法灵敏度影响 |
| 5.1 前言 |
| 5.2 材料试剂与仪器设备 |
| 5.2.1 主要材料与试剂 |
| 5.2.2 主要仪器与设备 |
| 5.3 实验方法与步骤 |
| 5.3.1 量子点荧光微球的制备与表征 |
| 5.3.2 不同粒径量子点微球探针的制备与表征 |
| 5.3.3 量子点微球免疫层析试纸条的制备与组装 |
| 5.3.4 试纸条检测性能评价 |
| 5.4 基于QB_(235)与CN95的c Tn I荧光免疫层析试纸条的构建 |
| 5.4.1 QB_(235)-抗c Tn I单克隆抗体探针的制备 |
| 5.4.2 cTnI荧光免疫层析试纸条的优化 |
| 5.4.3 cTnI荧光免疫层析试纸条评价 |
| 5.5 结果与讨论 |
| 5.5.1 量子点微球探针的制备与表征 |
| 5.5.2 不同粒径量子点微球饱和标记量的优化 |
| 5.5.3 不同孔径NC膜表征 |
| 5.5.4 不同粒径免疫层析试纸条灵敏度比较 |
| 5.5.5 乙肝实际样本检测 |
| 5.5.6 QB_(235)-抗cTnI单克隆抗体探针的制备 |
| 5.5.7 cTnI荧光免疫层析试纸条的优化 |
| 5.5.8 cTnI荧光免疫层析试纸条检测曲线的建立 |
| 5.5.9 准确性评价 |
| 5.6 本章小结 |
| 5.7 参考文献 |
| 第6章 多色荧光免疫层析试方法肉眼可视检测玉米中ZEN,OTA与 FB |
| 6.1 前言 |
| 6.2 材料试剂与仪器设备 |
| 6.2.1 主要材料与试剂 |
| 6.2.2 主要仪器与设备 |
| 6.3 实验方法与步骤 |
| 6.3.1 多色量子点微球的制备与表征 |
| 6.3.2 多色量子点微球探针的制备与表征 |
| 6.3.3 多色量子点微球免疫层析试纸条的制备与组装 |
| 6.3.4 试纸条实验参数的优化 |
| 6.3.5 试纸条检测性能的评价 |
| 6.4 结果与讨论 |
| 6.4.1 多色量子点表征 |
| 6.4.2 多色量子点微球表征 |
| 6.4.3 多色量子点微球胶体稳定性表征 |
| 6.4.4 多色量子点微球探针的制备与表征 |
| 6.4.5 试纸条实验参数的优化 |
| 6.4.6 最低灵敏度的确定 |
| 6.4.7 特异性评价 |
| 6.4.8 准确度评价 |
| 6.4.9 方法学比较 |
| 6.5 本章小结 |
| 6.6 参考文献 |
| 第7章 结论与展望 |
| 7.1 结论 |
| 7.1.1 基于高发光量子点微球的竞争型荧光免疫层析试纸条定量检测ZEN |
| 7.1.2 基于高发光量子点微球的夹心型荧光免疫层析试纸条定量检测pf |
| 7.1.3 量子点微球粒径与荧光强度对竞争型免疫层析方法检测灵敏度的影响 |
| 7.1.4 量子点微球粒径与NC膜孔径对夹心型免疫层析方法检测灵敏度的影响 |
| 7.1.5 基于多荧光色量子点微球的多重免疫层析试纸条可视化检测ZEN,OTA与FB_1的方法学研究 |
| 7.2 展望 |
| 致谢 |
| 附录1 仪器设备 |
| 附录2 试剂药品与材料 |
| 附录3 本文所用缓冲溶液的配制方案 |
| 个人介绍 |
| 攻读学位期间研究成果 |
（5）QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速检测鸡鸭肉中己烯雌酚残留（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料与试剂 |
| 1.2 仪器与设备 |
| 1.3 方法 |
| 1.3.1 溶液配制 |
| 1.3.1. 1 标准工作液的配制 |
| 1.3.1. 2 内标工作液的配制 |
| 1.3.1. 3 混合标准工作溶液的配制 |
| 1.3.1. 4 基质匹配混合标准工作溶液的配制 |
| 1.3.2 样品前处理 |
| 1.3.2. 1 样品提取 |
| 1.3.2. 2 样品净化 |
| 1.3.3 UPLC-MS/MS测定 |
| 1.3.3. 1 色谱条件 |
| 1.3.3. 2 质谱条件 |
| 1.3.3. 3 上机测定 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 样品前处理条件的优化 |
