论文摘要
目的 观察川芎嗪、大黄酸联用对转化生长因子(TGF-β1)和甘油三酯(TG)致 L-02 肝细胞损伤的影响,探讨其对损伤肝细胞的保护作用和可能的机制。 方法 培养 L-02 正常人肝细胞株,以不同浓度的川芎嗪、大黄酸作用于 L-02 细胞,选择川芎嗪、大黄酸单用和联用的浓度。将 TGFβ1和 TG 共同作用于 L-02 细胞制备肝细胞损伤模型,再以川芎嗪、大黄酸单用和联用于损伤肝细胞模型,采用 MTT 法检测细胞生长情况、AnnexinⅤ—FITC/PI 染色结合流式细胞仪分析细胞凋亡的情况,AO-EB 染色后荧光显微镜观察细胞的形态变化,免疫细胞化学方法检测肝细胞的 PCNA、Bcl-2、Bax 及 Caspase3 蛋白的表达情况。 结果 川芎嗪(10μg/ml、50μg/ml),大黄酸(1μg/ml、5μg/ml)均有阻断TGF-β1+TG引起的细胞增殖抑制的作用。川芎嗪(10μg/ml、50μg/ml),大黄酸( 5μg/ml)对 TGF-β1+TG 诱导 L-02 肝细胞的凋亡有明显的抑制作用。两药联用(川芎嗪 10μg/ml 和大黄酸 5μg/ml,按 1︰1 比例)也有阻断增殖抑制和抑制凋亡的作用。两药可上调PCNA、Bcl-2 的表达,下调 Bax、Caspase3 的表达。联用两药比单用时其上述作用更明显。 结论 川芎嗪、大黄酸可保护由 TGF-β1+TG 引起的肝细胞损伤,两药联用的效果更显著。其可能机制为阻断由 TGF-β1+TG 引起的细胞增殖抑制这一毒性作用;通过上调 Bcl-2,下调 Bax、Caspase3 这些凋亡相关蛋白,调控细胞凋亡,抑制细胞凋亡的发生。
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