论文摘要
[目的]：研究艾滋病患者经有效抗病毒治疗后出现不同免疫学应答的特征,并进一步探讨艾滋病免疫功能重建不全的机制。[方法]：从2003年10月至2009年4月于北京协和医院艾滋病诊疗中心规律随诊的患者55名,这些患者规律随诊,经抗病毒治疗2年以上,自基线、1月、3月、6月、9月、12月、18月、24月、30月、36月规律随访,检测血浆病毒载量、并采用流式细胞术技术检测外周血B细胞计数（CD19+）、NK细胞计数（CD16+CD56+）、CD4/CD8+T淋巴细胞计数（CD3+CD4+、CD3+CD8+）、CD4+T淋巴细胞纯真（CD4+CD45RA+CD62L+）、记忆亚群计数（CD4+CD45RA-）、CD8+T淋巴细胞激活亚群比例（CD8+CD38+/CD8、CD8+HLA-DR+/CD8+）,并留取PBMC冻存待用。选取抗病毒治疗后血浆病毒载量维持在50copies／ml以下一年以上的患者,根据其是否存在免疫学应答进一步划分为免疫学应答组（n=15）、免疫学无应答组（n=11）。对两组患者自治疗前基线水平、治疗后6月、12月、24月、36月各随访点进行纵向研究。复苏冻存的PBMC采用流式细胞术技术,对外周血CD4+T淋巴细胞激活亚群比例（CD4+CD38+/CD4+、CD4+HLA-DR+/CD4+）; CD4+T淋巴细胞胸腺新生纯真亚群比例（CD4+CD45RA+CD31+/CD4+）及CD4+T淋巴细胞早期凋亡亚群比例（CD4+AnnexinV+PI-/CD4+）;调节性CD4+T淋巴细胞比例（CD4+CD25+FoxP3+/CD4+）;记忆CD4+T淋巴细胞早期（CD27+CCR7+）中期（CD27-CCR7+）晚期（CD27-CCR7-）不同分化成熟阶段比例进行检测。评价两组艾滋病患者在免疫学应答特征的差异,进而分析免疫学无应答的发生机制。[结果]：1.基线水平,免疫学无应答组CD4+T淋巴细胞计数为37±36／ul与免疫学应答组172±87／ul比较有显著性差异（P<0.01）；免疫学应答组胸腺新生纯真CD4+比例为11.9±7.0%,显著高于免疫学无应答组2.6±1.5%（P=0.023）。基线免疫学无应答组患者CD4+T淋巴细胞早期凋亡比例为9.5±4.3%,显著高于免疫应答组的4.1±3.3%的比例（P<0.01）；免疫学无应答组调节性CD4+T淋巴细胞的比例为6.9±3.5%,免疫学应答组为3.7±2.2%,健康对照组为2.5±0.8%,免疫学无应答组较其它两组均有显著增高（P<0.01）；两组患者CD4+/CD8+T淋巴细胞激活亚群在基线水平无差异；2.两组患者经抗病毒治疗后NK细胞、B细胞计数都有逐步增高,在抗病毒治疗初期增高更显著。B细胞增长在两组中存在差异,免疫学无应答组患者增长快于免疫学应答组；3.经36月抗逆转录病毒治疗后,记忆表型CD4+T淋巴细胞在免疫学应答组平均增长128+61／ul,在免疫学无应答组平均增长118+67／ul；而纯真表型CD4+T淋巴细胞在免疫学应答组平均增长107+82／ul,在免疫学无应答组平均增长46±18／ul。两组间CD4+T淋巴细胞计数增长的差异主要在纯真CD4+T淋巴细胞部分（P<0.01）。4.两组艾滋病患者CD4+／CD8+T淋巴细胞激活亚群在基线水平无显著差异,但均显著高于健康对照组。在抗病毒治疗6月时免疫学应答组患者CD8+CD38+/CD8+较基线下降比例显著高于免疫学无应答组（p<0.05）；5.免疫应答组治疗后6月、12月、24月、36月时CCR7+CD27+记忆CD4+T细胞亚群比例显著高于免疫无应答组（p<0.05）；在治疗后36月时两组早期记忆CD4+T淋巴细胞比例为：INR组51.0±5.3%,IR组62.9±10.0%；6.CD4+T淋巴细胞早期凋亡亚群比例与CD8+CD38+激活比例（r=0.225,p=0.016）、CD8+HLA-DR+激活比例（r=0.229,p=0.014）之间呈正相关；CD4+T淋巴细胞早期凋亡亚群比例与调节性CD4+T淋巴细胞比例也存在正相关（r=0.205,p=0.029）。[结论]：1.经抗病毒治疗后,CD4+T淋巴细胞计数的增长可分为两期,早期快速增长以记忆表型CD4+T淋巴细胞为主；后期主要为纯真细胞的持久增长。至抗病毒治疗后36月,免疫学无应答组患者CD4+T淋巴细胞增长水平较免疫学应答组水平低主要在于纯真CD4+T淋巴细胞计数增长低。两组患者NK细胞数量增长相似,而B细胞在免疫学无应答组增长较显著。2.在基线水平,CD4+T淋巴细胞计数显著减低、胸腺新生CD4+T淋巴细胞比例显著下降、CD4+T淋巴细胞早期凋亡比例显著的增高、调节性T淋巴细胞比例的异常增高都是患者发生免疫学无应答的预警因素；开始治疗后,CD8+T淋巴细胞表达CD38的激活亚群降低的速度慢,预示患者可能将出现免疫学无应答；3.CD8+T淋巴细胞异常激活比例与CD4+T淋巴细胞早期凋亡存在正相关；调节性CD4+T淋巴细胞比例与CD4+T淋巴细胞早期凋亡比例存在正相关。
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