| 2.2 基质效应的消除 |
| 2.3 质谱条件的优化 |
| 2.4 色谱条件的优化 |
| 2.5 线性范围、方法检出限与定量限 |
| 2.6 回收率与精密度 |
| 2.7 实际样品分析 |
| 3 结论 |
（6）酶联免疫法测定水产品中己烯雌酚残留量（论文提纲范文）
| 1 实验材料和仪器 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 仪器工作参数 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 样品制备 |
| 2.2 检测方法 |
| 2.3 灵敏度实验 |
| 2.4 准确度实验 |
| 3 结果与讨论 |
| 3.1 灵敏度测定结果 |
| 3.2 准确度测定结果 |
| 3.3 假阴性率 |
| 3.4 假阳性率 |
| 4 结论 |
（7）己烯雌酚残留检测研究进展（论文提纲范文）
| 1 己烯雌酚的应用 |
| 2 己烯雌酚的残留特点 |
| 3 己烯雌酚的危害 |
| 4 己烯雌酚残留检测技术的研究进展 |
| 4.1 理化检测方法 |
| 4.1.1 气相色谱法 (gas chromatography, GC) : |
| 4.1.2 高效液相色谱法 (high performance liquid chromatography, HPLC) : |
| 4.1.3 气相色谱—质谱联用 (gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS) : |
| 4.1.4 液相色谱—质谱联用 (liquid chromatogra-phy-mass spectrometry, LC-MS) : |
| 4.2 免疫检测方法 |
| 4.2.1 放射免疫法 (radio-immunoassay, RIA) : |
| 4.2.2 酶联免疫吸附法 (enzyme-linked im-munosorbnent assay, ELISA) : |
| 4.2.3 免疫胶体金技术 (immune colloidal gold technique, GICT) : |
| 5 小结 |
（8）中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要缩略词 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 主要仪器 |
| 1.1.2 试剂 |
| 1.1.3 对照品 |
| 1.1.4 样品 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 溶液的制备 |
| 1.2.2 HPLC色谱条件的选择及方法考察 |
| 1.2.3 方法学考察 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 HPLC色谱条件的建立 |
| 2.1.1 确定洗脱程序 |
| 2.1.2 确定流速 |
| 2.1.3 确定检测波长 |
| 2.1.4 柱温的确定 |
| 2.2 方法学验证性试验结果 |
| 2.2.1 专属性试验结果 |
| 2.2.2 样品本底及干扰试验结果 |
| 2.2.3 阳性样品测定试验结果 |
| 2.2.4 线性关系与范围试验结果 |
| 2.2.5 检测限与定量限试验结果 |
| 2.2.6 日内精密度试验结果 |
| 2.2.7 日间精密度试验结果 |
| 2.2.8 稳定性试验结果 |
| 2.2.9 重复性试验结果 |
| 2.2.10 方法回收率试验结果 |
| 3 讨论 |
| 3.1 色谱柱的选择 |
| 3.2 流动相的选择 |
| 3.3 洗脱方式的选择 |
| 3.4 流速的选择 |
| 3.5 检测波长的选择 |
| 3.6 柱温的选择 |
| 3.7 样品前处理提取方法 |
| 3.8 影响HPLC方法检测数据的因素 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）福建省主要饮用水源水中兽药复合污染特征及初步风险评价研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 兽药的发展、生产与使用情况 |
