论文题目: IL-1023-57-PE40免疫毒素的制备及细胞毒活性研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 预防兽医学
作者: 彭其胜
导师: 朱平
关键词: 免疫毒素,表达,调控,纯化,细胞毒活性
文献来源: 吉林大学
发表年度: 2005
论文摘要: 通过对白细胞介素10(IL-10)与其受体(IL-10R)结合位点的分析,参考国外学者的研究成果,设计了以IL-10 模拟功能短肽IL-1023-57为导向的免疫毒素IL-1023-57-PE40,为了证明设计的合理性,另设计了IL-1018-57-PE40 为其对照组。利用DNA 重组技术在大肠杆菌中构建、表达免疫毒素,初步研究了该免疫毒素的表达调控机制。然后采用合适的条件对成功表达的大肠杆菌发酵,利用蛋白质结构软件分析免疫毒素的结构及性质,设计纯化程序,纯度达到90%以上。对纯化的毒素进行细胞毒活性实验、免疫荧光检测、细胞ELISA 检测、荷瘤小鼠组织学检测,结果证明,我们构建的IL-1023-57-PE40 符合免疫毒素的作用机理。本博士论文在国内外首次提出以细胞因子的模拟短肽作为免疫毒素的导向,发展了免疫毒素的构建思路,同时为构建新型靶向药物用于单核巨噬瘤治疗提供了细胞学实验依据。
论文目录:
前言
第一部分:文献综述
综述一 白细胞介素10 的研究进展
1 IL-10 的结构和表达
2 IL-10 受体
3 IL-10 同源分子
4 IL-10 对免疫细胞的作用
5 IL-10 在免疫系统中的作用
6 IL-10 与肿瘤的关系
7 IL-10 对肿瘤的作用模式
8 IL-10 与几种疾病的相关性
9 结论
综述二 绿脓杆菌外毒素 A 的研究进展
1 PEA 性质
2 作用机制
3 PEA 的基本结构与功能的关系
4 PE 构建的重组免疫毒素
5 临床上的应用
6 存在的问题
7 展望
第二部分 研究内容
实验一 IL-10_(23-57) 和 IL-10_(18-57) 的设计
1 IL-10 与IL-10R 结合位点的分析
2 我们拟设计的 IL-10 模拟短肽
3 IL-10_(23-57) 基因的生成
4 对照组 IO-10_(18-57) 的设计
5 小结
实验二 IL-10_(23-57) -PE40 融合蛋白的构建与表达
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 小结
实验三 IL-10_(23-57)-PE40 表达条件与表达途径的探索
1 材料和方法
2 结果
3 讨论
4 小结
实验四 IL-10_(18-57)-PE40 的构建、表达及调控分析
1 材料与方法
2 结果
3 讨论
4 小结
实验五 IL10_(18-57)-PE40 及IL10_(23-57)-PE40 发酵与纯化
1 材料
2 发酵和纯化方法
3 结果
4 讨论
5 小结
实验六 IL-10_(23-57)-PE40 和 IL-10_(18-57)-PE40 体外细胞毒性实验
1 材料
2 方法
3 结果
4 讨论
5 小结
实验七 IL-10_(23-57)-PE40 细胞毒性机理检测
1 材料和方法
2 结果
3 讨论
4 小结
结论
参考文献
中文摘要
英文摘要
致谢
CURRICULUM VITAE
导 师 简 介
发布时间: 2005-08-26
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