白芍总苷对佐剂性关节炎大鼠血浆及滑膜组织IL-1β、IFN-γ的影响

论文摘要

目的:类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）是一种慢性系统性自身免疫性疾病。以关节滑膜炎,对称性、破坏性关节病变为主要特征。病情逐步进展,最终导致关节功能障碍。其致病原因尚不完全明确,多种炎性细胞及细胞因子介导的异常细胞免疫、体液免疫而致的全身及关节局部免疫功能紊乱,在RA的致病过程中起着重要的作用。目前,改善症状、减慢疾病进展的抗风湿药是RA的主要治疗手段。但其毒副作用较大,而针对某些细胞因子的生物制剂价格昂贵,导致患者长期服用依从性差,不利于疾病控制,因此选择一种效价比良好的抗风湿药物势在必行。白芍总苷（total glucosides of paeony, TGP）为中药制剂,自古以来就是风湿免疫性疾病治疗的重要组方之一。其作用温和,不仅具有抗炎、调节免疫力的作用,还具有镇痛,保肝的功效,已用于风湿性疾病的临床治疗,但其剂量及疗效不是很确切。本实验以完全弗氏佐剂所诱导的佐剂性关节炎（adjuvant arthritis, AA）大鼠模型为基础,从体重、关节肿胀程度、血浆及滑膜组织白细胞介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）,干扰素-γ（interferon-γ, IFN-γ）水平的变化等几方面,观察不同浓度的白芍总苷对关节炎的影响,探讨白芍总苷治疗RA的机制。方法:（1）将成年雄性Wistar大鼠随机分为Ⅰ组（正常对照组）、Ⅱ组（单纯造模组）、Ⅲ组（造模+低剂量白芍总苷组）、Ⅳ组（造模+高剂量白芍总苷组）、Ⅴ组（造模+甲氨喋呤组）。Ⅱ-Ⅴ组每只大鼠尾根部皮内多点注射完全弗氏佐剂（CFA）0.2ml,诱导出关节炎模型,14天后再次注射0.1ml加强免疫。（2）从免疫后第12天开始Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组分别给予白芍总苷50mg/kg·d, 300mg/kg·d,甲氨喋呤2.7mg/kg·w灌胃治疗,Ⅰ组、Ⅱ组给与等体积生理盐水灌胃。（3）测定不同时间点各组大鼠的体重、足体积、并进行关节炎指数（AI）的评定。（4）采用双抗体夹心ELISA法测定给药14天（造模26天）及给药28天（造模40天）各组大鼠血浆IL-1β、IFN-γ浓度。（5）对给药14天和给药28天的各组大鼠滑膜组织进行IL-1β、IFN-γ的SP免疫组织化学染色,采用真彩病理图像分析系统进行定量分析（。6）应用SPSS11.5统计软件进行统计分析。结果:（1）AI:第Ⅱ-Ⅴ组大鼠造模15天后各时间点AI均高于第Ⅰ组,高峰出现在造模后20-25天,以后逐渐下降;Ⅲ组、Ⅳ组于造模后25天AI低于第Ⅱ组,Ⅴ组于造模后30天AI低于第Ⅱ组,具有统计学意义（P<0.05）;Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组各时间点之间AI值无差别（P>0.05）。（2）足体积的测量:实验前各组大鼠之间足体积无统计学差异（P>0.05）。第Ⅱ-Ⅴ组大鼠足体积于造模后15天明显高于正常组（P<0.05）,第20-25天达到肿胀高峰,之后肿胀程度逐渐下降,直到40天仍高于正常组（P<0.05）。第Ⅲ组、Ⅳ组于造模后20天出现疗效,足体积低于第Ⅱ组,且具有统计学意义（P<0.05）,较第Ⅴ组出现疗效早5天。第Ⅴ组于造模后25天出现疗效,与模型组比较有统计学意义（P<0.05）。（3）血浆IL-1β、IFN-γ浓度:给药14天时,第Ⅱ-Ⅴ组两种细胞因子浓度均明显高于第Ⅰ组,具有统计学意义（P<0.05）;给药28天时,第Ⅱ-Ⅴ组的两种细胞因子浓度都较前下降,Ⅱ组、Ⅲ组仍高于正常（P<0.05）,Ⅳ组、Ⅴ组则降至正常,与正常组比较无统计学意义（P>0.05）。给药14天及28天,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的两种细胞因子浓度均低于模型组（P<0.05）。给药14天,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组两两之间有统计学意义（P<0.05）,以第Ⅳ组细胞因子浓度最低,其次为第Ⅲ组,第Ⅴ组最高;至给药28天,第Ⅳ组、Ⅴ组细胞因子浓度最低,低于第Ⅲ组（P<0.05）,Ⅳ组、Ⅴ组之间无差别（P>0.05）。（4）滑膜组织IL-1β、IFN-γ的积分光密度值（IOD）:给药14天时,第Ⅱ-Ⅴ组两种细胞因子的IOD值均明显高于正常对照组（P<0.05）;至给药28天,Ⅱ-Ⅴ组细胞因子的IOD值都较前下降,但都未降至正常,与正常组比较仍有统计学意义（P<0.05）。给药14天及28天两个时间点,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组两种细胞因子的IOD值都低于模型组（P<0.05）。给药14天,Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组两两之间有差别,以第Ⅳ组IOD值最低,其次为第Ⅲ组,第Ⅴ组最高;给药28天,第Ⅳ组、Ⅴ组细胞因子水平低于第Ⅲ组（P<0.05）,Ⅳ组、Ⅴ组之间无差别（P>0.05）。（5）相关性分析:AI与足体积呈直线正相关;血浆中IL-1β、IFN-γ浓度呈直线正相关,同时二者分别与足体积呈直线正相关;滑膜组织的IL-1β、IFN-γ的IOD值呈直线正相关,同时二者分别与足体积呈直线正相关。结论:（1）AI与足体积呈直线正相关,二者均能反映关节肿胀情况,但后者方法更为精确、客观。二者结合能更直观、准确的反映关节肿胀程度。（2）血浆及滑膜中的IL-1β、IFN-γ水平分别与足体积呈直线正相关,提示IL-1β、IFN-γ在RA致病过程中发挥着重要的作用。（3）血浆及滑膜中的IL-1β、IFN-γ水平之间分别呈直线正相关,二者互相影响,在RA致病过程中形成相互影响的恶性循环。（4）白芍总苷具有较好的抗炎作用,可以降低血清IL-1β、IFN-γ的含量,减轻症状。（5）白芍总苷可以降低滑膜IL-1β、IFN-γ的水平,减轻滑膜细胞水肿、减少炎性细胞浸润、抑制滑膜增生,从而达到减轻关节肿胀、抑制骨破坏、延缓病程的目的。（6）白芍总苷起效早于甲氨喋呤。药物治疗14天,白芍总苷疗效较甲氨喋呤为好;药物治疗28天,大剂量白芍总苷的疗效与甲氨喋呤无明显差异。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 白芍总苷对佐剂性关节炎大鼠血浆及滑膜组织IL-1β、IFN-γ的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 白芍总苷的研究进展
• 致谢
• 个人简历