丹参脂溶性成分丹参酮IIA的肠吸收和乌药质量分析方法研究

论文摘要

口服给药是最常用的临床给药方式。吸收是药物体内过程的第一步,也是药物发挥作用的前提。丹参酮ⅡA（TSⅡA）是丹参的主要药效成分之一,具有广泛的药理活性,但其口服生物利用度很低。为揭示TSⅡA生物利用度低的原因,为剂型设计提供依据,本文研究了TSⅡA的肠吸收情况以及丹参提取物中多种活性组分在吸收过程中对TSⅡA的影响。采用大鼠离体肠囊外翻模型,建立了同时测定丹参脂溶性成分中TSⅡA和隐丹参酮（CTS）吸收的方法,该方法简便,准确性高,回收率好。考察了TSⅡA的肠吸收机制,以及不同肠段和不同药物浓度等因素对它们吸收的影响,比较了TSⅡA在单体给药和丹参提取物给药时的吸收差异。结果表明,TSⅡA在大鼠小肠各段均有吸收,吸收百分率按十二指肠、空肠、回肠依次下降,但无显著性差异;在试验时间和浓度范围内,按一级吸收动力学特征,可能为被动扩散;丹参提取物中的共存物质没有促进TSⅡA的吸收。采用大鼠在体肠袢模型,比较了不同给药方式（单体给药或者提取物给药）对TSⅡA吸收的影响,并考察了P-糖蛋白（P-gp）抑制剂维拉帕米对TSⅡA吸收的影响。结果显示,提取物给药时大鼠血浆中TSⅡA的峰浓度Cmax较单体给药大,但不存在显著性差异。加入维拉帕米能微弱增加TSⅡA的吸收,经t检验,无显著性差异。说明P-gp在实验浓度下对小肠吸收的作用不明显。P-gp对药物的外排作用不是影响其生物利用度的原因。本文除主要研究TSⅡA的肠吸收外,为评价浙江道地药材乌药的质量,建立了同时测定乌药中四种生物碱的HPLC法。色谱条件为Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相:A相为水（先加入1.5‰的二乙胺,再用冰醋酸调pH=3.0）,B相为乙腈,线性梯度洗脱;UV检测波长289nm。结果显示,波尔定碱在0.428～8.56μg,降波尔定碱在2.122～31.83μg,网状香荔枝碱在0.760～15.20μg,Linderegatine（新发现的化合物）在0.0204～0.4008μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.18%、100.94%、100.31%、99.17%,RSD分别为1.69%、2.51%、2.13%、2.95%。本方法快速简便、准确,可用于乌药的质量评价。

论文目录

• 致谢
• 摘要
• Abstract
• 目次
• 1.综述--肠吸收研究方法及在中药研究中的应用
• 1.1 概述
• 1.2 肠吸收研究的实验方法
• 1.2.1 离体法
• 1.2.2 在体法
• 1.2.3 整体法
• 1.2.4 Caco-2细胞模型法
• 1.3 促进药物肠吸收的方法
• 1.3.1 使用吸收促进剂
• 1.3.2 改变吸收途径
• 1.3.3 改变药物分散状态和提高药物溶解性
• 1.3.4 抑制肠壁细胞外泌
• 1.3.5 其他
• 1.4 肠吸收在中药领域的应用
• 1.4.1 中药中各类成分的肠吸收
• 1.4.2 肠吸收应用于中药成分相互作用研究
• 1.5 中药丹参成分大鼠肠吸收的研究进展
• 1.5.1 单体的吸收机制研究
• 1.5.2 促进吸收的方法
• 1.6 本文研究工作及各章安排
• 2.丹参酮IIA及丹参醇提物的离体肠吸收研究
• 2.1 概述
• 2.2 仪器与材料
• 2.2.1 仪器
• 2.2.2 试药
• 2.2.3 动物
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 色谱条件
• 2.3.2 对照品储备液的配制
• 2.3.3 Krebs-Ringer's液（K-R液）及人工肠液的配制
• 2.3.4 大鼠离体肠吸收实验
• 2.3.5 样品处理
• 2.3.6 数据分析
• 2.4 实验结果
• 2.4.1 K-R液中TSIIA和CTS含量测定方法学考察
• 2.4.2 TSIIA和CTS肠吸收的测定
• 2.4.3 TSIIA单体在大鼠肠道不同部位的吸收
• 2.4.4 不同浓度下TSIIA在大鼠回肠内的吸收
• 2.4.5 不同给药方式下TSIIA小肠吸收的比较
• 2.5 讨论
• 3.丹参酮IIA及丹参醇提物的大鼠在体肠吸收
• 3.1 概述
• 3.2 仪器与材料
• 3.2.1 仪器
• 3.2.2 试药
• 3.2.3 动物
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 色谱条件
• 3.3.2 对照品溶液的配制
• 3.3.3 实验模型
• 3.3.4 样品预处理
• 3.3.5 数据分析
• 3.3.6 实验肠段的选择
• 3.4 实验结果
• 3.4.1 分析方法专属性考察
• 3.4.2 方法学验证
• 3.4.3 TSIIA及丹参提取物在大鼠回肠吸收的比较
• 3.4.4 P-gp抑制剂对丹参提取物中TSIIA肠吸收的影响
• 3.5 讨论
• 4.高效液相色谱法同时测定乌药中的四种生物碱
• 4.1 概述
• 4.2 仪器与材料
• 4.2.1 仪器
• 4.2.2 试药
• 4.3 实验方法
• 4.3.1 色谱条件
• 4.3.2 对照品溶液的制备
• 4.3.3 供试品溶液的制备
• 4.3.4 标准曲线与线性范围
• 4.3.5 精密度实验
• 4.3.6 稳定性实验
• 4.3.7 加样回收率试验
• 4.4 讨论
• 4.4.1 流动相的选择
• 4.4.2 供试品制备方法的选择
• 5.结论
• 5.1 总结
• 5.2 展望
• 参考文献
• 作者简历