Akt在胃腺癌中的表达及其对胃腺癌细胞生存与凋亡的影响

论文摘要

目的:研究Akt在胃腺癌中的表达及其对胃腺癌细胞株AGS生存、凋亡的影响,初步探讨Akt在胃腺癌发生发展中的作用及可能机制。方法:收集60例胃腺癌和20例正常对照标本制作成组织芯片,其中有效胃腺癌标本54例。运用免疫组织化学、免疫细胞化学PowerVisionTM两步法检测胃腺癌组织中Akt、PTEN、Bcl-2和Bax蛋白表达以及胃腺癌细胞株AGS中Akt蛋白表达。分别以2%FBS-RPMI 1640和10%FBS-RPMI 1640培养胃腺癌细胞株AGS,采用0.1、1、5、10、20μM Akt抑制剂API-2干预胃腺癌细胞株AGS,24h、48h后采用MTS方法检测胃腺癌细胞株AGS吸光值,评估API-2对胃腺癌细胞株AGS生存的影响;以2%FBS-RPMI 1640培养胃腺癌细胞株AGS,给予20μM Akt抑制剂API-2干预胃腺癌细胞株AGS,24h、48h后采用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒I检测胃腺癌细胞株AGS凋亡率,评估API-2对胃腺癌细胞株AGS凋亡的影响。结果:1 Akt在54例胃腺癌和20例正常对照标本中表达的阳性率分别为74.1%和45%,两者差异有统计学意义（χ2=5.515,P<0.05）;Akt表达与年龄、性别、组织学类型、浸润深度、血管浸润、淋巴结转移和病理TNM分期无关（P>0.05）,而与分化程度有关（χ2=11.307,P<0.05）。PTEN在54例胃腺癌和20例正常对照标本中表达的阳性率分别为63%和80%,两者差异无统计学意义（χ2=1.933,P>0.05）;PTEN表达与年龄、性别、组织学类型、分化程度、浸润深度、血管浸润、淋巴结转移和病理TNM分期无关（P>0.05）。Bcl-2在54例胃腺癌和20例正常对照标本中表达的阳性率分别为53.7%和15%;两者差异有统计学意义（χ2=8.908和,P<0.05）。Bcl-2表达与年龄、性别、组织学类型、分化程度、浸润深度、血管浸润、淋巴结转移和病理TNM分期无关（P>0.05）。Bax在54例胃腺癌和20例正常对照标本中表达的阳性率分别为61.1%和30%,两者差异有统计学意义（χ2=5.667,P<0.05）。Bax表达与年龄、性别、组织学类型、分化程度、浸润深度、血管浸润、淋巴结转移和病理TNM分期无关（P>0.05）。胃腺癌中Akt与PTEN表达无显著相关性（P>0.05）,Akt与Bcl-2表达呈正相关（r=0.298,P<0.05）,Akt与Bax表达无显著相关性（P>0.05）。2胃腺癌细胞株AGS中表达Akt蛋白。API-2对2%FBS-RPIM1640培养的胃腺癌细胞株AGS生存抑制呈剂量依赖性（F=6.078,P<0.05）,其中20μm API-2干预胃腺癌细胞AGS 48h后吸光值最低,生存率为37.06%。API-2对10%FBS-RPIM1640培养的胃腺癌细胞株AGS生存抑制呈剂量依赖性（F=5.043,P<0.05）,其中20μm API-2干预胃腺癌细胞AGS 48h后吸光值最低,生存率为47.94%。比较2%FBS-RPIM1640和10%FBS-RPIM1640培养的胃腺癌细胞株在不同浓度API-2干预24h或48h后吸光值,差异无统计学意义（F=0.977,P>0.05）。20μM Akt抑制剂API-2干预胃腺癌细胞株AGS 24h凋亡率较对照组（DMSO）高,差异有统计学意义（P<0.05）, 20μM Akt抑制剂API-2干预胃腺癌细胞株AGS 48h凋亡率与对照组（DMSO）比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论:1 Akt、Bcl-2和Bax在胃腺癌中的表达增加与胃癌发生发展有关;Bcl-2高表达与Akt表达增加有关。2胃腺癌细胞株AGS表达Akt蛋白,Akt抑制剂API-2抑制胃腺癌细胞株AGS生存、促进凋亡,初步提示Akt具有促进胃腺癌细胞生存、抑制凋亡的作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 前言
• 第二章 材料与方法
• 第三章 结果
• 第四章 讨论
• 第五章 结论
• 致谢
• 参考文献
• 综述
• 攻读学位期间的研究成果