哲罗鲑胚胎和仔鱼发育期的生化组成变化及温度对仔稚鱼生长的影响研究

论文摘要

国内哲罗鲑人工成功繁育时间较短,系统研究其繁殖生理特点、营养需求和特点、生长特性,从而深入推广人工繁育技术,成为哲罗鲑研究中亟待解决的重要问题。本文主要探讨了哲罗鲑胚胎和仔鱼发育期的营养变化、营养物质卵黄蛋白原的理化性质及温度对仔稚鱼生长的影响,并取得了一些有意义的研究成果。1.采用生物化学方法测定了哲罗鲑胚胎和仔鱼发育过程中蛋白质、脂类、氨基酸和脂肪酸的含量及变化。（1）蛋白质含量和总氨基酸含量从卵期到开口仔鱼期整体上呈现下降趋势,但在原肠期和眼色素沉着期有明显回升,随后在卵黄囊仔鱼期和开口仔鱼期急剧下降（除了甘氨酸（Gly）的含量从卵期到开口仔鱼期整体上呈现上升趋势）。哲罗鲑卵期含量最高的必需氨基酸为亮氨酸（Leu）,开口仔鱼期含量最高的必需氨基酸为赖氨酸（Lys）;哲罗鲑从卵期至开口仔鱼期含量最高的非必需氨基酸为谷氨酸（Glu）,必需氨基酸和非必需氨基酸中含量最低的均为胱氨酸（Cys）。（2）脂肪含量在卵黄囊仔鱼期最高,开口仔鱼期次之,卵期和开口仔鱼期之间差异不显著（P>0.05）:饱和脂肪酸（SFA）的总量从卵期到开口仔鱼期呈现下降趋势,是整个胚胎和仔鱼发育期主要的能量提供者,C18:0在不同发育时期所占比例最大,而且下降量最大;单不饱和脂肪酸（MUFA）的总量从卵期到开口仔鱼期有显著上升,其中只有C16:1n-7的含量在卵期和开口仔鱼期基本持平,差异不显著（P>0.05）。多不饱和脂肪酸（PUFA）的总量有显著上升,但在受精卵期、卵裂期、开口仔鱼期3个发育时期差异不显著（P>0.05）,其中只有22:6n-3（DHA）的含量一直在下降。2.采用柱层析、蛋白质免疫印迹和电泳等方法,对哲罗鲑的卵黄蛋白原（雌性特异蛋白）进行了系统的研究。（1）血清中的雌性蛋白与卵黄中的雌性蛋白性质相同,均为糖脂磷蛋白。与血清雌性特异蛋白一样,卵黄雌性特异蛋白的分子量也为460kDa,由分子量分别为137.8KDa、84.2KDa和10.8kDa的3个亚基组成,等电点为5.60。（2）免疫印迹和免疫扩散结果表明,卵黄雌性蛋白的兔抗血清均与哲罗鲑雌性血清发生免疫反应,不与雄性血清发生免疫反应,表明这两种蛋白均具有雌性特异性。两种蛋白的抗血清可以相互检测,表明哲罗鲑雌鱼血清中雌性蛋白与卵黄中的雌性蛋白在免疫原性上和结构上具有较高的同源性。3.通过循环控温水族箱实验,研究了哲罗鲑仔鱼在不同温度养殖环境的生长特性及规律。（1）12℃、15℃、18℃、21℃、24℃五个温度组的哲罗鲑仔鱼养殖结果存在显著差别,其中12℃、15℃、18℃这三个温度组的哲罗鲑仔鱼生长健康,21℃组在养殖第30～49天不同程度发病,24℃组的哲罗鲑仔鱼在最初养殖时出现急性死亡。（2）哲罗鲑仔鱼的生长除不同温度组之间存在较大差别外,同一温度组中哲罗鲑仔鱼个体间也存在一定差别,其中21℃组个体间分化比较大,个体分化比较明显,但12℃,15℃,18℃健康生长的哲罗鲑仔鱼个体间分化小,生长相对整齐。（3）当1218℃时,哲罗鲑仔稚鱼生长速度随温度升高而加快,18℃时达到最高;并且21℃为生长上限温度。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 哲罗鲑胚胎和仔鱼发育过程中氨基酸和脂肪酸的含量及变化
• 1 材料和方法
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 数据统计处理
• 2 结果
• 2.1 胚胎和仔鱼发育过程中常规营养成分组成及变化
• 2.2 氨基酸组成及含量的变化
• 2.3 脂肪酸组成及含量的变化
• 3 讨论
• 3.1 卵内营养成分的比较
• 3.2 蛋白质和氨基酸的变化特点
• 3.3 脂肪和脂肪酸的变化特点
• 第二章 哲罗鲑雌性蛋白的研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 血清雌性蛋白的提取，卵黄蛋白粗提液的制备及纯化
• 1.3 抗血清的制备
• 1.4 卵黄蛋白等电点的测定
• 1.5 糖、磷、脂蛋白分析
• 1.6 免疫印迹
• 2 结果
• 2.1 血清雌性蛋白的纯化
• 2.2 卵黄蛋白的纯化
• 2.3 抗血清效价的测定及免疫交叉反应
• 2.4 卵黄蛋白亚基的测定
• 2.5 雌性蛋白的特殊染色分析及等电点测定
• 2.6 免疫印迹
• 3 讨论
• 第三章 不同温度养殖的哲罗鲑仔稚鱼的生长研究
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.2 生长实验
• 1.3 取样及分析方法
• 1.4 数据统计
• 2 结果
• 2.1 不同温度养殖的哲罗鲑仔稚鱼体长和体重
• 2.2 不同温度养殖哲罗鱼仔稚鱼的生长曲线与模型
• 2.3 不同温度养殖哲罗鱼仔稚鱼的体长与体重关系
• 2.4 不同温度的肥满度
• 3 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 致谢