几种珍稀药用植物产活性成分内生真菌的初步研究

论文题目: 几种珍稀药用植物产活性成分内生真菌的初步研究

论文类型: 硕士论文

论文专业: 微生物学

作者: 刘芸

导师: 殷红

关键词: 内生真菌,桃儿七,银杏,黄芩,杜仲,黄酮,鬼臼毒素,菌种鉴定,发酵条件

文献来源: 西北大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本文以传统药用植物银杏、黄芩、杜仲、桃儿七为研究对象,对其内生真菌进行了分离、纯化和筛选。 1 从样品中共分离得到52株内生真菌,其中产活性成分的5种菌株经形态学初步鉴定有刺盘孢属、曲霉属、镰刀属、头孢霉属和交链孢属等。 2 通过黄酮类物质的特异性的显色反应及TLC分析筛选出发酵产物中存在黄酮类物质的菌株,包括有YX16、HQ1、DZ10、DZ11四株,采用分光光度法测定了上述四种菌株发酵液中黄酮类物质的含量。 对筛选出的濒危药用植物桃儿七内生真菌菌株T8进行了进一步的研究,得出以下结论: 1 通过对T8发酵液中代谢产物进行TLC分析、红外光谱分析、UV光谱分析、HPLC分析,各项结果均表明其中含有鬼臼毒素。 2 对T8的培养基和液体发酵条件进行了筛选和优化,结果表明,该菌株在PDA培养基中长势最好,合成培养基中次之;鬼臼毒素生成量以合成培养基中为最大。以合成培养基作为基础培养基进行正交优化试验,结果比较表明适宜该菌生长和鬼臼毒素产生的发酵条件为:20g/L的蔗糖、4.5g/L的尿素、培养温度为30℃、pH为6.0。

论文目录:

独创性声明

中文摘要

英文摘要

前言

1 植物内生真菌的研究进展

1.1 植物内生真菌基础研究内容

1.1.1 内生真菌的种类及其基本特征

1.1.2 植物内生真菌的生物学作用

1.1.3 内生真菌的分布

1.2 植物内生真菌的在药用领域的开发和应用

1.2.1 内生真菌可产生一些重要的抗人类疾病的药物成分

1.2.2 内生真菌可产生其他有潜在价值的活性成分

1.3 内生真菌研究存在的问题与展望

2 黄酮类化合物和鬼臼毒素化合物的研究概况

2.1 黄酮类化合物的研究概况

2.1.1 治疗心血管疾病的作用

2.1.2 抗自由基、抗氧化的作用

2.1.3 抗肿瘤的作用

2.1.4 其他作用

2.2 鬼臼毒素的研究概况

2.2.1 鬼臼毒素类药物的特性与功能

2.2.2 鬼臼毒素的作用机理及构效关系

2.2.3 天然鬼臼毒素获得途径

3 几种珍稀药用植物的研究概况

3.1 银杏

3.2 黄芩

3.3 杜仲

3.3.1 黄酮类

3.3.2 木脂素类

3.3.3 环烯醚萜类

3.3.4 苯丙烷类

3.3.5 多糖

3.3.6 其他成分

3.4 桃儿七

3.4.1 桃儿七的化学成分

3.4.2 桃儿七的药理活性

3.4.3 桃儿七开发利用前景展望

4 本课题研究的目的和意义

内生真菌的分离和初步筛选

1 材料

1.1 植株来源

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器

2 实验方法

2.1 培养基

2.2 内生真菌的分离和纯化

2.3 内生真菌的摇瓶培养

2.4 发酵产物的初步鉴定

2.4.1 产黄酮类内生真菌代谢产物的初步鉴定

2.4.2 产黄鬼臼毒素内生真菌代谢产物的初步鉴定

2.4.3 产黄酮内生真菌代谢产物的含量粗测

3 实验结果与讨论

3.1 银杏内生真菌的分离结果

3.2 黄芩内生真菌的分离结果

3.3 杜仲内生真菌的分离结果

3.4 桃儿七内生真菌的分离结果

3.5 几种产活性成分内生真菌的生长曲线

3.6 几种产黄酮内生真菌的TLC分析

3.7 几种内生真菌中黄酮含量的测定

3.7.1 黄酮对照品吸收波长的选择

3.7.2 黄酮对照品的标准曲线

3.7.3 几种内生真菌黄酮含量的测定结果

T8内生真菌的代谢产物鉴定及其发酵条件的优化

1 实验材料

1.1 菌种

1.2 主要试剂

1.3 主要仪器

2 方法

2.1 培养基

2.2 代谢产物的结构鉴定

2.2.1 产物的分离

2.2.2 产物的纯化

2.2.3 产物的结构鉴定

2.3 代谢产物中鬼臼毒素的含量测定

2.3.1 标准品最大吸收波长的选择

2.3.2 标准溶液的配制及线性关系的考察

2.3.3 代谢产物中鬼臼毒素含量的测定

2.4 最适培养基的选择和发酵条件的优化

2.4.1 最适培养基的选择

2.4.2 发酵条件的优化

2.4.3 最适碳源、氮源浓度的选择

3 实验结果与讨论

3.1 对T8菌株代谢产物的鉴定结果

3.1.1 薄层层析

3.1.2 红外光谱

3.1.3 产物纯化实验结果

3.1.4 紫外光谱分析

3.1.5 HPLC分析

3.2 代谢产物含量的测定试验结果

3.2.1 标准品最大吸收波长的选择

3.2.2 标准溶液的配制及线性关系的考察

3.2.3 精密度测定

3.2.4 稳定性实验

3.2.5 加样回收率测定

3.3 T18发酵最适培养基的选择实验结果

3.4 T18发酵条件的优化实验结果

3.5 最适碳源、氮源浓度的选择实验结果

小结

参考文献

致谢

发布时间: 2005-11-18

参考文献

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