论文摘要
目的:探讨类似于HIV/AIDS免疫低下状态的小动物模型的制备方法。方法:1.运用氢化可的松对4周龄和6周龄雄性BALB/C小鼠分别造模,采用流式细胞术检测模型组和空白组外周血T淋巴细胞亚群,全自动生化分析仪检测外周血淋巴细胞计数,解剖取胸腺、脾脏,称湿重计算脏器指数,并计算各组造模过程中的死亡率。2.运用环磷酰胺(CY)和氢化可的松(HY)各4个剂量分别对6周龄雄性BALB/C小鼠进行造模,采用全自动生化分析仪检测造模7天后以及造模停止4周后各组外周血淋巴细胞计数,解剖取胸腺、脾脏,称湿重计算脏器指数,并计算各组造模过程中的死亡率。3.用25mg/kg/d的氢化可的松对6周龄雄性BALB/C小鼠造模7天后,继续用20mg/kg/d的氢化可的松维持不同时间,均在4周后采用全自动生化分析仪检测外周血淋巴细胞计数,解剖取胸腺、脾脏,称湿重计算脏器指数。结果:1.模型动物的选择:4周龄组的死亡率为50%,6周龄组未见死亡;6周龄模型鼠一般状况较正常鼠明显变差,且外周血淋巴细胞计数及外周血CD4、CD8百分比、CD4/CD8比值较空白组均明显减少,差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01;6周龄模型鼠胸腺、脾脏均不同程度缩小,与正常比较有统计学意义,P<0.05或P<0.01。2.造模用药及剂量的选择:CY 50mg/kg/d和HY 25、20mg/kg/d均能使外周血淋巴细胞计数减少,并有统计学意义,P<0.05或P<0.01;而且HY 25mg/kg/d对外周血淋巴细胞的抑制作用较CY 50mg/kg/d、HY 20mg/kg/d更强,与之比较有显著性差异,P<0.05;CY 50mg/kg/d和HY 25mg/kg/d对小鼠脾脏和胸腺的抑制作用都很明显,P<0.05或P<0.01,HY 20mg/kg/d对小鼠胸腺的抑制较明显,P<0.05,而对脾脏则无明显抑制;HY 25mg/kg/d的抑制作用较CY 50mg/kg/d、HY 20mg/kg/d更强,P<0.05。3.造模后低剂量维持时间的选择:维持1周和2周的小鼠在四周后,其外周血淋巴细胞数量与正常组比较无显著性差异,P>0.05,而持续维持4周的小鼠在四周后,其外周血淋巴细胞数量与正常组、维持1周、2周组比较均有显著性差异,P<0.05;对免疫器官的抑制情况,维持1周、2周模型组与空白对照组比较无差异,维持4周模型组与空白对照组、维持1周模型组有显著性差异。结论:1.用氢化可的松25mg/kg/d对6周龄雄性BALB/C小鼠腹腔注射7天,所诱导的免疫低下模型比较接近于艾滋病以细胞免疫损伤为主的免疫低下状态。2.用氢化可的松20mg/kg/d维持模型,可避免因治疗周期较长致使免疫低下状态恢复,但可根据不同治疗时间来选择不同的模型维持时间。
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