转基因抗虫棉对根际细菌多样性影响的研究

论文摘要

本研究以转基因棉33B、SGK321、GK12、GK19、B9801及非转基因棉33、石远321、泗棉3号8个棉花品种为材料，运用常规微生物学技术分析了转基因棉与非转基因棉根际细菌和根际卡那霉素抗性细菌的数量利多样性变化，并检测了卡那霉素抗性标记基因nptⅡ漂移到根际细菌的情况。主要结果如下：1从根际细菌和根际卡那霉素抗性细菌的数量上看(除GK19与B9801这组)，只有2个批次的样品间有显著性差异，仅占总样品数的2.1％。泗棉3号与GK12、泗棉3号与GK19、33与33B、石远321与SGK321的根际细菌和根际卡那霉素抗性细菌的Shannon指数在96组样品中差异达到显著或极显著的有8组，占总样品数的8.3％；Simpson指数在96组样品中差异达到显著或极显著的有12组，占总样品数的12.5％；均匀性指数在96组样品中差异达到显著或极显著的有8组，占总样品数的8.3％。无论从根际细菌和根际卡那霉素抗性细菌的数量，还是Shannon指数、Simpson指数、均匀性指数的变化情况来看转基因棉对其根际细菌及根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性影响都较小。2对主要的9类菌株16s DNA的序列进行分析，与GenBank数据库中的序列比对，结果表明这9类菌株分属4个细菌属，其中6个为芽孢杆菌属。3以质粒pBI121为对照，根据卡那霉素抗性基因序列设计特异性引物，采用PCR方法检测所分离到的根际卡那霉素抗性细菌。在21个菌株中发现有18个菌株出现阳性片段，将PCR产物测序并与卡那霉素抗性基因序列进行比对，相似度较高，可初步判断nptⅡ基因发生了漂移。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 引言
• 1.1 全球转基因作物种植情况
• 1.1.1 种植面积
• 1.1.2 主要转基因作物种植情况
• 1.1.3 种植分布
• 1.1.4 转基因作物种子的销售情况
• 1.1.5 转基因作物转入性状的发展
• 1.2 转基因作物的生物安全性评价
• 1.2.1 转基因作物的食品安全性
• 1.2.2 转基因作物的生态安全性
• 1.2.3 转基因作物生物安全性评价方面的研究进展
• 1.3 转基因棉安全性研究进展
• 1.3.1 转基因棉的发展现状
• 1.3.2 转基因棉的生物安全评价研究进展
• 1.4 环境微生物研究方法
• 1.4.1 环境微生物
• 1.4.2 环境微生物研究方法
• 1.5 研究的目的、意义与内容
• 1.5.1 研究的目的与意义
• 1.5.2 研究内容
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.1.1 试验材料
• 2.1.2 田间试验设计
• 2.1.3 棉花根际土壤样品的采集
• 2.1.4 仪器及药品
• 2.2 方法
• 2.2.1 常用培养基的制备
• 2.2.2 样品处理
• 2.2.3 细菌菌株的纯化保存
• 2.2.4 细菌DNA的提取
• 2.2.5 pBI121质粒的提取
• 2.2.6 引物设计
• 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳检测
• 2.2.8 统计分析方法
• 3 棉花根际细菌的数量和多样性分析
• 3.1 试验的目的和意义
• 3.2 泗棉3号与GK12的根际细菌的数量和多样性分析
• 3.3 泗棉3号与GK19的根际细菌的数量和多样性分析
• 3.4 GK19与B9801的根际细菌的数量和多样性分析
• 3.5 33与33B的根际细菌的数量和多样性分析
• 3.6 石远321与SGK321的根际细菌的数量和多样性分析
• 3.7 小结
• 4 棉花根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析及nptⅡ基因的检测
• 4.1 试验的目的和意义
• 4.2 泗棉3号与GK12的根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析
• 4.3 泗棉3号与GK19的根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析
• 4.4 GK19与B9801的根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析
• 4.5 33与33B的根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析
• 4.6 石远321与SGK321的根际卡那霉素抗性细菌的数量和多样性分析
• 4.7 nptⅡ基因的检测
• 4.8 小结
• 5 根际主要细菌类群的形态分类和分子鉴定
• 5.1 形态分类
• 5.2 分子鉴定
• 6 结论与讨论
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文