论文摘要
目的:构建单核细胞组织因子（TF）mRNA诱导表达的细胞研究模型,探讨非诺贝特对脂多糖（LPS）诱导的TF表达和促凝血活性（PCA）的影响;初步探讨全血组织因子凝血时间法（TiFaCT）测定全血TF-PCA在血栓性疾病中的应用。方法:使用不同浓度的脂多糖（LPS）观察不同时间点单核细胞株THP-1的TFmRNA表达情况,以构建TFmRNA诱导表达的细胞模型。分别用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、流式细胞术（FCM）和TF凝血时间法（TiFaCT）检测非诺贝特对LPS刺激下THP-1的TFmRNA含量、TF蛋白表达水平和TF-PCA的影响。使用全血TiFaCT法测定健康人及血栓性疾病病人的基础状态TF-PCA和LPS刺激后的TF-PCA。结果: 1研究单核细胞TFmRNA诱导表达的实验模型作用条件为10μg/ml LPS作用3h。非诺贝特抑制LPS诱导下THP-1细胞的TFmRNA合成增加、TF蛋白表达上调和TF-PCA的增强,其抑制率分别达到LPS组的66%、47%和29%（P<0.05）。50μmol/L的非诺贝特即可明显抑制LPS诱导的TF-PCA。非诺贝特单独使用不影响基础水平TF-PCA。2使用全血TiFaCT法测得血栓性疾病病人的基础水平TF-PCA和LPS刺激下TF-PCA分别为（1.33±0.53）任意单位（AU）和（9.42±4.79）AU,明显高于正常对照组的（0.31±0.29） AU和（1.59±1.26） AU。伴发弥散性血管内凝血（DIC）的血栓性疾病病人LPS诱导的全血TF-PCA明显高于未伴发DIC组。结论:1建立了研究单核细胞TFmRNA表达的细胞实验模型。2非诺贝特明显抑制TF表达和活性,在不影响基础TF-PCA的情况下能有效抑制LPS诱导下的TF-PCA,推测具有较好的抗栓应用前景。3使用全血TiFaCT法测定血栓性疾病病人全血TF-PCA的结果显示血栓性疾病病人基础水平和LPS刺激后的全血TF-PCA较正常人明显升高,且伴发DIC的血栓性疾病病人LPS诱导的全血TF-PCA明显高于不伴发DIC组。提示全血TiFaCT法这一简单、实用的方法具有评价血栓性疾病病人血栓形成风险的临床应用潜力。