猪PPARGC1A基因在不同组织和生长发育阶段中的差异表达

猪PPARGC1A基因在不同组织和生长发育阶段中的差异表达

论文摘要

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1 A(peroxisome proliferators-activatedreceptor-γcoactivator 1 A,PPARGC1A)是核受体PPARγ的一种转录协同刺激因子,有多种核激素受体结合位点。PPARGC1A在线粒体增殖和呼吸、脂肪形成和脂肪细胞分化以及肝糖异生等生化途径中起着十分重要的作用,同时它还可诱导肌纤维类型从酵解型向有氧代谢型转换,进而改善肉质。PPARGC1A还能够与肌肉组织的选择性转录因子MEF2C(myocyte-specific enhancer 2C,肌细胞特异性增强子2C)结合,控制另一肉质候选基因GLUT4在肌肉组织中的表达。PPARGC1A已成为猪肉质候选基因中新的研究热点。本研究采用Taqman探针荧光定量PCR技术,以β-actin基因为内参照,检测了PPARGC1A基因在不同猪种、不同组织和不同生长阶段间的表达变化,并分析PPARGC1A基因的表达规律与肉质性状间的相关性。主要结果如下:1.太湖猪和长白猪背最长肌中PPARGC1A基因表达的时序性研究表明,其表达模式总体上呈现先上升后下降的趋势,但出现拐点的月龄不同。太湖猪和长白猪(0,1,2,3,4和5月龄)分别于1和2月龄到达最高点,之后急剧下降,太湖猪3月龄后逐步上升,长白猪则持续下降。品种间相同月龄的比较发现,0和2月龄时长白猪PPARGC1A基因的表达量显著高于太湖猪(P<0.05),3月龄时长白猪PPARGC1A基因的表达量极显著高于太湖猪(P<0.01),5月龄时太湖猪PPARGC1A基因的表达量显著高于长白猪(P<0.05)。其它月龄间两品种差异均不显著(P>0.05)。2.太湖猪和长白猪背部皮下脂肪组织中PPARGC1A基因表达的时序性研究结果表明,其表达模式基本一致,即先下降后上升,分别于2和3月龄至最低点,之后长白猪中的表达量逐步升高,太湖猪则急剧上升至4月龄,5月龄又迅速下降但仍保持较高水平。品种间相同月龄的比较发现,3和4月龄时太湖猪PPARGC1A基因的表达量极显著高于长白猪(P<0.01),1月龄时太湖猪PPARGC1A基因的表达量显著高于长白猪(P<0.05)。其它月龄间两品种差异均不显著(P>0.05)。3.6月龄长白猪PPARGC1A基因在不同组织中表达的研究表明,PPARGC1A在10个不同组织中均有表达,表达丰度由高到低依次为:肾脏、肝脏、十二指肠、肠淋巴结、脾脏、心脏、股四头肌、腰大肌、背最长肌和背膘,在肾脏中的表达量最高且极显著高于其他各组织(P<0.01)。4.PPARGC1A基因表达量与屠宰性状的相关性研究结果表明:长白猪肌肉中PPARGC1A基因的表达与背膘厚、脂肪细胞体积和肌纤维面积均呈负相关,相关性均达显著水平(P<0.05);脂肪中的表达与背膘厚、肌纤维面积和脂肪细胞体积呈正相关,且相关性都达显著水平(P<0.05)。太湖猪肌肉中PPARGC1A基因的表达量与背膘厚、肌纤维面积和脂肪细胞体积均呈负相关,与其中背膘厚和肌纤维面积呈显著负相关(P<0.05);脂肪中的表达量与背膘厚、肌纤维面积和脂肪细胞体积呈正相关但相关性不显著(P>0.05)。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 1 文献综述
  • 1.1 PPARGC1A的研究进展
  • 1.1.1 PPARGC1A的发现及命名
  • 1.1.2 PPARGC1A的结构
  • 1.1.3 PPARGC1A的组织分布及影响因素
  • 1.1.4 PPARGC1A的作用机制
  • 1.1.5 PPARGC1A的生理功能
  • 1.1.6 PPARGC1A基因在猪中的研究现状
  • 1.2 主要研究内容和目的意义
  • 1.2.1 主要研究内容
  • 1.2.2 研究目的及意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 试验材料
  • 2.1.1 试验动物来源
  • 2.1.2 样品的采集
  • 2.2 主要仪器设备
  • 2.3 主要试剂
  • 2.4 常规试验试剂的配置
  • 2.5 试剂和器皿的前处理
  • 2.6 试验方法
  • 2.6.1 性状测定
  • 2.6.2 RNA的提取
  • 2.6.3 总RNA质量和浓度检测
  • 2.6.4 cDNA的合成
  • 2.6.5 PPARGC1A mRNA表达量定量分析
  • 2.7 统计分析
  • 3 结果分析
  • 3.1 RNA的质检
  • 3.2 序列验证结果
  • 3.3 Real-time PCR标准曲线的建立
  • 3.4 PPARGC1A基因在不同年龄阶段背最长肌中的表达变化
  • 3.5 PPARGC1A基因在不同年龄阶段皮下脂肪中的表达量
  • 3.6 PPARGC1A基因在不同组织的表达差异
  • 3.7 背膘厚、脂肪细胞体积和肌纤维面积的发育变化
  • 3.8 PPARGC1A基因表达水平与屠宰性状的相关分析
  • 4 讨论
  • 4.1 实验材料的选择
  • 4.2 肌肉和脂肪组织的发育性变化
  • 4.3 PPARGC1A基因的表达差异
  • 4.3.1 实时荧光定量PCR技术
  • 4.3.2 PPARGC1A基因表达量在肌肉中的发育性变化
  • 4.3.3 PPARGC1A基因表达量在皮下脂肪中的发育性变化
  • 4.3.4 PPARGC1A基因在不同组织中的差异表达规律
  • 4.3.5 PPARGC1A基因的表达变化与性状间的相关性
  • 4.4 本研究的局限
  • 4.5 下一步的工作
  • 5 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 附录1
  • 附录2
  • 相关论文文献

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