大鼠抑郁模型中性激素对应激反应的作用及其调节机制

论文摘要

基因-环境相互作用在抑郁症的发病中起着重要作用,其中,应激事件是一个非常关键的非遗传因素。数十年的研究揭示出抑郁症的相关病理生理学机制,大致分为两个方向,一是神经化学和神经内分泌假说,认为抑郁症的基础在于大脑内多种化学物质和体内激素的失衡,例如单胺类递质浓度的降低,下丘脑-垂体-肾上腺（HPA）轴过度激活等;另一个是神经网络假说,认为神经重构和神经元活性的改变是这一疾病的基础,其相关的分子包括神经营养/生长因子以及神经粘附因子等。性激素很大程度的参与了抑郁症和应激反应,其机制可能在于它可以调节相关的神经内分泌系统和神经网络相关因子。在这里,我们使用了强迫游泳实验和慢性应激模型,对性激素对应激行为反应的调控作用及其相关分子机制进行了一定的探讨。1.应激过程中3β-diol对行为反应以及CRH转录的类雌激素样作用促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和精氨酸加压素（AVP）作为HPA轴上游的两个神经肽,在应激过程中起着重要作用,它们对于应激的反应也受到性激素的调控。3β-diol是雄激素双氢睾酮（DHT）的代谢产物,然而它本身却不具有雄激素的作用,相反,以前的研究发现它在前列腺中起着类雌激素作用。它可以与雌激素受体结合,促进由雌激素反应元件介导的基因转录。我们用体外转染和体内试验研究了它对于应激相关的行为以及CRH和AVP表达的作用。我们的结果显示,在CHO-K1细胞系中,当转染了雌激素受体时,3β-diol能够显著性的促进CRH和AVP的启劫子活性。慢性给予3β-diol能减少强迫游泳实验中大鼠的静止不动时间,也能促进由强迫游泳引起的CRH mRNA的表达,而急性给予不能产生这一作用。这一结果表明,3β-diol在情感相关行为中起着一定的抗抑郁作用,对于CRH的调控,3β-diol表现出了类雌激素作用。2.慢性应激模型海马和前额叶皮层神经粘附因子的表达:考虑性激素参与我们研究了假手术和去势后雄性大鼠中慢性温和应激引起的行为学和神经粘附因子（NCAM）表达水平的改变。我们发现,慢性应激能显著性降低大鼠前额叶皮层中的NCAM表达,而海马各亚区中的表达不受影响。实验结果揭示了雄激素参与了应激相关的行为反应。在假手术大鼠中,慢性应激能诱导出一个典型的抑郁症表现,即欣快感缺乏,而对于去势后大鼠的欣快感体验行为不产生影响。去势术对于由应激引起的NCAM表达改变不发生作用。因此我们推测,尽管NCAM在慢性应激过程中起了一定的作用,但是它并不介导性激素对于应激相关行为的影响。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第1章 绪论（抑郁症和应激反应的机制及相关动物模型:性激素的参与）
• 1.1 引言
• 1.2 抑郁症及应激反应的机制及假说
• 1.2.1 单胺类递质假说
• 1.2.1.1 5-羟色胺
• 1.2.1.2 去甲肾上腺素
• 1.2.1.3 多巴胺
• 1.2.2 神经内分泌假说
• 1.2.2.1 下丘脑-垂体-肾上腺轴
• 1.2.2.2 下丘脑以外的脑区对HPA轴的调控
• 1.2.2.3 抗抑郁药对HPA轴的影响:GR的介导作用
• 1.2.3 神经网络假说
• 1.2.3.1 抑郁症中神经网络的改变
• 1.2.3.2 神经网络假说的分子机制
• 1.2.3.3 神经网络假说中抗抑郁药的作用机制
• 1.3 在体研究抑郁症及应激反应的动物模型
• 1.3.1 习得性无助（Learned Helplessness）
• 1.3.2 强迫游泳实验（Forced Swim Test,FST）
• 1.3.3 早期应激（Early Life Stressors）
• 1.3.4 慢性应激模型（Chronic Stress Model）
• 1.4 抑郁症及应激反应中的性别差异
• 第2章 应激过程中3β-diol对行为反应以及CRH转录的类雌激素样作用
• 2.1 引言
• 2.2 实验材料与方法
• 2.2.1 质粒与细胞培养
• 2.2.2 细胞转染与报告基因检测
• 2.2.3 实验动物
• 2.2.4 激素处理
• 2.2.5 强迫游泳实验（Forced Swim Test,FST）
• 2.2.6 组织准备
• 2.2.7 实时定量多聚酶链反应（Quantitative RT-PCR）
• 2.2.8 数据统计和分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 3β-diol在体外对CRH和AVP的调控作用
• 2.3.2 3β-diol对强迫游泳实验中大鼠行为学的影响
• 2.3.3 3β-diol对下丘脑中CRH和AVP mRNA表达的影响
• 2.4 讨论
• 2.4.1 3β-diol在体外对CRH和AVP的调控作用
• 2.4.2 3β-diol在体对应激反应以及对CRH和AVP的调控作用
• 2.4.3 3β-diol对CRH和AVP的不同作用
• 2.4.4 大脑内激素的受体前调控（prereceptor modulation）
• 第3章 大鼠慢性应激模型中神经粘附因子的表达
• 3.1 引言
• 3.2 实验材料与方法
• 3.2.1 实验动物
• 3.2.2 CMS过程
• 3.2.3 旷场试验（Open Field Test）
• 3.2.4 糖水偏好实验（Sucrose Preference rest）
• 3.2.5 组织准备
• 3.2.6 免疫印迹（Westem-blotting）
• 3.2.7 免疫组织化学（Immunohistochemistry）
• 3.2.8 图像分析
• 3.2.9 数据统计
• 3.3 结果
• 3.3.1 CMS引起的体重增加量改变
• 3.3.2 旷场试验
• 3.3.3 糖水偏好试验
• 3.3.4 NCAM在PFC的表达
• 3.3.5 NCAM在海马的表达
• 3.4 讨论
• 参考文献
• 附录（缩略词表）
• 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
• 致谢