| 1.2.1 兽药的发展与类别 |
| 1.2.2 兽药的生产和使用 |
| 1.3 兽药进入水环境的主要途径和危害 |
| 1.3.1 兽药进入水环境的途径及归宿 |
| 1.3.2 水环境中兽药残留的危害 |
| 1.4 水环境中兽药多残留分析方法的研究进展 |
| 1.4.1 常见兽药多残留同时检测技术 |
| 1.4.2 多种类兽药同时分析的前处理方法 |
| 1.4.3 定量方法 |
| 1.5 饮用水源水中兽药复合污染的研究进展 |
| 1.6 饮用水源水中兽药污染的相关标准 |
| 1.7 兽药的安全和水生生态风险评价 |
| 1.8 课题的提出、研究内容和技术路线 |
| 1.8.1 课题的提出 |
| 1.8.2 研究内容和技术路线 |
| 第2章 137种兽药的液相色谱-串联质谱检测方法研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 仪器与设备 |
| 2.2.2 药品与试剂 |
| 2.2.3 LC-MS/MS检测条件和参数 |
| 2.3 结果与讨论 |
| 2.3.1 质谱参数的优化 |
| 2.3.2 液相色谱分离条件的优化 |
| 2.3.3 目标兽药定容溶剂的优化 |
| 2.3.4 目标兽药线性范围、校正系数与仪器检出限 |
| 2.4 本章小结 |
| 第3章 饮用水源水中兽药多残留同时分析的前处理方法研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 主要设备与材料 |
| 3.2.2 水样预处理方法 |
| 3.3 结果与讨论 |
| 3.3.1 针式过滤器滤膜类型的选择 |
| 3.3.2 固相萃取柱类型及洗脱溶剂的选择 |
| 3.3.3 淋洗溶剂和淋洗体积的优化 |
| 3.3.4 水样pH的影响 |
| 3.3.5 Na_2EDTA添加量的优化 |
| 3.3.6 穿透体积的影响 |
| 3.3.7 基质效应评估 |
| 3.3.8 定量方法的比较和选择 |
| 3.3.9 基底加标回收率及方法检出限、定量限 |
| 3.3.10 实验过程的质量控制 |
| 3.4 本章小结 |
| 第4章 福建省主要饮用水源水中兽药复合污染特征研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 主要设备与材料 |
| 4.2.2 样品的采集与处理 |
| 4.2.3 样品分析的质量控制 |
| 4.3 结果与讨论 |
| 4.3.1 样品分析的质量控制结果 |
| 4.3.2 九龙江、晋江、闽江的总体复合污染特征 |
| 4.3.3 九龙江的兽药复合污染状况 |
| 4.3.4 晋江的兽药复合污染状况 |
| 4.3.5 闽江的兽药复合污染状况 |
| 4.4 本章小结 |
| 第5章 福建省主要饮用水源水中兽药复合污染的初步风险评价 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 饮用水源水安全评价 |
| 5.3 兽药残留的水生生态风险评价 |
| 5.3.1 九龙江北溪的水生生态风险评价 |
| 5.3.2 晋江的水生生态风险评价 |
| 5.3.3 闽江的水生生态风险评价 |
| 5.4 本章小结 |
| 第6章 结语与展望 |
| 6.1 本研究的贡献 |
| 6.2 本研究的不足 |
| 6.3 研究展望 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
（10）LC-QqTOF-MS法检测猪饲料与肌肉中多类兽药残留研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 立项依据 |
| 1.2 样品前处理方法的研究进展 |
| 1.2.1 SPE |
| 1.2.2 SFE |
| 1.2.3 QuEChERS |
| 1.3 检测方法研究进展 |
| 1.3.1 酶联免疫分析技术 |
| 1.3.2 液相-三重四级杆串联质谱 |
