肾上腺髓质素在大鼠全脑缺血预处理诱导缺血耐受中的保护作用

论文摘要

目的：探讨肾上腺髓质素在大鼠全脑缺血预处理诱导缺血耐受过程中的脑保护作用，及其在该过程中的表达变化。材料与方法：实验采用改良的四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型，78只SD成年大鼠随机分为13组，每组6只。A组为空白对照组；B组为假手术组，仅进行相关血管的游离，不进行血管阻断的缺血处理；C1组全脑3分钟缺血预处理，再灌注24小时；C2组全脑3分钟缺血预处理，再灌注48小时；C3组全脑3分钟缺血预处理，再灌注72小时C4组全脑3分钟缺血预处理，再灌注7天；C5组全脑3分钟缺血预处理，再灌注14天；D1组全脑3分钟缺血预处理，再灌注24小时后行9分钟缺血；D2组全脑3分钟缺血预处理，再灌注48小时后行9分钟缺血；D3组全脑3分钟缺血预处理，再灌注72小时后行9分钟缺血；D4组全脑3分钟缺血预处理，再灌注7天后行9分钟缺血；D5组全脑3分钟缺血预处理，再灌注14天后行9分钟缺血；E组9分钟缺血对照组。C组按再灌注时间完成后立即断头取脑，A、B、D、E组均在最后一次处理后再灌注7天断头取脑。在视交叉后1mm及4mm处冠状切面取切片行H-E染色和ADM免疫组化染色，分别观察海马区神经元的存活情况及ADM的表达，采用SPSS13.0软件对实验数据进行统计学分析。结果：H—E染色切片于光镜下计数海马CA1区存活神经元密度，并使用统计学软件SPSS13.0进行成组分析t检验；A、B、C1—C5组，无明显细胞坏死；E、D1、D5组，可见大量细胞坏死；D2、D3、D4组可见部分细胞坏死，其中以D3组存活细胞数目最多。免疫组化染色切片观察见：A、B、C4、D4组微着色；D2、C3、E组着色稍加深；C2、D5组部分着色，C1、C5、D3组可见明显的棕黄色颗粒，着色明显。经过相应的全脑缺血处理后，各组神经元存活数目及ADM表达强度有显著性差异。结论：（1）全脑3分钟缺血预处理后，脑组织能对随后严重的脑缺血产生有效的保护作用，再灌注72小时诱导的神经保护作用最强；（2）在3分钟全脑预缺血后，分别再灌注24小时、48小时、72小时、7天，ADM在脑组织中表达强度呈下降趋势；（3）ADM参与了缺血预处理诱导缺血耐受的过程，在此过程中，其表达的改变与缺血预处理的神经保护作用相关。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1.1 试剂及仪器
• 1.2 大体步骤
• 1.3 实验分组及动物模型制备
• 1.4 脑组织的获取及切片制作
• 1.5 HE 染色步骤
• 1.6 免疫组化操作步骤
• 1.7 HE 切片观察
• 1.8 免疫组化结果观察
• 1.9 试验动物及标本的筛选
• 1.10 统计学处理
• 第二章 结果
• 2.1 HE 染色结果
• 2.2 免疫组化染色观察结果
• 2.3 统计学处理结果
• 2.3.1 HE 染色统计学处理结果
• 2.3.2 免疫组化染色统计学处理结果
• 2.4 实验结果分析
• 第三章 讨论
• 3.1 关于脑缺血预处理、缺血耐受和肾上腺髓质素
• 3.2 动物模型的制作
• 3.3 实验动物的筛选
• 3.4 全脑缺血后脑组织的组织学变化，肾上腺髓质素表达的变化及其保护作用
• 第四章 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 致谢