论文摘要
本文结合日本大耳兔生物学特性,运用放射免疫法（RIA）、实时荧光定量PCR（real time-PCR）及同期发情等技术,研究了蜂王浆对日本大耳兔生长及繁殖性能的影响,旨在探索蜂王浆提高动物生长及繁殖性能的作用机制,进而为家畜生产性能的提高、生殖疾病的防治、以及濒临灭绝动物的保种等方面提供新的科学依据和重要借鉴。主要研究结果如下1.蜂王浆对雄性日本大耳兔生长及繁殖性能的影响：分别按体重0.2%（高剂量组）和0.1%（低剂量组）的量,给高、低剂量组的18只2月龄雄性日本大耳兔每天空腹灌胃新鲜蜂王浆,对照组18只雄兔灌胃体重0.1%的生理盐水,每周同一时间称重。运用RIA依次测定灌胃Od、40d、60d和80d的血清性激素六项：促黄体素（LH）,促卵泡素（FSH）,雌二醇（E2）,孕激素（P）,睾酮（T）和催乳素（PRL）；70d后活体检测精子密度、活力和畸形率；80d后屠宰并分离主要脏器,计算各自脏器系数；右侧睾丸作成石蜡切片用于组织形态学观察。结果表明：（1）灌胃之前,3个实验组之间的血清性激素六项均差异不显著（P>0.05）。灌胃40d、60d和80d后,高、低剂量组的LH.FSH和T均极显著高于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间差异不显著（P>0.05）；而E2、P和PRL在3组之间均差异不显著（P>0.05）。（2）高、低剂量组的精子密度极显著大于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间差异不显著（P>0.05）；低剂量组的精子活力极显著高于对照组,而对照组又极显著高于高剂量组（P<0.01）；3组之间的精子畸形率差异不显著（P>0.05）。（3）第0-8周,3组之间的每周龄体重差异不显著（P>0.05）；之后,高、低剂量组极显著高于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间差异不显著（P>0.05）。屠宰测定时,高、低剂量组的雄兔睾丸、下丘脑和脾脏脏器系数都极显著大于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间无显著差异（P>0.05）；脑、肺和膀胱等其它主要脏器系数均差异不显著（P>0.05）。（4）灌胃80d后,对照组雄兔睾丸曲细精管生精上皮细胞数量明显少于试验组,生精上皮较薄,生精上皮细胞排列疏松,中央管腔更大管腔内大多为初级精母细胞和次级精母细胞；试验组的曲细精管管腔相对缩小,被精子细胞及精子所充实,细胞层数增多,精原细胞附于基膜,初级精母细胞、精子细胞和精子依次紧密排列延伸至管腔内,核染色明显管腔中可见大量的精子。本研究结果说明：蜂王浆能促进雄兔下丘脑、睾丸和脾脏发育；灌胃体重0.1%的蜂王浆能显著提高精子密度和精子活力；蜂王浆灌胃40d后,能显著提高血清中的LH、FSH和T浓度,对E2、P和PRL没有影响。2.蜂王浆对初情期前雌性日本大耳兔生长发育和性激素受体mRNA表达的影响：分别按体重0.2%和0.1%的量,给高、低剂量组12只50日龄的雌性日本大耳兔每天进行空腹灌胃新鲜蜂王浆,对照组12只雌兔灌胃体重0.1%的生理盐水。40d后股动脉放血处死,摘取下丘脑、右侧卵巢和右侧子宫,用于激素受体mRNA表达的检测；摘取心脏、左侧子宫和左侧卵巢等器官,用于脏器系数的测定；采用RIA法测定血清性激素六项。结果表明：（1）灌胃12d,对照组兔子没有换毛现象,高、低剂量组兔子分别出现67%和75%的换毛率。（2）蜂王浆对体重、心脏和卵巢等脏器系数无显著影响（P>0.05）。（3）高、低剂量组血液中的E2浓度极显著高于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间差异不显著（P>0.05）；其它性激素在3个实验组之间差异不显著（P>0.05）。（4）高剂量组下丘脑GnRH的mRNA表达量极显著低于对照组和低剂量组（P<0.01）,低剂量组与对照组之间差异不显著（P>0.05）；高剂量组卵巢LHR和FSHR的mRNA表达量极显著低于对照组（P<0.01）,显著低于低剂量组（P<0.05）,低剂量组与对照组之间差异不显著（P>0.05）；高剂量组子宫ERα和卵巢ERβ的mRNA表达量极显著低于对照组（P<0.01）,但高、低剂量组之间以及低剂量组与对照组之间均差异不显著（P>0.05）。本研究结果说明：蜂王浆可以促进初情期前雌性日本大耳兔换毛,提高血清中E2水平,抑制下丘脑GnRH、卵巢LHRFSHR、ERβ以及子宫ER。的nRNA表达,对主要脏器系数无显著影响。3.蜂王浆对成年雌性日本大耳兔繁殖性能的影响：首先研究氯前列腺烯醇钠（PG）诱导健康经产母兔同期发情的效果,然后分别按体重0.2%和0.1%的量,给PG处理后的高、低剂量组健康经产母兔每天空腹灌胃新鲜蜂王浆,对照组灌胃体重0.1%的生理盐水,18 d后配种,计算繁殖性能相关指标。结果显示：（1）注射0.25mg／只PG后的健康经产母兔,LH、FSH和E2浓度分别在9h和48h达到最大值和最小值,P浓度则为最小值和最大值；PG处理后每天的LH、FSH、E2均在19：00达最大值,P达最小值：PG处理后第12d的LH、FSH和E2均高于第4d、8d和16d,P则低于第4d、8d和16d,差异达显著水平（P<0.05）。（2）蜂王浆灌胃高、低剂量组的FSH、LH、E2和P浓度均比对照组提前达到最高值和最低值高、低剂量组之间差异不显著（P>0.05）,最高值与最低值分别在3个实验组之间差异不显著（P>0.05）。（3）高、低剂量组的窝产仔数和成活率与对照组之间差异不显著（P>0.05）；卵泡数、排卵数和初生个体重、初生窝重泌乳力、断奶个体重、断奶窝重都极显著高于对照组（P<0.01）,高、低剂量组之间均差异不显著（P>0.05）。这些结果表明：注射0.25mg/只的PG能使母兔分别在9h和48h达到发情盛期和发情后期,12d后进入下一个发情周期,每天的激素极值出现在19：00。蜂王浆能缩短母兔发情周期,对处于相同生理周期母兔的激素没有影响；蜂王浆能促进母兔卵泡发育和排卵,提高初生窝重、初生个体重、泌乳力、断奶个体重和断奶窝重,对母兔窝产仔数没有影响。