超量添加吡啶甲酸铬对猪细胞DNA的影响

超量添加吡啶甲酸铬对猪细胞DNA的影响

论文摘要

为探讨超量添加吡啶甲酸铬对猪细胞DNA的影响,共进行了两个试验。试验1对7日龄仔猪肝脏细胞进行体外培养,待细胞贴壁80%左右,换含不同梯度吡啶甲酸铬的完全培养液培养48小时。细胞处理分为四个剂量组,吡啶甲酸铬的终浓度分别为0,8,200,400μmol/L.medium),每组四个重复。处理48小时后收获细胞,测定猪肝细胞的生长密度、细胞彗星试验指标和肝细胞DNA-蛋白质交联度。(1)随着吡啶甲酸铬浓度增大,细胞密度逐渐减少,400μM组肝细胞密度显著低于8μM、200μM组(P<0.05),但与空白组比较差异不显著(P>0.05);0、8μM、200μM三个处理组间差异不显著(P>0.05);(2)在彗星形状指标上,8μM、200μM、400μM组彗尾DNA%与空白组比较差异不显著(P>0.05);8μM组、200μM组彗星长度显著低于空白组(P<0.05),400μM组与空白组比较差异不显著(P>0.05);各处理组彗星尾长、彗尾长/彗星长度之比、彗星尾矩和彗星Oliver矩与空白组比较,差异均不显著(P>0.05);(3)各处理组DNA-蛋白质交联度与空白组比较,差异均不显著(P>0.05)。试验2选取30头体重为(30±1)kg的三元(大白×长白×杜洛克)杂交商品猪,随机分成5个处理组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ),每个处理6个重复,分别添加0、200μg/kg、800μg/kg、1600μg/kg、3200μg/(kg.diet)吡啶甲酸铬,测定试验第35天和80天尿样中的8-OHdG含量以及肝脏和肾脏DNA碱解旋F值。(1)试验第35天,吡啶甲酸铬添加组尿样中8-OHdG含量与空白组差异不显著(P>0.05),各添加组间8-OHdG含量差异不显著(P>0.05);(2)试验第80天,吡啶甲酸铬添加组尿样中8-OHdG含量均低于空白组(P>0.05),其中3200μg/kg剂量组8-OHdG含量接近于空白组,差异不显著(P>0.05);吡啶甲酸铬剂量从800μg/kg上升到3200μg/kg时,处理组8-OHdG含量也逐渐上升,但处理组间8-OHdG含量差异不显著(P>0.05);(3)随着吡啶甲酸铬添加量的增加,肝脏、肾脏DNA碱解旋F值整体上呈逐渐降低的趋势,但与对照组相比,差异不显著(P>0.05)。上述试验结果表明:(1)体外试验结果表明,吡啶甲酸铬在400μmol/(L.培养基)范围内未发现对猪肝细胞DNA完整性产生影响;(2)体内试验结果表明,吡啶甲酸铬在3200μg/(kg.日粮)范围内对猪肝和肾组织DNA无损伤作用;(3)低浓度吡啶甲酸铬添加对猪肝肾细胞及DNA结构具有保护能力和抗氧化作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 研究目的和意义
  • 1.1.1 研究目的
  • 1.1.2 研究意义
  • 1.2 国内外研究现状
  • 1.2.1 吡啶甲酸铬结构特性
  • 1.2.2 吡啶甲酸铬的代谢途径
  • 1.2.3 吡啶甲酸铬安全性研究
  • 1.2.4 吡啶甲酸铬可能存在的细胞毒性、基因毒性作用途径
  • 1.2.5 吡啶甲酸铬研究存在的问题
  • 1.3 研究内容
  • 第二章 培养基中超量添加吡啶甲酸铬对体外培养肝细胞 DNA 的影响
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 仪器与试剂
  • 2.1.2 评价指标与测定方法
  • 2.1.3 统计处理
  • 2.2 结果
  • 2.2.1 体外培养猪肝细胞形态学观察
  • 2.2.2 不同水平吡啶甲酸铬培养条件下猪肝细胞密度测定
  • 2.2.3 不同水平吡啶甲酸铬培养条件下猪肝细胞DNA 链完整性
  • 2.2.4 不同水平吡啶甲酸铬培养条件下猪肝细胞DNA-蛋白质交联度测定
  • 2.3 分析与讨论
  • 2.3.1 培养基中添加不同水平吡啶甲酸铬对猪肝细胞生长的影响
  • 2.3.2 培养基中添加不同水平吡啶甲酸铬对猪肝细胞 DNA 完整性的影响
  • 2.3.3 培养基中添加不同水平吡啶甲酸铬对猪肝细胞 DNA-蛋白质交联的影响
  • 2.4 小结
  • 第三章 饲料中超量添加吡啶甲酸铬对生长猪肝肾组织 DNA 的影响
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 试验设计与饲养管理
  • 3.1.2 试验日粮
  • 3.1.3 取样
  • 3.1.4 检测指标及测定方法
  • 3.1.5 统计处理
  • 3.2 结果
  • 3.2.1 不同水平吡啶甲酸铬饲料饲养生长猪尿样中8-OHdG 含量
  • 3.2.2 不同水平吡啶甲酸铬饲料饲养生长猪肝脏肾脏DNA 碱解旋F 值
  • 3.3 分析与讨论
  • 3.3.1 饲料中添加不同浓度吡啶甲酸铬对尿样8-OHdG 的影响
  • 3.3.2 饲料中添加不同浓度吡啶甲酸铬对猪肝脏、肾脏 DNA(碱解旋F 值)的影响
  • 3.4 小结
  • 第四章 结论
  • 4.1 结论
  • 4.2 论文创新点
  • 4.3 有待进一步深入研究的问题
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 作者简历
  • 相关论文文献

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