| 1.3.3 液相-四级杆时间飞行质谱 |
| 1.4 研究的主要内容 |
| 第二章 LC-QqTOF-MS法检测猪肉中多类兽药残留研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 主要化学品和试剂 |
| 2.1.2 标准品 |
| 2.1.3 主要仪器与设备 |
| 2.1.4 溶液配制 |
| 2.1.5 样品的采集与保存 |
| 2.1.6 样品前处理 |
| 2.1.7 液相-质谱条件 |
| 2.2 方法学指标 |
| 2.2.1 标准曲线 |
| 2.2.2 基质效应 |
| 2.2.3 检出限和定量限 |
| 2.2.4 回收率和变异系数 |
| 2.2.5 精密度和准确度考察 |
| 2.3 兽药化合物数据库的建立 |
| 2.4 结果 |
| 2.4.1 专属性分析 |
| 2.4.2 线性度和灵敏度 |
| 2.4.3 回收率与精密度 |
| 2.4.5 基质效应评估 |
| 2.4.6 自动分析与手动分析的比较 |
| 2.4.7 实际样品应用检测 |
| 2.5 讨论 |
| 2.5.1 肌肉中多类多残留兽药的检测方法 |
| 2.5.2 自动分析的优缺点 |
| 2.5.3 实际样品 |
| 第三章 LC-QqTOF-MS法检测猪饲料中多类兽药残留研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 标准品 |
| 3.1.2 主要化学品和试剂 |
| 3.1.3 主要仪器与设备 |
| 3.1.4 溶液配制 |
| 3.1.5 样品的采集与保存 |
| 3.1.6 样品前处理 |
| 3.1.7 质谱条件 |
| 3.2 方法学指标 |
| 3.2.1 标准曲线 |
| 3.2.2 基质效应 |
| 2.2.3 检出限和定量限 |
| 3.2.4 回收率和变异系数 |
| 3.2.5 精密度和准确度考察 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 专属性分析 |
| 3.3.2 线性度和灵敏度 |
| 3.3.3 回收率与精密度 |
| 3.3.4 基质效应评估 |
| 3.3.5 自动分析和手动分析的比较 |
| 3.3.6 实际样品 |
| 3.4 讨论 |
| 3.4.1 饲料中多类多残留兽药的检测方法 |
| 3.4.2 自动分析的优点 |
| 3.4.3 实际样品 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 定性依据 |
| 定量限 |
| 缩略语表 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、LC-MS分析饲料中的己烯雌酚（论文参考文献）
- [1]典型双酚类化合物在鸡蛋和蛋鸡体内代谢转化规律研究[D]. 肖志明. 中国农业科学院, 2021
- [2]多重丹磺酰氯固相标记结合LC-MS分析环境雌激素[D]. 苗恩铭. 大连理工大学, 2020(02)
- [3]食品中九种兽药残留免疫快速检测方法研究[D]. 王忠兴. 江南大学, 2019(05)
- [4]量子点荧光微球在免疫层析方法中的应用研究[D]. 段宏. 南昌大学, 2019(01)
- [5]QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法快速检测鸡鸭肉中己烯雌酚残留[J]. 莫紫梅,宁芯,陈宁周,林丹. 肉类研究, 2019(09)
- [6]酶联免疫法测定水产品中己烯雌酚残留量[J]. 张瑞凌,许亦真,刘建萍,李福伟,张冲. 山东科学, 2019(03)
- [7]己烯雌酚残留检测研究进展[J]. 冒玉娟,王婧,刘佳敏,张盼盼. 畜牧与饲料科学, 2019(05)
- [8]中药饲料添加剂中同时检测7种非法添加物的HPLC方法的建立[D]. 张昵昵. 安徽农业大学, 2019(05)
- [9]福建省主要饮用水源水中兽药复合污染特征及初步风险评价研究[D]. 庄姗姗. 厦门大学, 2019(09)
- [10]LC-QqTOF-MS法检测猪饲料与肌肉中多类兽药残留研究[D]. 刘小凤. 湖南农业大学, 2018(09)